专利名称：小鹅瘟卵黄抗体冻干保护剂的制作方法
技术领域：
本发明属于家禽抗体保存技术领域，具体涉及一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护齐U、及其制备方法和应用。
背景技术：
小鹅瘟，又称鹅细小病毒感染，是雏鹅的一种急性败血性传染病，可经消化道和呼吸道感染，并可经卵垂直传播。患病鹅精神萎顿、食欲废绝、严重下痢，有时出现神经症状。目前本病呈世界性分布，主要发生于20日龄以内的雏鹅，发病率和死亡率可达90-100%，且发病日龄越小，死亡率越高，对养鹅业的发展影响极大。雏番鸭亦可感染小鹅瘟病毒，并有类似的临床表现。小鹅瘟卵黄抗体是用小鹅瘟疫苗多次免疫蛋禽，当达到一定程度后收集禽蛋经提取纯化后制备的抗体制剂。其可有效预防和治疗小鹅瘟病毒引起的鹅群相关疾病，减轻小 鹅瘟造成的危害，在临床上得到广泛应用。目前，国内小鹅瘟卵黄抗体都是经稀释分装而成的液体剂型，存在着体积大，运输不便，需低温保存和运输。由于反复冻融和运输不当很容易造成效价降低，而冷冻干燥能使萃取抗体在预先冷冻的状态下，不经液态直接升华除去水分而获得冻干制剂，它避免了液态下保存的抗体易失活易变性的缺点，使产品质量稳定，体积缩小，便于运输及长时间保存。目前常用的冻干保护剂种类有多羟基化合物、糖类、蛋白质、聚合物、氨基酸、盐和表面活性剂等。但鉴于畜禽养殖用药开发的特点，冻干保护剂成本不能太高、冻干操作要简单。因此，研发出一种配方简单、成本低廉、能够批量制备的小鹅瘟卵黄抗体冻干保护剂就显得尤为迫切和重要。

发明内容
本发明的目的是提供一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂及其制备方法，从而弥补现有技术的不足。本发明的小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂，为包含有明胶、海藻糖、甘氨酸的蒸馏水溶液。上述的冻干保护剂，各组分浓度质量体积百分比g/ml为0. 5-2%明胶、4_7%海藻糖和O. 8-1. 2%甘氨酸。上述冻干保护剂配方各组分浓度优选为1%明胶、6%海藻糖和1%甘氨酸。上述的冻干保护剂中还加入有大豆蛋白胨，加入的大豆蛋白胨的质量体积百分比g/ml浓度为5-10%，优选为8%。将小鹅瘟卵黄抗体与上述冻干保护剂以提及比7:1比例混合，作为小鹅瘟卵黄抗体冻干液体。本发明的冻干保护剂组分简单、成本低廉、易于制备。从而解决了小鹅瘟卵黄抗体的长途运输、保存的低温储存难题。使用效果表明本发明的冻干保护剂可使小鹅瘟卵黄抗体在2-8°C下保存12个月以上，25°C下保存6个月以上。
具体实施例方式下面结合具体实施例来进一步描述本发明，但这些实例仅是范例性的，并不对本发明中应用的常规技术作限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明的技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明保护范围内。实施例I小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂配制在IOOml的蒸馏水中加入Ig明胶、6g海藻糖、Ig甘氨酸后，使各组分充分溶解后，调PH值至7. 2 7. 4，经灭菌处理后，2 8°C保存备用。实施例2小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂配制在IOOml的蒸馏水中加入Ig明胶、6g海藻糖、Ig甘氨酸和8g大豆蛋白胨后，使各 组分充分溶解，调PH值至7. 2 7. 4，经灭菌处理后2 8°C保存备用。实施例3小鹅瘟卵黄抗体的冻干将小鹅瘟卵黄抗体与上述实施例I制备的冻干保护剂以体积比7:1比例混合，作为小鹅瘟卵黄抗体冻干液体。预冻阶段冻干液体常温进箱，I小时将制品降至-40°C并维持4小时。升华阶段1小时将制品从-40°C升至_8°C并维持14小时。解吸干燥阶段0. 5小时将制品从_8°C升至28°C并维持10小时，冻干全程30. 5小时。实施例4小鹅瘟卵黄抗体的冻干制剂的性状、剩余水分和抗体效价将冻干后小鹅瘟卵黄抗体的冻干制剂分别放置2_8°C和25°C环境下保存，定期观察抗体的性状、剩余水分和效力。性状、剩余水分检测方法参见现行《兽用生物制品检验规程》，抗体效价采用双向琼脂扩散试验(AGP)打孔将制备好的琼脂板按模板用打孔器打孔，并挑出孔中的琼脂。中心I孔，周围6孔，孔径3 mm,孔距4 mm,用熔化琼脂补孔底。加样中央孔加入标准琼扩抗原，周围孔分别加入2倍系列稀释的待检小鹅瘟卵黄抗体，各孔加样25μ1。将加样后的琼脂板放入填有湿纱布的盒内，置20-25°C室温或37°C温箱，24 h初判，72 h终判。结果判定待检小鹅瘟卵黄抗体与抗原孔之间也出现沉淀线，且与标准阳性血清沉淀线末端相吻合，即判为阳性。当待检小鹅瘟卵黄抗体与抗原孔之间无沉淀线出现时，即判为阴性。当待检小鹅瘟卵黄抗体最高稀释度孔与抗原孔之间形成清晰沉淀线时，即判为琼扩效价。结果小鹅瘟卵黄抗体冻干后和2_8°C保存12个月、25°C保存6个月，抗体物理性状保持稳定，均为微黄色疏松团块，易与瓶壁分离；剩余水分均为2. 12%左右；抗体效价均为1:128以上，未见下降。表I小鹅瘟卵黄抗体冻干制剂检验结果
权利要求
1.一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂，所述的冻干保护剂为包含有明胶、海藻糖和甘氨酸的蒸馏水溶液。
2.如权利要求I所述的冻干保护剂，其特征在于所述的明胶、海藻糖、甘氨酸的浓度如下0. 5-2%明胶、4-7%海藻糖和O. 8-1. 2%甘氨酸。
3.如权利要求2所述的冻干保护剂，其特征在于所述的明胶、海藻糖、甘氨酸的浓度如下1%甘露醇、6%海藻糖、I %甘氨酸。
4.权利要求I所述的冻干保护剂，其特征在于，在蒸馏水溶液中还加入有大豆蛋白胨。
5.如权利要求4所述的冻干保护剂，其特征在于所述的大豆蛋白胨的加入浓度为5-10%ο
6.如权利要求5所述的冻干保护剂，其特征在于所述的大豆蛋白胨的加入浓度为8%。
7.一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干制剂，其特征在于，所述的冻干制剂的制备方法如下首先将小鹅瘟卵黄抗体与权利要求I或权利要求4所述的冻干保护剂以7:1比例混合，作为小鹅瘟卵黄抗体冻干液体，然后将冻干液体常温下放入冷冻箱，I小时将制品降至_40°C并维持4小时；然后在I小时内将制品从_40°C升至_8°C并维持14小时；最后在O. 5小时将制品从_8°C升至28°C并维持10小时完成制备。
全文摘要
本发明公开了一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂、其制备方法和应用。本发明冻干保护剂由以下重量体积百分比的组分组成0.5-2%明胶、4-7%海藻糖、0.8-1.2％甘氨酸，剩余成分为蒸馏水。将以上各组分混合均匀，蒸汽灭菌即得本发明冻干保护剂。上述的冻干保护剂还加入了大豆蛋白胨。通过试验结果表明，本发明冻干保护剂对小鹅瘟卵黄抗体的的保护效果良好，其保护效果要明显优于现有保护剂的保护效果。
文档编号A61P31/20GK102824645SQ20121031712
公开日2012年12月19日 申请日期2012年8月30日 优先权日2012年8月30日
发明者王宏华, 孙海新, 凌红丽, 魏波, 董婷婷 申请人:青岛康地恩药业股份有限公司, 青岛宝依特生物制药有限公司