专利名称：一种含肌氨肽苷化合物药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及一种复方肌氨肽苷药物组合物，用于辅助治疗肝炎引起的肝功能失常等疾病，本发明还涉及该药物的制备方法。
背景技术：
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肌氨肽苷是由健康家兔肌肉和心肌提取的多种心血管活性物质，其主要成分包括心房肽，降钙素基因相关肽及三磷酸腺苷(腺苷)等核苷酸(核苷)类，此外还含有二十多种氨基酸及其代谢中间产物。核苷酸酸和多种氨基酸(必需氨基酸)是参与人体生命活动的重要物质。对心血管系统疾病有改善血液循环障碍、降低血管阻力、增加心肌利用氧等作用，能促进造血系统活动增强，白血球数量增多，同时有增加血管弹性、防止血管硬化作用。可用于肌肉萎缩、神经性水肿、脑血管意外性瘫痪、神经性衰弱综合症、脑卒中，脑供血不足所致脑功能减退和周围神经疾病的辅助治疗。现有技术多对肌氨肽苷的提取工艺进行了研究，例如专利文献CN101584713A公开了制备肌氨肽苷的步骤，包括化冻洗净切块、匀浆、深冻、加热煮沸分离上清、酸碱沉淀、碱沉、超滤、再热压、深冻、超滤，然后检测调节多肽与次黄嘌呤的比例，最后经超滤后制成制剂，在其制备过程中使用3KDa的超滤器进行过滤会使降钙素基因相关肽(CGRP)(含37个氨基酸分子量约为3800D)造成损失。CN1939533B也公开了一种注射用肌氨肽苷粉针剂及其制备方法，其对兔心肌的处理重点在提取其中的次黄嘌呤，而未关注其中的心房肽和降钙素相关肽。对于肌氨肽苷的剂型目前多采用冻干粉，例如CN1939533B就是公开的一种冻干粉针剂，CN1611261A也公开了一种冻干粉针剂，目前市售的肌氨肽苷药物组合物也多是以冻干粉针剂的药剂形式(CN101584713A公开了注射剂，然而该注射剂未作任何稳定性试验)，这主要是由于肌氨肽苷注射液中的多肽、氨基酸、核苷及核苷酸等物质，在贮藏、运输、销售过程中易受到环境因素影响，特别是在我国南方地区的夏季，温度可达40°C，易造成产品质量不稳定，增加不良反应的发生率(CN1939533B)。另外，由于肌氨肽苷属于肽类产品，在罐装后不宜高温灭菌，否则其活性成分会受到严重影响，但不灭菌又容易受到微生物的影响，有效期短，而且容易产生用药安全。采用冻干粉的方式能够一定程度上解决注射剂形式的缺陷，然而冻干粉需要繁琐的制备过程，需要昂贵的设备和已经较高的能耗，综合制备成本高，而且往往需要加入诸如甘露醇、右旋糖苷、乳糖、山梨醇、枸橼酸等赋形剂，这些赋形剂或多或少会产生一定的副作用，从而可能会影响用药安全。

发明内容
本发明的目的在于针对上述不足，提供一种新型肌氨肽苷药物组合物。为实现上述目的，本发明的技术方案如下—种含肌氨肽苷化合物药物组合物，其包括以下重量比的成分肌氨肽苷I 5、三氯叔丁醇I 5、磷酸二氢钠I. 5 2. 5、注射用水500 10000，pH6. O 6. 5。优选包括以下重量比的成分肌氨肽苷2 4、三氯叔丁醇2 4、磷酸二氢钠I. 8 2. 2、注射用水1000 5000，pH6. 2 6. 4。更优选包括以下重量比的成分肌氨肽苷3、三氯叔丁醇3、磷酸二氢钠2. O、注射用水1500，pH6. 3。其中所述肌氨肽苷中多肽与次黄嘌呤重量比为5 10 1，优选为7 I。本发明还提供制备上述药物组合物的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤I)预处理将兔心肌和兔肌肉剔除脂肪和结缔组织，洗净，分别切成小于Icm3的小块，再次清洗；2)匀浆将经预处理的兔心肌和兔肌肉分别加入2 2. 5倍的纯化水，分别制成
2 3微米细度的匀浆；3)冻融将兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆反复冻融2 4次，每次于_40°C下深冻4 8小时，并于45°C下解冻；4)除杂将经冻融后的兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆分别调节pH至3. O 4. O煮沸10 15分钟,冷却，去油层，于2500 3500rpm离心5 IOmin,取上清,沉淀用注射用水溶解后再次于2500 3500rpm离心5 IOmin,取上清,合并上清；5)超滤上清液调节pH6 7，先经I万道尔顿的超滤器过滤，再经4000道尔顿的超滤器过滤；6)检测调节检测兔心肌提取多肽及次黄嘌呤的量以及兔肌肉提取多肽和次黄嘌呤的量，调整混合比例使多肽与次黄嘌呤重量比为5 10 I得到胺基肽苷，如果次黄嘌呤的量不足也可以额外添加次黄嘌呤，补足至所述比例；7)制剂将处方量的三氯叔丁醇、磷酸二氢钠用注射用水溶解，加入处方量的经调节后的胺基肽苷，混合均匀，加注射用水至全量，并调节pH，精滤后罐装。本发明肌氨肽苷药物组合物是注射制剂，其添加了三氯叔丁醇，三氯叔丁醇有抑菌防腐作用，故并发明组合物在罐装后不需要采取高温灭菌步骤，可以避免有效成分的损失，另外三氯叔丁醇还有镇痛作用，可以减轻病人痛楚。通常认为，三氯叔丁醇可能存在过敏等副作用，但在本发明的试验中并未发现过敏反应，表明其在肌氨肽苷药物组合物中的应用是安全的。本发明还通过磷酸二氢钠调节并稳定pH，通过稳定pH以及三氯叔丁醇的联合应用，使得本发明肌氨肽苷的稳定性明显增强。另外，本发明药物组合物在制备过程中使用4kDa的超滤器超滤，可以防止有效成分被滤除。
具体实施例方式以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。实施例II)预处理将兔心肌和兔肌肉剔除脂肪和结缔组织，洗净，分别切成小于lcm3的小块，再次清洗；2)匀浆将经预处理的兔心肌和兔肌肉分别加入2倍的纯化水，分别制成2 3微米细度的匀浆；3)冻融将兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆反复冻融3次，每次于_40°C下深冻6小时，并于45°C下解冻；
4)除杂将经冻融后的兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆分别调节pH至3. 5煮沸15分钟，冷却至室温，去油层，于3000rpm离心lOmin，取上清，沉淀用注射用水溶解后再次于3000rpm离心IOmin,取上清,合并上清；5)超滤上清液调节pH6. 5，先经I万道尔顿的超滤器过滤，再经4000道尔顿的超滤器过滤；6)检测调节检测兔心肌提取多肽及次黄嘌呤的量以及兔肌肉提取多肽和次黄嘌呤的量，调整混合比例使多肽与次黄嘌呤重量比为7 I得到胺基肽苷；7)制剂将三氯叔丁醇3g、磷酸二氢钠2g用注射用水溶解，加入经调节后的胺基肽苷(多肽及次黄嘌呤含量3g)，混合均匀，加注射用水至1500，并调节pH至6. 3,0. 22 μ m滤月吴过滤后te装。
实施例2I)预处理将兔心肌和兔肌肉剔除脂肪和结缔组织，洗净，分别切成小于lcm3的小块，再次清洗；2)匀浆将经预处理的兔心肌和兔肌肉分别加入2. 5倍的纯化水，分别制成2 3微米细度的匀浆；3)冻融将兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆反复冻融4次，每次于_40°C下深冻4小时，并于45°C下解冻；4)除杂将经冻融后的兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆分别调节pH至3. O煮沸10分钟，冷却至室温，去油层，于3500rpm离心5min,取上清,沉淀用注射用水溶解后再次于3500rpm离心5min,取上清,合并上清；5)超滤上清液调节pH6. O，先经I万道尔顿的超滤器过滤，再经4000道尔顿的超滤器过滤；6)检测调节检测兔心肌提取多肽及次黄嘌呤的量以及兔肌肉提取多肽和次黄嘌呤的量，调整混合比例使多肽与次黄嘌呤重量比为5 I得到胺基肽苷；7)制剂将三氯叔丁醇4g、磷酸二氢钠2. 2g用注射用水溶解，加入经调节后的胺基肽苷(多肽及次黄嘌呤含量5g)，混合均匀，加注射用水至10000，并调节pH至6. O，
O.22 μ m滤膜过滤后罐装。实施例3I)预处理将兔心肌和兔肌肉剔除脂肪和结缔组织，洗净，分别切成小于lcm3的小块，再次清洗；2)匀浆将经预处理的兔心肌和兔肌肉分别加入2. 5倍的纯化水，分别制成2 3微米细度的匀浆；3)冻融将兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆反复冻融2次，每次于_40°C下深冻8小时，并于45°C下解冻；4)除杂将经冻融后的兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆分别调节pH至3. O煮沸10分钟，冷却至室温，去油层，于3500rpm离心5min,取上清,沉淀用注射用水溶解后再次于2500rpm离心IOmin,取上清,合并上清；5)超滤上清液调节pH6. O，先经I万道尔顿的超滤器过滤，再经4000道尔顿的超滤器过滤；
6)检测调节检测兔心肌提取多肽及次黄嘌呤的量以及兔肌肉提取多肽和次黄嘌呤的量，调整混合比例使多肽与次黄嘌呤重量比为10 I得到胺基肽苷；7)制剂将三氯叔丁醇2g、磷酸二氢钠I. Sg用注射用水溶解，加入经调节后的胺基肽苷(多肽及次黄嘌呤含量2g)，混合均匀，加注射用水至1000，并调节pH至6. 2，
O.22 μ m滤膜过滤后罐装。实施例4本例中的肌氨肽苷注射液的制备方法与实施例I相同，配方为肌氨肽苷lg、三氯叔丁醇2、磷酸二氢钠I. 5g、注射用水500，pH6. 4。实验例I :安全性实验(致敏实验)
健康豚鼠，体重300±30g，随机分为6组，每组6只，雌雄各半。按照对照组(按实施例I制备不添加三氯叔丁醇和磷酸二氢钠)、实验组I 5组(实施例I 5)分别间日给予腹腔注射注射液O. 5ml/只，连续三次，然后第14天及21天分别攻击给药(2ml/只)，立即观察I小时。结果显示，对照组和实验组均未出现明显异常现象，两者差异不显著，表明其过敏反应呈阴性。实验例2 :稳定性实验将实施例I 5制备的肌氨肽苷进行澄明度、有关物质及含量等指标的检测及长期(0、1、3、6个月)稳定性试验，对照为按照实施例I制备但不添加三氯叔丁醇和磷酸二氢钠，结果如下表I样品各项指标检测结果
权利要求
1.一种含肌氨肽苷化合物药物组合物，其包括以下重量比的成分肌氨肽苷I 5、三氯叔丁醇I 5、磷酸二氢钠I. 5 2. 5、注射用水500 10000，pH6. O 6. 5。
2.根据权利要求I所述的药物组合物，其包括以下重量比的成分肌氨肽苷2 4、三氯叔丁醇2 4、磷酸二氢钠I. 8 2. 2、注射用水1000 5000，pH6. 2 6. 4。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其包括以下重量比的成分肌氨肽苷3、三氯叔丁醇3、磷酸二氢钠2. O、注射用水1500，pH6. 3。
4.根据权利要求I 3任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述肌氨肽苷中多肽与次黄嘌呤重量比为5 10 I。
5.制备权利要求I 4任一项所述药物组合物的方法，其特征在于，该方法包括如下步 骤 1)预处理将兔心肌和兔肌肉剔除脂肪和结缔组织，洗净，分别切成小于Icm3的小块，再次清洗； 2)匀浆将经预处理的兔心肌和兔肌肉分别加入2 2.5倍的纯化水，分别制成2 3微米细度的匀浆； 3)冻融将兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆反复冻融2 4次，每次于-40°C下深冻4 8小时，并于45°C下解冻； 4)除杂将经冻融后的兔心肌匀浆和兔肌肉匀浆分别调节pH至3.O 4. O煮沸10 15分钟，冷却，去油层，于2500 3500rpm离心5 lOmin，取上清，沉淀用注射用水溶解后再次于2500 3500rpm离心5 IOmin,取上清,合并上清； 5)超滤上清液调节pH6 7，先经I万道尔顿的超滤器过滤，再经4000道尔顿的超滤器过滤； 6)检测调节检测兔心肌提取多肽及次黄嘌呤的量以及兔肌肉提取多肽和次黄嘌呤的量，调整混合比例使多肽与次黄嘌呤重量比为5 10 I得到胺基肽苷； 7)制剂将处方量的三氯叔丁醇、磷酸二氢钠用注射用水溶解，加入处方量的经调节后的胺基肽苷，混合均匀，加注射用水至全量，并调节PH，精滤后罐装。
全文摘要
本发明提供了一种含肌氨肽苷化合物药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物包括以下重量比的成分肌氨肽苷1～5、三氯叔丁醇1～5、磷酸二氢钠1.5～2.5、注射用水500～10000，pH6.0～6.5。本发明药物在制备过程中不经高温灭菌，多肽纯化过程中采用了4kDa的超滤器超滤，对有效成分的保存起到了较好效果。本发明通过添加磷酸二氢钠调节并稳定pH，并与三氯叔丁醇的联合应用，使得本发明肌氨肽苷的稳定性明显增强。
文档编号A61P9/10GK102847138SQ201210357888
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月25日 优先权日2012年9月25日
发明者罗诚 申请人:罗诚