专利名称：提取物和制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有规定量的N-乙酰基神经氨酸的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和以该提取物为有效成分的制剂等。
背景技术：
医药品是只有确保其品质才能受到制造销售的许可的商品。在日本，在药事法第14条中对此进行了规定。在其他各国，在医药品的性质上，这样的处理基本上也是同样的。这样在医药品中品质的确保被认为很重要是因为品质会保证医药品的有效性和安全性。反过来说，品质没有得到确保的医药品，不能保证有效性和安全性，就缺少作为医药品的资格。在日本，作为 医药品的生产中所使用的原料物质且成为医药品的有效成分的物质被称为“原药”。另外，原药和医药品也同样必须确保其品质。原因是医药品的品质依赖于原药的品质。另外，在日本的药事相关法令中，原药被规定为专门用于制造其它医药品的医药品，定义上，原药被包含在医药品中。但是，在本申请中，为了方便，有时分别称医药品和原药，此时的医药品是指除去原药以外的医药品。—般而言，医药品和原药由规定的制造方法制造，从而制造规定品质的医药品和原药。另外，在实际中是否具有规定的品质，由制造后进行的试验和检查来确认。在那样的试验和检查的结果不符合预先确定的基准时，该医药品和原药不被许可上市、销售等。这样操作来对医药品和原药管理其品质。痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(以下有时称为“本提取物”)是含有从接种痘苗病毒而发痘的兔的炎症皮肤组织中提取分离的非蛋白性的活性物质的提取物。本提取物在被提取后的状态下为液体，但通过干燥也能够制成固体。含有本提取物为有效成分的制剂(以下有时称为“本制剂”)，如后所述，作为医药品非常有用。此时，因为本提取物是本制剂的有效成分，所以本提取物就成为本制剂的原药。作为本制剂，申请人在日本制造销售的具体商品中有“含有痘苗病毒接种家兔炎症皮肤提取液的制剂”(商品名:NEUR0TR0PIN [注册商标]，以下称为“NTP制剂”)。在NTP制剂中，有注射剂(以下称为“NTP注射剂”)和片剂(以下称为“NTP片剂”)，均为医疗用医药品(ethical drug)。作为NTP制剂有效成分的痘苗病毒接种家兔炎症皮肤提取液(以下称为“NTP提取液”)是NTP制剂的原药。NTP提取液包含在本提取物中，NTP制剂(NTP注射剂和NTP片剂)包含在本制剂中。NTP注射剂的适应症为“腰痛症、颈肩腕综合征、症状性神经痛、伴随皮肤病(湿疹、皮肤炎、荨麻疹)的搔痒、过敏性鼻炎、亚急性视神经脊髓病(SMON)后遗症的冷感-知觉异常-疼痛”。NTP片剂的适应症为“带状疱疹后神经痛、腰痛症、颈肩腕综合征、肩周炎、变形性关节炎”。NTP制剂是申请人创制并作为医药品开发得到的制剂。就NTP制剂而言，其有效性和安全性中的优异特点受到较高评价，长年被销售，在日本的医药品市场中确立了坚固地位。另外，现在NTP制剂被出口到中国，以“神经妥乐平/NEUR0TR0PIN”的商品名销售。在中国的NTP制剂的适应症与日本相同。这样，本制剂作为医药品十分有用，本提取物作为本制剂的原药也十分有用。但是，如上所述，本提取物是从接种痘苗病毒而发痘的兔的炎症皮肤组织中提取分离的提取物。因此，本提取物含有极多的物质(成分)，使用本提取物制造的本制剂也仍然含有极多的物质(成分)。因此，怎样管理本提取物和本制剂的品质是非常重要的事项。许多医药品是以I种或最多2 3种物质(成分)作为有效成分的制剂，通常，这些物质是被化学合成的化合物。因此，测定该制剂中的该化合物的含量，如果含有规定的量，则从该制剂的有效成分含量的方面出发的品质就得到保证。但是，本提取物是来自接种痘苗病毒而发痘的兔的炎症皮肤组织的提取物，含有极多种类的物质。以本提取物为有效成分的本制剂，当然也同样含有极多种类的物质。这样，本提取物和本制剂不是以特定的I种或数种物质作为有效成分，所以不能进行将有效成分作为物质进行特别规定的通常的医药品中那样的品质管理。因此，申请人制造的本提取物和本制剂，即NTP提取液和NTP制剂的有效成分定量(quantitative determination),通过测定其生物活性(效价、titer)的方法进行。上述方法是使用作为疼痛阈值比正常动物低的慢性应激动物的SART应激(反复寒冷负荷)动物求出镇痛系数的生物学试验方法(“日药理志”、第72卷、第5号、573-584页、1976年)。通过该文献所记载的方 法，使用作为疼痛阈值比正常动物低的慢性应激动物的SART应激(反复寒冷负荷)动物，由炎症足加压(Randall-Selitt0)法进行镇痛试验求出镇痛系数。该方法是在小鼠的尾部施加压力刺激，以直到小鼠显示逃避反应的加压重量为指标，测定镇痛效果的方法。所谓镇痛系数是将在投与药物后测定的加压重量除以药物投与前测定的加压重量得到的值。关于NTP提取液和NTP制剂，以显示申请人规定的一定值以上的镇痛系数的情况作为镇痛效果阳性，求出被判断为阳性的动物只数的比例，作为镇痛有效率(％)。从该值，根据对于稀释为各种浓度的标准品测定的结果求出ED5tl值。作为申请人关于NTP制剂使用的生物活性(效价)的单位的“Neurotropin单位(NU)”,通过将ED5tl值为投与量100mg/kg (小鼠体重)的本提取物Img显示的活性设为INeurotropin单位来定义。然后，关于各NTP制剂测定ED5tl值，与标准品进行比较来定量镇痛活性(有效成分量)。以下，在本申请中，作为本提取物和本制剂的有效成分量(效价)的尺度，使用“单位”这样的表示，但实质上与NTP提取液和NTP制剂中使用的“Neurotropin单位”意义相同。但是，在申请人制造的本提取物和本制剂，即NTP提取液和NTP制剂中，在上述镇痛活性的定量以外，还进行如下的多个确认试验，规定必须符合这些试验。.由液相色谱法进行的氨基酸的确认试验.由紫外可见吸光度测定法进行的紫外部吸收物质的确认试验.由显色反应法进行的磷的确认试验.由液相色谱法进行的核酸碱基的确认试验.由in vitro试验法进行的血管舒缓素样物质产生抑制作用的确认试验一般而言，对于制造来自动物和植物这样的生物的提取物和含有该提取物为有效成分的制剂的制造者来说，由于不需要用于试验和检查的时间、劳动、费用，另外制造品变得不合格的可能性也降低，所以该制剂必须符合的基准少是有利的。但是，从保证上述那样的提取物和制剂品质的观点出发，希望应该符合的基准被更严格地规定。本发明是从这样的观点出发，关于申请人制造的本提取物和本制剂，作为应该符合的新基准而深入研究适合的基准，结果发现的发明。由此，本提取物和本制剂的品质变得更加稳定。另外，由此，本提取物和本制剂的有效性和安全性受到更加严格地保证。作为公开本提取物或本制剂的文献，存在专利文献I至3。在这些文献中有关于在本提取物或本制剂中的氨基酸和核酸碱基的含量的记载。另外，相同关于本提取物或本制齐U，在专利文献4中有关于硅类含量的记载。但是，在这些专利文献I至4中，关于本提取物或本制剂含有多少N-乙酰基神经氨酸这样的特定物质却没有任何记载。况且，在这些文献中，关于将本提取物或本制剂中的N-乙酰基神经氨酸含量作为用于本提取物或本制剂品质管理的指标既没有记载也没有启示。现有技术文献专利文献专利文献1:中国专利公开CN1205233A公报专利文献2:国际公开W02004/060381号公报专利文献3:中国专利公开CN1613305A公报专利文献4:日本特开平7 - 97336号公报

发明内容
发明所要解决的课题

如上所述，在本提取物和本制剂中，没有鉴定单一物质作为有效成分。因此，本提取物和本制剂的品质，通过使用SART应激小鼠求出镇痛系数的生物学试验进行的效价检测和多个确认试验等来确保。另外，尽管如此，在本提取物和本制剂中包含的各种成分在每个制造批次中不可避免地有相当程度的偏差。但是，既然本制剂作为治疗疾病的医药品而使用，就希望其品质尽可能保持一定。更稳定地确保本提取物和本制剂的品质，关系到将本提取物和本制剂的有效性和安全性制造得更恒定，是非常有意义的。用于解决课题的方法本发明是以在本提取物和本制剂中含有的N-乙酰基神经氨酸的量作为指标来确保本提取物和本制剂的品质的发明。基于此，本发明提供:含有所规定量的N-乙酰基神经氨酸的本提取物和本制剂、由N-乙酰基神经氨酸的含量管理或评价本提取物和本制剂的品质的方法、或以那样的方法进行品质管理得到的本提取物和本制剂。发明的效果本发明涉及的本提取物和本制剂是含有规定量的N-乙酰基神经氨酸的提取物和制剂。由此，本提取物和本制剂的品质得到更稳定的确保，本提取物和本制剂的有效性和安全性变得更恒定。
具体实施例方式
N-乙酰基神经氨酸是涎酸的一种。涎酸是神经氨酸的酰基衍生物的总称，在自然界中存在多种涎酸，其中，N-乙酰基神经氨酸最多，N-羟乙酰神经氨酸第二位多。涎酸作为糖蛋白、糖脂质、糖肽等的构成成分在生物体内广泛分布，特别存在于动物或细菌的细胞膜表面，承担着参与细胞的特异性识别机理等重要的生物学功能。另外，涎酸作为与癌、炎症、免疫、病毒感染、细胞分化、激素受体等相关的物质，在医学和药学中受到重视，关于含有涎酸的生物体成分、涎酸及其衍生物进行着各种研究。关于该涎酸、特别关于N-乙酰基神经氨酸，申请人意外地发现该物质具有镇痛作用，特别具有对神经性疼痛(neuropathic pain disease)等的非炎症性疼痛疾病(non-1nf lammatory pain disease)的效果,基于这样的发现而取得了专利(日本特许第4005115号、中国授权公告号CN101600438B)。因为申请人制造销售的NTP制剂的特征也是对神经性疼痛等的治疗效果，所以作为用于更严格地管理本提取物和本制剂的品质的指标，N-乙酰基神经氨酸是合理的物质(成分)。接着，说明制造本提取物和本制剂的方法。本提取物能够通过采集在兔的皮肤中接种痘苗病毒而发痘的炎症皮肤，进行破碎，加入提取溶剂处理后，除去组织片，进行除蛋白处理，将其在酸性条件下使其吸附于吸附剂，接着在碱性条件下将有效成分洗脱而得到。其中，痘苗病毒(vaccinia virus)可以是任意株的痘苗病毒。作为例子，可以列举利斯特(Lister)株、大连(Dairen)株、池田(Ikeda)株、EM-63株、纽约市公众卫生局(NewYork City Board of Health)株等。

另外,兔只要属于兔形目就可以为任意的兔。作为例子,有穴兔、家兔(将穴兔驯化的兔)、野兔(日本野兔)、鼠兔、雪兔等。其中，适合使用家兔。在日本，有从过去被饲养的作为家畜或实验用动物而频繁使用的称为家养兔(4 -々寸jO的兔，但这也是家兔的别称。在家兔中存在多个品种(breed)，但能够优选使用称为日本白色种和新西兰白色种(新西兰白)的品种。作为本提取物的基本的提取工序，例如，使用以下那样的工序。(A)采集皮内接种痘苗病毒、使其发痘的兔的皮肤组织，将发痘组织破碎，加入水、苯酚水、生理盐水或加有苯酚的甘油水等的提取溶剂进行数日的提取处理后，由过滤或离心分离，得到组织片被除去的粗提取液(滤液或上清液)。(B)将在(A)中得到的粗提取液调整为酸性的pH进行加热，过滤或离心分离进行除蛋白处理。接着，将除蛋白后的溶液调整为碱性的pH进行加热，再过滤或离心分离，得到除蛋白处理后的滤液或上清液。(C)将在(B)中得到的滤液或上清液调整为酸性的pH，使其吸附于活性碳、高岭土等的吸附剂。(D)在(C)中得到的吸附剂中加入水等的提取溶剂，调整为碱性的pH，通过将吸附成分洗脱，得到痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(本提取物)。以上是基本的工序，如下将更详细地叙述这些工序。关于(A)米集在兔的皮肤中将痘苗病毒进行皮内接种使其发痘的炎症皮肤组织。米集的皮肤组织以苯酚溶液等进行清洗、消毒。破碎该炎症皮肤组织，加入其I至5倍量的提取溶剂。其中，所谓破碎是指使用绞肉机等细致地破碎为肉末状。另外，作为提取溶剂，能够使用蒸馏水、生理盐水、弱酸性至弱碱性的缓冲液等，也可以适当添加苯酚等的杀菌-防腐剂、甘油等的稳定剂、氯化钠、氯化钾、氯化镁等的盐类等。此时，也能够通过冷冻融化、超声波、细胞膜溶解酶或表面活性剂等的处理来破坏细胞组织使提取变得容易。将得到的悬浊液放置5日至12日。此期间，可以边适当搅拌或不搅拌边加温到30至45°C。通过将得到的液体过滤或离心分离等除去组织片，得到粗提取液(滤液或上清液)。关于(B)对在(A)中得到的粗提取液进行除蛋白处理。除蛋白能够由通常进行的公知方法实施，能够应用加热处理、由蛋白质变性剂(例如酸、碱、脲、胍、丙酮等有机溶剂等)的处理、等电点沉淀、盐析等的方法。接着，通过除去不溶物的通常方法，例如使用滤纸(纤维素、硝酸纤维素等)、玻璃过滤器、硅藻土制品、塞茨过滤板等的过滤、超滤、离心分离等，得到除去了析出的不溶蛋白质的滤液或上清液。关于(C)将在(B)中得到的滤液或上清液调整为酸性、优选调整为pH3.5至5.5，进行向吸附剂的吸附操作。作为能够使用的吸附剂，能够列举活性碳、高岭土等，在提取液中添加吸附剂进行搅拌或使提取液通过吸附剂填充柱，能够使有效成分吸附于该吸附剂。在提取液中添加吸附剂时，通过过滤或离心分离等除去溶液，能够得到吸附有活性成分的吸附剂。关于(D) 为了使活性成分从(C)中得到的吸附剂中洗脱(脱离)，在该吸附剂中加入洗脱溶齐U，调整为碱性、优选调整为PH9至12，在室温或适当加热、或者搅拌进行洗脱，以过滤或离心分离等通常的方法除去吸附剂。作为所使用的洗脱溶剂，能够使用碱性溶剂，例如，能够使用调整为碱性PH的水、甲醇、乙醇、异丙醇等或它们的适当的混合溶液，能够优选使用调整为pH9至12的水。洗脱溶剂的量能够适当设定。为了将这样操作得到的洗脱液作为原药使用，能够将PH适当地调整到中性附近等，最终得到痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(本提取物)。本提取物在制成时为液体，因此也能够通过适当浓缩、稀释制成所希望浓度的提取物。从本提取物制造制剂时，优选施加加热灭菌处理。为了制成注射剂，例如，能够加入氯化钠等配制与生理盐水等渗的溶液。另外，也能够通过对液体状态的本提取物进行适当的浓缩干燥固化等的操作，制造片剂等的口服用固体制剂。从本提取物制造这样的口服用固体制剂的具体方法，在日本特许第3818657号和日本特许第4883798号的说明书中有记载。本制剂是这样操作得到的注射剂或口服用固体制剂等。在本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量，能够由通常所使用的定量法测定。具体而言，例如，能够使用利用液相色谱质谱分析仪(LC-MS)或毛细管电泳质谱仪(CE-MS)的测定法、由DMB (1，2-二氨基-4，5-亚甲基二氧苯)的荧光标识法、酶法等。在任意I种方法中，都能够使用以校正用的N-乙酰基神经氨酸试样制作的校正曲线，将本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸进行定量。以上述那样的方法测定申请人制造的本提取物和本制剂中所含有的N-乙酰基神经氨酸的含量。其结果，在本提取物和本制剂中，虽然有偏差，但每I单位含有4000ng以上的N-乙酰基神经氨酸。进一步而言，在本提取物和本制剂中，每I单位含有4000 18000ng的N-乙酰基神经氨酸。因此，在以本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量作为指标管理本提取物和本制剂的品质时，判断能够将这样的含量设定为基准。另外，对申请人而言，确认了在本提取物和本制剂的制造方法上有变动时，N-乙酰基神经氨酸的含量有时会低于每I单位4000ng以下。
其中，从上述说明可知，所谓“每I单位”是指在本提取物和本制剂中的每有效成分含量的意思。在申请人制造的本提取物(NTP提取液)中，含有1.2单位/mL的有效成分。在使用其制造的注射剂用的本制剂(NTP注射剂)也同样含有1.2单位/mL的有效成分。在NTP注射剂中，存在容量3mL的注射剂和ImL的注射剂。因此，在3mL的制剂中含有3.6单位的有效成分，在ImL的制剂中含有1.2单位的有效成分。另一方面，在申请人制造的口服用本制剂(NTP片剂)中，每I片含有4单位的有效成分。然而，本提取物能够浓缩或稀释。另外，本制剂也能够制造含有各种单位的制剂。此时,在本提取物和本制剂的每份分量(每lmL、每lmg、每I管、每I片等)中所含有的有效成分的量也可以变化。因此，基本上意味着以与本提取物和本制剂的有效成分的量的关系规定N-乙酰基神经氨酸的含量。原因是这涉及与本提取物和本制剂的有效性和安全性的关系的缘故。因此，申请人以每有效成分的含量(“每I单位”)规定本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸的含量。另一方面，申请人从现在制造销售NTP制剂出发，以具体的注射剂的每ImL和每I管或以片剂每I片进行规定，也由于在与投与量的关系上具有一定的意义，所以也进行那样的规定。但是，在NTP注射剂中，在日本和中国存在申请人以外的公司(以下称为“其它公司”)制造的仿制品(generic drug)或类似制剂(similardrug)(以下将这些称为“其它公司注射剂”)。这些其它公司注射剂也与NTP制剂同样地使用SART应激小鼠，以镇痛效果为指标，进行作为有效成分的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物(本提取物)的定量。在表示上，这些其它公司注射剂的有效成分含量，如作为在日本的多个其它公司注射剂的“ R0SEM0RGENIn.”(注册商标)、“NABUT0PINInj.”(注册商标)和“N0LP0RT Inj.”(注册商标)那样，既有简单表示为“单位”的注射剂，也有作为在中国的其它公司注射剂的“恩再适/ANALGECINE”(注册商标)那样地表示为“Analgecine单位”或“AGC单位”的注射剂。但是，即使是在这些任意制剂中，有效成分的含量也与NTP注射剂同样地为每ImL为1.2单位或1.2Analgecine(1.2AGC)单位，在3mL装的制品I管中含有3.6单位或3.6Analgecine (3.6AGC)单位。结果,在NTP制剂中使用的“Neurotropin单位”和其它公司使用的“单位”或“Analgecine单位”只是表示方法不同， 作为规定有效成分含量的单位是相同的尺度。因此，在本申请中，不仅NTP制剂，还包含所有的其它公司的注射剂，作为表示有效成分即本提取物的含量的表示都使用“单位”。这样，多个以痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物作为有效成分的制剂，以“单位”表示有效成分，就该制剂而言，“单位”表示对于本领域技术人员是明确的。从以上可知，在本申请中，“本制剂”是包含NTP制剂(NTP注射剂和NTP片剂)和其它公司注射剂的概念。另外，其它公司作为NTP制剂的仿制品或类似品将要制造、销售片齐U (以下称为“其它公司片剂”)时，也是还包含其它公司片剂的概念。以下，作为实施例表示本提取物和本制剂制造的具体例、以及在本提取物和本制剂中的N-乙酰基神经氨酸含量的测定结果，但本发明不受这些实施例的记载任何限制。实施例实施例1 (本提取物的制造)在健康成熟家兔的皮肤中皮内接种痘苗病毒，切下并采集发痘的皮肤。采集的皮肤以苯酚溶液进行清洗、消毒后，除去多余的苯酚溶液，进行破碎，加入苯酚溶液混合，放置3 7日后，进而边搅拌3 4日边在35 40°C加温。然后，以盐酸将固液分离得到的提取液调整到PH4.5 5.2，以90 100°C加热处理30分钟后，过滤除去蛋白。再以氢氧化钠将滤液调整到PH9.0 9.5，以90 100°C加热处理15分钟后，进行固液分离。以盐酸将得到的除蛋白液调整到pH4.0 4.3，加入除蛋白液质量的2%量的活性碳，搅拌2小时后，进行固液分离。在采集的活性碳中加水，以氢氧化钠调整到pH9.5 10，以60°C搅拌90 100分钟后，进行离心分离得到上清液。在以离心分离沉淀的活性碳中再加入水后，以氢氧化钠调整到PH10.5 11，以60°C搅拌90 100分钟后，进行离心分离得到上清液。合并两上清液，以盐酸中和，得到本提取物。实施例2 (N-乙酰基神经氨酸含量的测定方法)如下以高效液相色谱质谱分析仪(LC-MS)测定本提取物和本制剂的N-乙酰基神
经氨酸含量。以水10倍稀释按照实施例1制造的本提取物(1.2单位/mL)，注入LC-MS。使用按照实施例1所制造的本提取物来制造的本制剂(NTP注射剂)也同样以水10倍稀释，注入LC-MS。使用按照实施例1所制造的本提取物来制造的本制剂(NTP片剂)，将3片以甲醇/氯仿(I: l)3mL清洗3次，除去膜包衣层，干燥后，加入12mL水进行悬浊(I单位/mL)，离心后将上清液以水10倍稀释，注入LC-MS。就N-乙酰基神经氨酸而言，配制水溶液的标准溶液制成校正曲线。LC-MS在HPLC部中使用Agilent生产的1100系列，在质谱分析装置中使用API3000 (Applied Biosys`tems/MDS Sciex 生产)。分析条件如下。柱:InertsiI0DS-3 ( Φ 2.1X 150mm)柱温:25°C，流速:200μ L/ 分钟流动相:甲醇/0.05%甲酸甲醇％/ 分钟:0/0-0/1-44/8-100/8.1-100/11进样量:5 μ L，样品室设定温度:4°C检测:正离子检测MRM在表I中表示LC-MS的测定条件。表I中的各参数的意义如下。.DP:施加于孔板的电压.FP:施加于聚焦环的电压.CE:碰撞能量.CXP:施加于Q2出口的电压.NEB:雾化器气体的压力.⑶R:气帘气体的压力.IS:离子喷雾器的电压.CAD:碰撞气体的压力.TEM:叶轮气体温度(turbo gas temperature)[表I ]
检测离子(Q1/Q3) [DP~[FP~[CE~|CXP lNEB ICUR IlS~|CAD ITEM
权利要求
1.一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于: 每I单位含有4000ng以上的N-乙酰基神经氨酸。
2.一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于: 每I单位含有4000 22500ng的N-乙酰基神经氨酸。
3.一种作为液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于: 每ImL含有4800ng以上的N-乙酰基神经氨酸。
4.一种作为液体的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于: 每ImL含有4800 27000ng的N-乙酰基神经氨 酸。
5.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于: 每I单位含有4000ng以上的N-乙酰基神经氨酸。
6.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂，其特征在于: 每I单位含有4000 22500ng的N-乙酰基神经氨酸。
7.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于:每ImL含有4800ng以上的N-乙酰基神经氨酸。
8.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂，其特征在于:每ImL含有4800 27000ng的N-乙酰基神经氨酸。
9.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于: 每I管含有14400ng以上的N-乙酰基神经氨酸。
10.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂，其特征在于: 每I管含有14400 8IOOOng的N-乙酰基神经氨酸。
11.一种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于:每I片含有16000ng以上的N-乙酰基神经氨酸。
12.—种含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂，其特征在于:每I片含有16000 90000ng的N-乙酰基神经氨酸。
13.如权利要求5或6所述的制剂，其特征在于: 其为镇痛剂。
14.如权利要求7 10中任一项所述的注射剂，其特征在于: 其为镇痛剂。
15.如权利要求11或12所述的片剂，其特征在于: 其为镇痛剂。
16.—种管理痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的品质的方法，其特征在于: 其是通过测定所述提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
17.如权利要求16所述的管理痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的品质的方法，其特征在于: 所述提取物每I单位中，所述提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量为4000ng以上时，设定所述提取物的品质为合格。
18.如权利要求16所述的管理痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的品质的方法，其特征在于: 所述提取物每I单位中，所述提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量为4000 22500ng时，设定所述提取物的品质为合格。
19.一种痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物，其特征在于: 其是以权利要求16 18中任一项所述的方法进行品质管理得到的。
20.一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的品质的方法，其特征在于: 其是通过测定所述制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
21.如权利要求20所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的品质的方法，其特征在于: 所述制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每I单位中，所述制剂所含有的N-乙酰基神经氣Ife的量为4000ng以上时，设定所述制剂的品质为合格。
22.如权利要求20所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的品质的方法，其特征在于: 所述制剂中的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物每I单位中，所述制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量为4000 22500ng时，设定所述制剂的品质为合格。
23.一种制剂，其特征在于: 其是以权利要求20 22中任一项所述的方法进行品质管理得到的。
24.一种管理含有 痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的品质的方法，其特征在于: 其是通过在所述注射剂中，测定所述注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
25.如权利要求24所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的品质的方法，其特征在于: 在所述注射剂中，所述注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在所述注射剂每ImL中为4800ng以上时，设定所述注射剂的品质为合格。
26.如权利要求24所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的品质的方法，其特征在于: 在所述注射剂中，所述注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在所述注射剂每ImL中为4800 27000ng时，设定所述注射剂的品质为合格。
27.如权利要求24所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的品质的方法，其特征在于: 在含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂中，所述注射剂每I管中，所述注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量为14400ng以上时，设定所述注射剂的品质为合格。
28.如权利要求24所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的品质的方法，其特征在于: 在含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的3mL装的注射剂中，所述注射剂每I管中，所述注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量为14400 81000ng时，设定所述注射剂的品质为合格。
29.一种注射剂，其特征在于:其是以权利要求24 28中任一项所述的方法进行品质管理得到的。
30.一种管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的品质的方法，其特征在于: 其是通过在所述片剂中，测定所述片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
31.如权利要求30所述的管理含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的品质的方法，其特征在于: 在所述片剂中，所述片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在所述片剂的每I片中为16000ng以上时，设定所述片剂的品质为合格。
32.如权利要求30所述的含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的品质的方法，其特征在于: 在所述片剂中，所述片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量在所述片剂的每I片中为16000 90000ng时，设定所述片剂的品质为合格。
33.一种片剂，其特征在于: 其是以权利要求30 32中任一项所述的方法进行品质管理得到的。
34.一种评价含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的方法，其特征在于: 其是通过测定所述提取物所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
35.一种评价含有痘苗病 毒接种兔炎症皮肤提取物的制剂的方法，其特征在于: 其是通过测定所述制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
36.一种评价含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的注射剂的方法，其特征在于: 其是通过测定所述注射剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
37.一种评价含有痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物的片剂的方法，其特征在于: 其是通过测定所述片剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量而进行的。
全文摘要
本发明的目的在于提供品质更稳定的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和含有该提取物作为有效成分的制剂等。通过将痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和含有该提取物作为有效成分的制剂所含有的N-乙酰基神经氨酸的量作为指标，能够确保该提取物和制剂的品质更加稳定。以这样的方法而品质更稳定的痘苗病毒接种兔炎症皮肤提取物和含有该提取物作为有效成分的制剂，其有效性和安全性也有更严格的保证，是有用性非常高的提取物和制剂。
文档编号A61K35/36GK103110663SQ20121052862
公开日2013年5月22日 申请日期2012年12月10日 优先权日2012年10月10日
发明者中泽良隆, 芝山洋二, 中村耕 申请人:日本脏器制药株式会社