专利名称：治疗类风湿性关节炎的药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗类风湿性关节炎的药物，具体地说是以中草药为原料制备的中成药；本发明还涉及该药物的制备方法。
背景技术：
现代医学对类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，下简称RA)的发病机理尚不十分清楚，目前普遍认为是一极其复杂的自身免疫过程。中医将本病归属于“痹病”(Arthralgia Syndrome)范畴。中医认为寒冷、潮湿、疲劳、创伤及精神刺激、营养不良等均可成为本病的诱因。营血不足、气血虚弱、肝肾亏损，复受风寒潮湿是本病的主要因素。
目前RA的发病率仍呈上升趋势。RA病有反复发作，进行性病变的特点，致残率很高，对人们的工作、生活影响极大。目前，现代医学对RA尚无有效的根治办法。美国的发生率约为成人的1％。我国患病率约为0.32-0.36％，可发生于青少年、成人及老人，女性多于男性。
由于本病的病因不明，目前临床上，西医主要采取减轻患者的病症状，控制疾病的发展，进行已破环的关节骨的修复，而缺乏根治本病的方案以及预防本病的措施。中医按临床病程分期、分型辩证治疗。中药复方治疗RA具有独特的优势既能够抗炎镇痛，又具备免疫抑制及免疫调节效应，表现出整体调节、多层次、多环节、多靶点的作用，而且还有缓解和对抗西药毒副作用的功效，易于长期服用。
但存在的问题是由于RA病情反复发作，病程长，不易治愈的特点，西药治疗常用非甾体抗炎药(NSAIDS)、免疫抑制剂、糖皮质激素等进行长期治疗，因此，临床常出现西药严重的不良反应，如胃肠道出血，骨髓抑制，肾功能损害，肺感染等并发症。中医中药的治疗虽然具有疗效好、易于长期服用等优点，但同时也存在中医疗效可重复性差，缺乏标准化，规范化的药理、药化、药效学的研究。更有中药现有治疗RA的处方及中成药产品，多用毒副作用大的一些中药，如附子、制川乌、制草乌、制马钱子、麻黄、细辛、防己、雷公藤、全竭、蜈蚣、土鳖虫、毒蛇等，于人体有害。

发明内容
本发明的目的在于改进现有技术之缺点而提供一种规范化、重复性好、无毒副作用、疗效佳的治疗类风湿性关节炎的药物。
本发明的另一目的是提供该治疗类风湿性关节炎的药物的制备方法。
为实现上述目的，本发明采取下述设计方案该方案是基于祖国医学对类风湿性关节炎症状的认识及治疗原则，参考现代药理研究成果，从祖国医药学宝库中，筛选出活血祛风、消肿止痛、通利关节的中草药，按中医理论组方，提取精华，使其达消炎、镇痛、通利关节而又无毒副作用的目的；另外，通过标准化的生产制备，使药理、药化、药效规范化。
本发明药物是由下列组分按重量比制成桑枝 2-6当归 2-6防风 1-4川牛膝 1-4将上述各组分制成本发明药物的生产方法是1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材，分别经净选，去除杂质，清水淋洗干净，切碎，容置于提取罐内，分别加各药物质量8-16倍量的水，煮沸0.8-1.2小时，各药液经200目筛网过滤，取滤液，在减压条件下，各提取液浓缩至相对密度，为1.05-1.08(60℃热测)的浓缩液，再经120目筛过滤；2、将滤后各药材，按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次；3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并，进行喷雾干燥，分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物；4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
本发明选用的桑枝性平，祛风湿，利关节，行水消肿；当归性温，补血活血，祛湿散寒，养血除痹；防风性温，祛风散寒，胜湿止痛，消肿散结；川牛膝性平，活血祛瘀，通利关节。四药提取物含有下述活血抗炎及止痛的活性成分桑枝黄酮，当归阿魏酸，当归多糖，防风香豆素，防风色原酮，防风多糖，川牛膝杯苋甾酮，川牛膝多糖等。四药合伍，协同共达活血祛风，消肿止痛，通利关节的功能，其适用于类风湿性关节炎的治疗及预防保健，如关节肿胀；关节呈对称性、持续性的疼痛与压痛；早晨或睡醒之后，关节出现僵硬、活动不灵，需活动或温暖后方能缓解。实验室检查见血沉(ESR)增快；C反应蛋白(CRP)增高；类风湿因子(RF)呈阳性等。
本发明药物使用方法每日两次，每次2粒胶囊。
为表明本发明药物对类风湿性关节炎病症的治疗效果，本发明药物曾于2003-2004年进行了动物试验。现把动物试验设置方案与结果介绍如下1、实验材料1.1试验药物本发明药[药品试验代号生科健络(JEF)]呈褐色细粉，易吸潮。
批号03001；生产日期2003.12.03；由香港生物科技研究院有限公司提供。
1.2阳性对照药万通筋骨片，国药准字Z20025183号，通化万通药业股份有限公司生产，批号20031036。
1.3试验动物NIH小鼠，由广东省实验动物中心提供，动物合格证号2002A022；实验环境合格证粤检证字2001C020号。
1.4试剂及药品致炎剂二甲苯，分析纯，广州化学试剂厂生产。
冰醋酸，AR级，广州化学试剂厂生产。
1.5剂量设置本发明药及阳性对照药的给药剂量如下表1所示。
表1 按体表面积等效系数换算给药剂量(g/kg表示克/千克，下同)

剂量设计依据本发明药给70千克成人每日服用的剂量为1克，按体表积换算成小鼠的等效剂量为0.129克/千克。阳性对照药均采用相当于成人服用剂量的3倍作为对照剂量，因此，万通筋骨片成人(70千克)的每日服用剂量为3.077克，按体表面积换算成小鼠的等效剂量为0.397克/千克，3倍剂量为1.190克/千克。
2、实验方法2.1本发明药急性毒性试验2.1.1本发明药的一次经口最大耐受量试验选用体重18-22克健康NIH小鼠40只，雌雄各半，实验前禁食不禁水12小时以上，每只小鼠均一次大剂量给予本发明药混悬液最大浓度和最大体积0.8毫升；给药后连续观察7天，判断毒性反应，注意小鼠在7天观察期内是否出现精神、活动、饮食异常情况及死亡情况。对于死亡的小鼠应立即解剖，肉眼观察重要脏器心、肝、脾、肺、肾等是否有明显病变。
2.1.2本发明药的多次给药的最大耐受量实验选用体重18-22克健康NTH小鼠40只，雌雄各半，实验前禁食不禁水12小时以上，然后每隔2小时给药一次，给予本发明药混悬液最大浓度进行灌胃0.5毫升/只；全天共给药4次，给药后连续观察7天，判断毒性反应。记录小鼠给予受试样品期间及观察期内是否出现精神，活动，饮食异常情况及死亡情况，对于死亡的小鼠立即进行解剖观察心、肝、脾、肺、肾等。计算受试样品的最大耐受量。
2.2.本发明药对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的作用选取成年健康NIH小鼠50只，体重25-30克，均为雄性。设置5个剂量组，分别为空白对照组、本发明药低、中、高剂量组和阳性对照组，每组10只小鼠。
实验开始前各组小鼠分别给药3天，其中本发明药低、中、高剂量组分别给药剂量为0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克，相当于70千克成人临床拟用剂量的1倍、3倍、9倍；空白对照组给药等体积的生理盐水；阳性对照组给予万通筋骨片1.190克/千克，相当于70千克成人临床服用剂量3.077克的3倍。于末次给药30分钟后开始进行致炎作用。将二甲苯0.05毫升滴于小鼠的右耳，以左耳作为对照。滴加致炎剂后30分钟后将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9毫米的打孔器分别在左右两耳同一部位打下圆耳片，称重，求左、右耳片重量之差与左耳重量的比值作为肿胀度，比较组间差异。
肿胀度＝(右耳重-左耳重)/左耳重*100％抑制率％＝(空白组肿胀度-给药组肿胀度)/空白组肿胀度×100％2.3本发明药的镇痛作用试验(化学剌激法)取体重20±2克的小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，即空白对照组，本发明药低、中、高剂量组和阳性对照组，每组10只小鼠。实验前连续给药3天，其中本发明药低、中、高剂量组小鼠灌胃剂量为0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克，相当于70千克的成年人每日服用本发明药的1、3、9倍；阳性对照组给予万通筋骨片1.190克/千克，相当于70千克成人临床服用剂量的3倍，相当于70千克成人临床服用剂量3.077克的3倍；空白对照组小鼠灌胃给予等体积的生理盐水。于末次给药1小时后，每鼠腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.1毫升/10克体重，记录注射致痛剂后20分钟内各鼠扭体次数，计算药物的镇痛百分率。
药物的镇痛抑制率％＝(空白组扭体数-给药组扭体数)÷空白组扭体数×100％3.实验结果3.1本发明药急性毒性试验结果3.1.1本发明药的一次经口最大耐受量试验结果小鼠灌胃给予本发明药混悬液最大浓度(该样品的最大溶解度为50％，为深褐色匀质溶液)和最大体积0.8毫升后，当天无出现动物死亡；连续观察7天，小鼠毛色、活动、饮食均正常，无死亡发生。给药后的第8天处死动物，解剖肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等均无异常发现。由于给药体积及浓度不能再增大，按体表面积折算成70千克的成年人一次性口服本发明药的总量不少于155.2克，相当于70千克的成年人每日服用剂量(1克/日)的155倍。
3.1.2本发明药的多次给药的最大耐受量试验结果小鼠当天给予受试样品最大浓度(该样品的最大溶解度为50％；为深褐色匀质溶液)共计4次后无一例死亡，连续观察7天见小鼠毛色光滑，活动良好，饮食正常，无死亡发生。给药后的第8天处死动物，解剖肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等均无异常发现。提示小鼠给予本发明药混悬液的总量为1克，即本发明药对于小鼠的最大耐受量不少于1克，按体重表面积折算成70千克的成年人服用剂量不少于387.9克，相当于70千克的成年人每日服用剂量(1克/日)的约388倍，由此说明，本发明药在此剂量下，未出现毒性反应。
3.2本发明药的对二甲苯致小鼠耳肿胀的试验结果二甲苯致小鼠耳肿胀的试验结果见表2所示。
表2 对小鼠二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的作用(X±SD，n＝10)


与空白对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，△P＞0.05由以上实验结果可得，小鼠经二甲苯滴耳后，引起毛细血管的通透性增加，使炎性物质渗出从而导致耳肿胀，本发明药的抑制率分别为11.4％、33.8％、48.7％。其中本发明药的中、高剂量组的肿胀度与同期空白对照相对，具有显著性差异；阳性对照组的抑制率为41.1％，与同期空白组相比，具有显著性差异；因此，初步认为本发明药具有一定的抗炎作用，但二甲苯致炎症模型仅为抗炎药理作用的初筛，需进一步进行其它抗炎实验综合评价药的作用效果。
3.3本发明药对化学剌激引起小鼠扭体反应的镇痛作用本发明药对冰醋酸引起小鼠腹腔痛疼的镇痛作用如表3所示。
表3本发明药对化学剌激引起小鼠扭体的镇痛作用(X±SD，n＝10)

与空白对照组相比，*P＜0.05，***P＜0.001。
由实验结果可得，本发明药的低、中、高剂量组镇痛抑制率分别为30.3％、53.1％、56.5％；本发明药的三个剂量组均能减少冰醋酸所致小鼠扭体次数，与同期空白对照组相比，均具有显著性差异(*P＜0.05，***P＜0.01)；阳性对照组的镇痛抑制率为41.6％，与同期空白对照组相比具有显著性差异。
3.实验结论综合上述实验结构提示，本发明药经小鼠一次及一日多次口服给药，其最大耐受量相当于70千克的成年人每日服用剂量(1克/日)的155倍和388倍，均未出现毒性反应；对小鼠二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀试验，本发明药的中、高剂量均具有显著的消炎作用，抑制率分别为33.8％和48.7％；对化学剌激引致小鼠扭体试验，本发明药的三个剂量组均有显著的镇痛作用，抑制率分别为30.3％，53.1％和56.5％。以上试验中，本发明药的三个剂量之间有较好的量效关系。在以上试验中，本发明药高剂量组的给药剂量(1.161克/千克)低于阳性对照药万通筋骨片的给药剂量(1.190克/千克)，显示本发明药有较好的药理活性。
具体实施例方式
实施例1本发明按重量比选取下列药物成分桑枝2，当归 6，防风1，川牛膝4将上述各组分制成本发明药物的生产方法是1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材，分别经净选，去除杂质，清水淋洗干净，切碎，容置于提取罐内，分别加各药物质量8倍量的水，煮沸0.8小时，各药液经200目筛网过滤，取滤液，在减压条件下，各提取液浓缩至相对密度，为1.05(60℃热测)的浓缩液，再经120目筛过滤；
2、将滤后各药材，按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次；3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并，进行喷雾干燥，分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物；4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
5、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
实施例2本发明按重量比选取下列药物成分桑枝6，当归 2，防风4，川牛膝1；将上述各组分制成本发明药物的生产方法是1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材，分别经净选，去除杂质，清水淋洗干净，切碎，容置于提取罐内，分别加各药物质量16倍量的水，煮沸1.2小时，各药液经200目筛网过滤，取滤液，在减压条件下，各提取液浓缩至相对密度，为1.08(60℃热测)的浓缩液，再经120目筛过滤；2、将滤后各药材，按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次；3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并，进行喷雾干燥，分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物；4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
5、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
实施例3本发明按重量比选取下列药物成分桑枝3，当归 4，防风2，川牛膝3；
将上述各组分制成本发明药物的生产方法是1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材，分别经净选，去除杂质，清水淋洗干净，切碎，容置于提取罐内，分别加各药物质量10倍量的水，煮沸1小时，各药液经200目筛网过滤，取滤液，在减压条件下，各提取液浓缩至相对密度，为1.07(60℃热测)的浓缩液，再经120目筛过滤；2、将滤后各药材，按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次；3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并，进行喷雾干燥，分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物；4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
5、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
权利要求
1.一种治疗类风湿性关节炎的药物，其特征在于本发明药物是由下述组分按重量比制成桑枝2-6，当归2-6，防风1-4，川牛膝1-4。
2.如权利要求1所述的一种治疗类风湿性关节炎的药物的制备方法，其特征在于(1)、按重量比选取下列药物成分桑枝2-6，当归2-6，防风1-4，川牛膝1-4；(2)、将上述药材分别经净选，去除杂质，清水淋洗干净，切碎，容置于提取罐内，分别加各药物质量8-16倍量的水，煮沸0.8-1.2小时，各药液经200目筛网过筛，取滤液，在减压条件下，各提取液浓缩至相对密度为1.05-1.08(60℃热测)的浓缩液，再经120目筛过筛；(3)、将滤后各药材，按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次；(4)、把上述各药材三次提取的浓缩液合并，进行喷雾干燥，分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物；(5)、将上述各药材提取物经60目筛网过滤，置混合机内进行混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品。
全文摘要
一种治疗类风湿性关节炎的药物及其制备方法，其按重量比选用下述组分，桑枝(2－6)、当归(2－6)、防风(1－4)、川牛膝(1－4)；其制备方法是，将上述药材分别经洗净、切碎、置于提取罐内，分别加各药物质量8－16倍量的水，煮沸0.8－1.2小时，各药液经200目筛网过筛，取滤液，在减压条件下，各提取液浓缩至相对密度为1.05－1.08(60℃热测)的浓缩液，再经120目筛过筛；将滤后各药材，按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次；再把上述各药材三次提取的浓缩液合并，喷雾干燥，分别得各提取物；将上述各药材提取物经60目筛网过筛，置混合机内混合均匀，进行胶囊充填，即为本发明胶囊剂药品；本发明药适用于类风湿性关节炎的治疗及预防保健。
文档编号A61P19/00GK1820772SQ20051000738
公开日2006年8月23日 申请日期2005年2月16日 优先权日2005年2月16日
发明者何国强, 程新敏, 杨成安, 魏英伟, 陈志刚, 黄锦华, 游佩珊, 刘子芸, 林壮大 申请人:香港生物科技研究院有限公司