专利名称：延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂及使用方法
背景技术：
常规的人类白细胞抗原AB分型(HLA-AB)时，抽取人的静脉血，用肝素或复方柠檬酸钠保存液(ACD)作为抗凝剂加入静脉血中。这样的抗凝血液必须在4-6小时内使用，才能保证淋巴细胞的活力，如果抽血抗凝后超过10个小时，那么淋巴细胞就会部分或全部死亡，而无法得到正确的人类白细胞抗原的分型结果。
随着人类文明程度的不断提高，越来越多的人正在参加到自愿捐献骨髓的队伍中，中华(上海)骨髓库正在加速发展。对报名参加骨髓库的志愿者，首先安排志愿者抽静脉血作常规的人类白细胞抗原(HLA)血型化验，志愿者的抽血往往人数较多，一般来说，每一次可达100人以上，而抽血的时间一般安排在当天的中午或下午。由于血样过夜会引起淋巴细胞死亡，所以若采用常规的人类白细胞抗原分型的抗凝剂，则只能当天完成人类白细胞抗原血清分型，显然这在实际的操作中是不易实现的，否则只有加班或调整工作时间，这造成工作安排上的困难，也制约了骨髓库的发展，随着捐献骨髓志愿者的增加，这样的问题将越来越突出；另一方面，当需要将血样运送到异地进行分型核实，如国外某地或我国的台湾，以及作为质控品的运输，则也迫切需要解决抗凝血延长使用的问题。

发明内容
针对常规的人类白细胞抗原AB分型用的抗凝剂不能使血样在比较长的时间内保持淋巴细胞的活力的问题，本发明提供一种延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂及使用方法。
为了解决上述问题，本发明采用如下技术方案该延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂包括柠檬酸三纳、柠檬酸、葡萄糖、水，其中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31-3.32克、含柠檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余为水。
该延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂使用方法为在将血液抗凝剂与所采集的血液进行混合，在混合时，血液抗凝剂与血液的比例为每100毫升血中加入10毫升抗凝剂。
本发明的血液抗凝剂包括柠檬酸三纳、柠檬酸、葡萄糖、水，其中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31-3.32克、含柠檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余为水，与传统的血液抗凝剂相比，该抗凝剂增加了柠檬酸三纳的含量，降低了柠檬酸的含量；在血样采集后，与本发明的抗凝剂混合后，经试验和实际使用证明，能使人体外血抗凝后淋巴细胞的保存寿命由原先的4-6小时延长到48-72小时，可使人类白细胞抗原血清学分型血样隔天进行，使血样适合于异地之间的长途运输，而保持淋巴细胞的活力。而在使用本发明的血液抗凝剂与血液混合比例的缩小，使用起来更加方便。
具体实施例方式
传统的复方柠檬酸钠保存液(ACD)作为抗凝剂，该抗凝剂有两种配方，ACD-A配方和ACD-B配方，其含量、pH值、使用时混合比例请见下表1表1

而本发明的延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂，该血液抗凝剂包括柠檬酸三纳、柠檬酸、葡萄糖、水，请同时结合表1，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31-3.32克、含柠檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余为水。
血液抗凝剂的pH值在6.8-7.3之间。
对于不同pH值的淋巴细胞毒性试验结果可请参阅下表2表2

实施例1所述的血液抗凝剂中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.315克、含柠檬酸0.03克、含葡萄糖2.91克，其余为水。
实施例2所述的血液抗凝剂中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31克、含柠檬酸0.05克、含葡萄糖3.37克，其余为水。
实施例3所述的血液抗凝剂中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.32克、含柠檬酸0.01克、含葡萄糖2.45克，其余为水。
本发明血液抗凝剂使用方法是，在血样采集后，将血液抗凝剂与所采集的血液进行混合，在混合时，血液抗凝剂与血液的比例为1∶10，即，每100毫升血液中加入10毫升抗凝剂。
经试验和实际使用证明，本发明的血液抗凝剂能使人体外血抗凝后淋巴细胞的保存寿命由原先的4-6小时延长到48-72小时，可使人类白细胞抗原血清学分型血样隔天进行，使血样适合于异地之间的长途运输，而保持淋巴细胞的活力。而在使用本发明的血液抗凝剂与血液混合比例的缩小，使用起来更加方便。
权利要求
1.一种延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂，该血液抗凝剂包括柠檬酸三纳、柠檬酸、葡萄糖、水，其特征在于每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31-3.32克、含柠檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余为水。
2.如权利要求1所述的血液抗凝剂，其特征在于所述的血液抗凝剂中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.315克、含柠檬酸0.03克、含葡萄糖2.91克，其余为水。
3.如权利要求1所述的血液抗凝剂，其特征在于所述的血液抗凝剂中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31克、含柠檬酸0.05克、含葡萄糖3.37克，其余为水。
4.如权利要求1所述的血液抗凝剂，其特征在于所述的血液抗凝剂中，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.32克、含柠檬酸0.01克、含葡萄糖2.45克，其余为水。
5.如权利要求1-4任一项所述的血液抗凝剂，其特征在于所述的血液抗凝剂的pH值在6.8-7.3之间。
6.一种延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂使用方法，其特征在于在将血液抗凝剂与所采集的血液进行混合，在混合时，血液抗凝剂与血液的比例为每100毫升血中加入10毫升抗凝剂。
全文摘要
本发明公开了延长体外血淋巴细胞保存寿命的血液抗凝剂及使用方法，每100毫升抗凝剂中含柠檬酸三纳3.31－3.32克、含柠檬酸0.01－0.05克、含葡萄糖2.45－3.37克，其余为水，与传统的血液抗凝剂相比，该抗凝剂增加了柠檬酸三纳的含量，降低了柠檬酸的含量；经试验和实际使用证明，能使人体外的血抗凝后，淋巴细胞的保存寿命由原先的4－6小时延长到48－72小时，可使人类白细胞抗原血清学分型血样隔天进行和异地之间的长途运输，保持淋巴细胞的活力。而在使用本发明的血液抗凝剂与血液混合比例的缩小，使用起来更加方便。
文档编号A61K35/14GK1411818SQ01131938
公开日2003年4月23日 申请日期2001年10月17日 优先权日2001年10月17日
发明者张工梁, 马俊, 杨颖 申请人:上海市血液中心