专利名称：一种利胆片的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物的制备方法，尤其是一种中药的制备方法。
背景技术：
利胆片是由大黄、金银花、金钱草、木香、知母、大青叶、柴胡、白芍、黄芩、芒硝、茵陈11味药组成，收载于《中华人民共和国药典》2010版一部，能舒肝止痛，清热利湿。用于肝胆湿热所致的胁痛，症见胁肋及胃部疼痛，按之痛剧，大便不通，小便短赤，身热头痛，呕吐不食；胆道疾患见上述证候者。
现有技术中，尚未有利胆片在治疗痛经方面的报道。现有技术中，利胆片的制备采用水煎煮的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者日用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。

发明内容
本发明所要解决的问题是提供一种利胆片的制备方法，使其安全有效，方便服用。为了解决上述技术问题，本发明提出了下述技术方案。取大黄58g，粉碎，加入0. 6L的65%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取2次，每次3-10分钟，合并萃取液，减压回收乙醇并浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，30%乙醇洗脱，收集4倍量柱体积洗脱液，然后用60%乙醇洗脱，收集4倍量柱体积洗脱液，与前述洗脱液合并，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得大黄提取物，备用；取金钱草58g、金银花58g，粉碎，加入1. 2L的水，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，70%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩并干燥，得二金提取物，备用；取木香96. 5g、知母58g、大青叶58g、柴胡 58g、白芍58g、黄芩^g、茵陈58g共7味药材，粉碎，加入到(X)2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2-6%，萃取压力25-35MPa，温度40-60°C，CO2 流量l-3ml/g生药· min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物，干燥，备用；取芒硝19g， 加入40mL水，加热溶解，滤过，取滤液，加入上述大黄提取物、二金提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制颗粒，干燥，加入硬酯酸镁，混勻，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0. 23g。大黄微波萃取功率400W，每次萃取6分钟。强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201 X 7型，201 X 4型，D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001 X 7型、001 X 4型、DOOl型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。
CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%。CO2超临界萃取的萃取压力30MPa，温度50°C，CO2流量2ml/g生药· min，萃取时间 160min。采用上述技术方案制备的利胆片，其作为制备治疗痛经药物的应用。现有技术中，利胆片每次需服用8片(相当于5g药材)，而采用本发明制备而成的利胆片每次仅需服用2片(相当于5g药材)，在具有相似药理活性的前提下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。试验一不同方法制备的利胆片中大黄素和大黄酚含量的比较。1、仪器及试药
利胆片(超临界法，以下简称L-LJ，下同)按实施例3方法制备。利胆片(传统法L-CT，下同)，按《中国药典》2010版一部方法制备，包薄膜衣。Agilent 1200高效液相色谱仪；METTLER AE240电子分析天平。大黄素、大黄酚对照品(中国药品生物制品检定所)。2、方法
色谱条件 Kromasi C18 色谱柱(4. 6mmX 200mm, 5 μ m)；甲醇-0. 1% 磷酸溶液(85:15) 流动相；流速1. OmL -min — \检测波长254nm。精密量取对照品溶液、供试品溶液各10 μ L。溶液的制备取大黄素、大黄酚对照品适量，精密称定，分别加无水乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液制成每Iml含大黄素10 μ g、大黄酚25 μ g的混合溶液，即得。分别取供品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于5片的重量)，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液10mL，水浴蒸干，加30%乙醇-盐酸(10 1)的混合溶液15mL，加热回流1小时，立即冷却，用三氯甲烷强力振摇提取4次，每次15mL，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液使溶解，移置25 mL量瓶中，稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。3、结果
试验结果见表1，结果表明采用本发明制备的利胆片中大黄素+大黄酚的含量 (1. 72mg/片)是采用传统法(0. 41mg/片)的4. 2倍。表1不同方法制备的利胆片中大黄素+大黄酚的含量
样品含量(mg/片)L-LJ1. 72L-CT0. 41
试验二不同方法制备的利胆片药效学比较。1、试验材料。1. 1 动物
昆明种小鼠；SD大鼠；新西兰家兔。由上海斯莱克实验动物有限公司提供。1. 2 药品
利胆片(超临界法，以下简称L-LJ)按实施例3方法制备。利胆片(传统法，简称L-CT)，按《中国药典》2010版一部方法制备，包薄膜衣。己烯雌酚注射液，广州明兴制药厂生产；缩宫素注射液上海禾丰制药有限公司ο
1. 3数据及统计
数据以mean士s表示，用SPSS11. 0软件进行分析。记量资料用单因素方差分析进行统计学显著性分析，计数资料用卡方检验。2、方法及结果。2.1对大鼠胆汁分泌及胆红素的影响
雄性Wistar大鼠，体重180-220克，随机均分为5组空白对照组；L-CT组(给药剂量0. 44g/kg，相当于人临床用量，即15g生药/日);L-LJ低、中、高剂量组(给药剂量分别是 0.06g/kg、0. llg/kg、0.22g/kg。其中中剂量组相当于人临床用量，即15g生药/日)。禁食12小时(自由饮水)后，腹腔注射乌坦(lg/kg)麻醉，背位固定，于剑突下3cm开腹，分离胆总管，结扎近十二指肠端，在胆总管上作V形剪口，插入胆汁引流管见淡黄色胆汁流出后，固定引流管，关闭腹腔，稳定0. 5小时后先收集0. 5小时胆汁为药前对照。尔后各组分别经十二指肠给予不同药物，分别收集药后30、60、120、180分钟内胆汁流量。收集的各动物各时段胆汁合并，测定胆红素含量。结果(见表2)表明，与空白对照组相比，L-CT组，L-LJ低、中、高剂量组均能显著促进大鼠胆汁的分泌量(P<0. 05,0. 01)，增加胆红素含量(p<0. 05,0. 01)。表明利胆素片具有明显的利胆作用。F-CT组与F-LJ中剂量相比，胆汁分泌量、胆红素含量无显著性差异 (p>0. 05)，表明在相应剂量下(相当于人临床用量，即15g生药/日)两者活性相当。表2不同方法制备的利胆片对大鼠胆汁分泌及胆红素的影响(n=6)
权利要求
1.一种利胆片的制备方法，由大黄58g、金银花58g、金钱草58g、木香96. 5g、知母58g、 大青叶58g、柴胡58g、白芍58g、黄芩^g、芒硝19g、茵陈58g作为原料药制成，其特征在于所述的方法由下列步骤组成取大黄，粉碎，加入0. 6L的65%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取2次，每次3-10分钟，合并萃取液，减压回收乙醇并浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，30%乙醇洗脱，收集4倍量柱体积洗脱液，然后用60% 乙醇洗脱，收集4倍量柱体积洗脱液，与前述洗脱液合并，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得大黄提取物，备用；取金钱草、金银花，粉碎，加入1. 2L的水，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，70%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩并干燥，得二金提取物，备用；取木香、知母、大青叶、柴胡、 白芍、黄芩、茵陈7味药材，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2-6%，萃取压力25-35MPa，温度40_60°C，CO2流量l_3ml/g生药·π η，萃取时间150-180min，得超临界萃取物，干燥，备用；取芒硝，加入40mL水，加热溶解，滤过，取滤液，加入上述大黄提取物、二金提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制颗粒，干燥，加入硬酯酸镁，混勻，压片，包薄膜衣，制成250片，每片重0. 23g。
2.根据权利要求1所述一种利胆片的制备方法，其特征在于所述大黄微波萃取功率 400W，每次萃取6分钟。
3.根据权利要求1所述一种利胆片的制备方法，其特征在于所述强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201X7型，201 X 4型，D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。
4.根据权利要求1所述一种利胆片的制备方法，其特征在于所述强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001X7型、001X4型、DOOl型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。
5.根据权利要求1所述一种利胆片的制备方法，其特征在于所述(X)2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%。
6.根据权利要求1所述一种利胆片的制备方法，其特征在于所述(X)2超临界萃取的萃取压力30MPa，温度50°C，CO2流量2ml/g生药· min，萃取时间160min。
全文摘要
本发明涉及一种利胆片的制备方法，由下列步骤组成取大黄，微波萃取，大孔吸附树脂柱纯化，得大黄提取物；取金钱草、金银花，微波萃取，大孔吸附树脂、离子交换树脂纯化，得二金提取物；取木香、知母、大青叶、柴胡、白芍、黄芩、茵陈7味药材，粉碎，CO2超临界萃取，得超临界萃取物；取芒硝，加入水，加热溶解，滤过，取滤液，加入上述大黄提取物、金钱草提取物、超临界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，包薄膜衣。采用本发明制备的利胆片便于服用。
文档编号A61K9/28GK102397451SQ20111038135
公开日2012年4月4日 申请日期2011年11月26日 优先权日2011年11月26日
发明者张发成, 王峰, 王琳 申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司