专利名称：一种天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种天然蚕丝的处理工艺，特别涉及一种天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯的制备方法，本发明方法所制备的产品的用途也于同日递交了专利申请。
背景技术：
目前，在临床上使用的人体体内手术用补片、支撑物或植入物等医用器材，都是由不同的原料制备的，因为它们使用部位不同，要求的条件不同，没有一种原料能够同时满足所有的条件可以用来制备这类医用器材。如疝修补所用的人造网状补片，制备这类器理想的材材料是强度高、柔韧性好。目前临床上制备这类补片采用聚丙烯和膨化聚四氟乙烯为原材料，这种原材料强度好、修补牢固、不易复发、无毒性及异物反应，但质地柔性不佳、 比较坚硬。由于疝修补手术需要围绕男患者精索周围进行固定且修补部位临近皮下，因而常常导致精索受到压迫，血液循环不畅，以致于导致缺血性睾丸炎，睾丸萎缩及射精障碍综合症等；且患者从皮肤表面即可触及补片，会有异物感及不适感；另外由于这种材料不可吸收，这种不适感会伴随患者终身。再如，肌腱损伤损伤手术修补所使用的外固定补片，需要质地坚韧，这样才能保证其能够在术后耐受高强度拉力以免造成手术后的再撕裂；而目前临床使用的补片是以去细胞的猪皮为原料制备的，这种补片低免疫原性、排斥反应小、力学性能好，能够在术后耐受高强度拉力，可以满足临床肌腱补片所需要求，但是制作工艺繁琐，成本高昂，且会出现外源性异种异体产品的免疫反应。人造血管及血管搭桥、支架植入作为大血管替代品或扩张梗塞动脉的常规治疗方式已广泛应用于临床，有明确的治疗效果，但继之产生的问题是血栓形成、扩张部位的再狭窄，因为制造这些医用器材的原料，是尼龙、涤纶、聚四氟乙稀或钛，钛合金、不锈钢等，这些材料无法附着人内皮细胞形成内皮保护层，因而会导致血栓形成及再次狭窄梗塞。经查阅，虽然临床上也曾以未处理的蚕丝作为伤口缝线，但由于其容易引起缝合部位严重的的炎症反应，表现为局部组织的红肿痛热，渗出，积液，所以并没有以其作为制备医疗器材原料的记载。

发明内容
本发明人经过大量的实验研究，终于找到了一种优良的、可制备多种人体体内手术医用器材的原料及其制备方法。本发明的目的是提供一种天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯的制备方法。本发明方法通过以下技术方案实现，步骤包括
1)将天然蚕丝生丝编织成体内手术所需任意大小形态的医用器材；
2)用碳酸钠和十二烷基硫酸钠按所述比例配制混合液；之后将医用器材放入混合液中，在40-80°C的条件下震荡脱胶30-40分钟，弃去混合液，混合液各组分的质量比为碳酸钠去离子水=0.01-0. 10 100，十二烷基硫酸钠去离子水=0.01-0. 3:100 ；
3)加入与混合液等量的重量百分比浓度为1%的柠檬酸，中和残留；然后用去离子水将医用器材震荡清洗3次，每次10-30分钟；
4)将步骤3)处理后的医用器材浸入0.IM含链霉蛋白酶磷酸盐缓冲溶液中，在40-60°C 的条件下震荡60-120分钟，进行进一步脱胶；所述0. IM含链霉蛋白酶磷酸盐缓冲溶液的质量比为链霉蛋白酶0. IM磷酸盐缓冲液=1:200-500 ；
5)酶脱胶完毕后，将溶液加热至40-85°C，灭酶活性10分钟；
6)将医用器材用去离子水中清洗3次，每次10分钟；
7)将医用器材取出，晾干，用环氧乙烷灭菌，包装。本发明的优点和特点
1.本发明方法制备的产品具有良好的力学性能和柔韧性，适合制备多种体内医用器材；且由于蚕丝需要很长一段时间才能彻底降解吸收，所以在本产品降解之前创面已经可以牢固愈合。2.本发明方法制备的产品经动物测试，体内无炎症反应，免疫排斥反应，毒性反应；体外(力学，细胞学)，获得了满意的效果。3.本发明方法制备的产品可作为制备多数医用器材的原料，如可以制备人体体内手术补片、人造血管或血管支架等。4.通过个性化对待每一位患者，可望很好地解决人造血管及血管搭桥、支架植入后存在的血栓形成及扩张部位的再狭窄问题。实验证明，本发明产品非常适合细胞的粘附， 生长，增生及分化；使用患者自体上皮细胞，用组织工程的方法在编织人造血管内层添加一层患者本人的内皮组织，即可望解决上述再栓塞及血栓形成的问题。5.本方法所需原料在我国存在广泛，制备工艺简单，产品制造成本低；与人工合成相比较，本法方法采用的试剂均无毒，且无废物残留，对操作人员及环境无任何毒性伤害。本申请中所采用的名词具有以下含义
天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯是指将天然蚕丝经处理后得到的、丝胶蛋白已被彻底去除、且应用于人体时不会引起炎症反应但仍然保持天然蚕丝力学性能的蚕丝。
具体实施例方式为了理解本发明，下面以实施例做进一步的说明，但不限制本发明。实施例1 制备人体体内手术用补片
将天然蚕丝单根或双根生丝编织成为尺寸规格为6X7. 5cm、6X7. 5cm、6X13. 8cm、 15 X 15cm、25 X 35cm、网孔直径为l_2mm的几种长方形补片。取0. 10克碳酸钠和3克十二烷基硫酸钠，溶于1000克去离子水中，充分搅拌，制成混合液；将补片放入混合液中，在60°C 的条件下震荡脱胶30分钟；弃去混合液，加入1000克的重量百分比浓度为1%的柠檬酸充分洗涤；再用去离子水震荡清洗3次，每次20分钟。将清洗后的补片浸入含链霉蛋白酶的 0. IM磷酸盐缓冲溶液(PH=S)中，在40°C的条件下震荡90分钟进行酶脱胶，完毕后，将溶液加热至85°C，灭酶活性10分钟；最后，将蚕丝补片在去离子水中清洗3次，每次10分钟；取出，晾干，用环氧乙烷灭菌，包装。含链霉蛋白酶的0. IM磷酸盐缓冲溶液(PH=S)的制备取0. IM的磷酸盐缓冲溶液 (PH=8) 500克，加入1克链霉蛋白酶，即得。
实施例2 制备人造血管
将天然蚕丝编织成所需形态的补片；取去离子水1000克，加入1克碳酸钠和3克十二烷基硫酸钠，充分搅拌溶解配成混合液；将补片放入混合液中，在80°C的条件下震荡脱胶 30分钟；弃去混合液，加入1000毫升重量百分比浓度为1%的柠檬酸充分洗涤；再用去离子水震荡清洗3次，每次20分钟。之后将补片浸入含链霉蛋白酶的0. IM磷酸盐缓冲溶液 (PH=S)中，按实施例1继续操作，即得以天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯制备的人体体内手术用补片。含链霉蛋白酶的0. IM磷酸盐缓冲溶液(PH=S)的制备取0. IM的磷酸盐缓冲溶液 (PH=8) 200克，加入1克链霉蛋白酶，即得。实施例3 制备人体体内手术用补片
取去离子水1000克，加入0. 5克碳酸钠和2. 9克十二烷基硫酸钠，充分搅拌溶解得混合液。取0. IM的磷酸盐缓冲溶液(PH=S) 300克，加入1克链霉蛋白酶，得含链霉蛋白酶的0. IM磷酸盐缓冲溶液(PH=8)。将天然蚕丝编织成所需血管形态，按实施例1进行操作，即得以天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯制备的人造血管。实施例4 制备血管支架
取去离子水1000克，溶入1克碳酸钠和1. 5克十二烷基硫酸钠，充分搅拌溶解得混合液。取0. IM的磷酸盐缓冲溶液(PH=S) 300克，加入1克链霉蛋白酶，得含链霉蛋白酶的0. IM磷酸盐缓冲溶液(PH=8)。将天然蚕丝编织的血管支架，按实施例1的操作进行处理，即得以天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯制备的血管支架。
权利要求
1. 一种天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯的制备方法，其特征在于步骤包括1)将天然蚕丝生丝编织成体内手术所需任意大小形态的医用器材；2)用碳酸钠和十二烷基硫酸钠按所述比例配制混合液；之后将医用器材放入混合液中，在40-80°C的条件下震荡脱胶30-40分钟，弃去混合液，混合液各组分的质量比为碳酸钠去离子水=0.01-0. 10 100，十二烷基硫酸钠去离子水=0.01-0. 3:100 ；3)加入与混合液等量的重量百分比浓度为1%的柠檬酸，中和残留；然后用去离子水将医用器材震荡清洗3次，每次10-30分钟；4)将步骤3)处理后的医用器材浸入0.IM含链霉蛋白酶磷酸盐缓冲溶液中，在40-60°C 的条件下震荡60-120分钟，进行进一步脱胶；所述0. IM含链霉蛋白酶磷酸盐缓冲溶液的质量比为链霉蛋白酶0. IM磷酸盐缓冲液溶液=1:200-500 ；5)酶脱胶完毕后，将溶液加热至40-85°C，灭酶活性10分钟；6)将医用器材用去离子水中清洗3次，每次10分钟；7)将医用器材取出，晾干，用环氧乙烷灭菌，包装。
全文摘要
本发明公开了一种天然蚕丝无丝胶丝纤蛋白芯的制备方法，本发明方法制备方法所需原料存在广泛，工艺简单；所得产品制造成本低；同时经测试所得产品具有良好的力学性能和柔韧性，无炎症反应，免疫排斥反应，毒性反应，可作为制备多数医用器材的材料，如可用于制备人体体内手术补片、人造血管或血管支架等。
文档编号A61L27/22GK102304812SQ201110263438
公开日2012年1月4日 申请日期2011年9月7日 优先权日2011年9月7日
发明者邱轶伟 申请人:邱轶伟