专利名称：邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐、其制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐、其制备方法、及其在 制备预防和/或治疗肿瘤等机体异常增生疾病的药物或功能食品中的应用、以及其在制备 预防和/或治疗机体炎症、痛疼等疾病的药物或功能食品中的应用。
背景技术：
恶性肿瘤(癌症)是严重威胁人类健康的常见病和多发病。根据世界卫生组织的 报告报道，全球2008年约有1240万人确诊罹患某种类型癌症，其中760万人因此死亡。报 告预计，到2010年，癌症致死率将超过心脏病，成为全球头号杀手；到2030年，全球每年可 能将有癌症患者2640万人，其中1700万人将因此死亡。在过去的几十年中，为了应对癌症， 各国医学科学家和药物科学家一直在不懈地努力，也取得了不俗的成就，但是，截止目前， 还没有药物能完全预防或治愈癌症。在相当长一段时期内，细胞毒性药物仍将是肿瘤药物 治疗的主体。目前，针对肿瘤形成及增殖机制的多环节作用的新型抗肿瘤药物(对肿瘤细 胞具有靶向杀伤作用，而对人体正常组织损伤很小，甚至无)正逐渐成为国内、外研究机构 关注的热点。科学家在很久以前就已注意到炎症、组织损伤与癌症密切相关，在1863年，Rudolf Virchow就指出癌症常常产生于机体的慢性炎症部位。事实上，流性病学调查表明，慢性乙 肝、慢性胃肠炎和慢性胰腺炎病人患肝癌、胃肠癌与胰腺癌的风险显著增加；同样地，外伤 病人患癌症的风险也会增加。在此过程中，细胞内的环氧合酶(Cyclo-oxygenase，COX)、 脂氧合酶(Lipoxygenase，L0X)及其代谢产物起着非常关键的作用。这些可能成为预防和 治疗癌症的革巴点(参阅Coussens LM, Werb Z. (2002) Inflammation and cancer. Nature 420 860-7)。COX及其代谢产物与肿瘤生成、进展、转移及血管的生成密切相关。在人体内， 已鉴定与癌症相关的COX至少有二种:C0X-1 (参阅=Xie W，Chipman JG, Robertson DL, et al. (1991)Expression of a mitogen-responsive gene encoding prostaglandin synthase is regulated by mRNA splicing. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:2692-6)禾口 C0X_2(参阅Hla Τ, Neilson K. (1992)Human cyclooxygenase-2cDNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7384-8)。C0X-1是生理性的，在胃肠道、肾脏、血管平滑肌和血小板中都有 表达，参与人体的正常生理机能；然而，C0X-2在绝大多数正常组织中无法检测到，但能被 各种各样刺激因素(如生长因子、炎症相关的细胞介质)快速诱导表达(参阅=Morita I. (2002)Distinct functions of C0X-1 and C0X-2. Prostaglandins Other Lipid Mediat. 68-69 =165-75) 0在许多肿瘤组织(如胰腺癌、肺癌、结肠癌、胃腺癌、乳癌和前 列腺癌等)中，C0X-2表达是大量增加的，还伴随着C0X-2代谢产物前列腺素的增加(参 阅:Molina MA, Sitja-Amau M， Lemoine MG, et al. (1999)Increased cyclooxygenase-2 expression in human pancreatic carcinomas and cell lines growth inhibition bynonsteroidal anti-inflammatory drugs. Cancer Res. 59 :4356_62 ；Wolff H，Saukkonen K，Anttila S，et al. (1998)Expression of cyclooxygenase-2in human lung carcinoma. Cancer Res. 58 4997~5001 ；Uefuji K,Ichikura TiMochizuki H，et al. (1998)Expression of cyclooxygenase-2protein in gastric adenocarcinoma. J. Surg. Oncol. 69 :68_72 ； Hwang D，Scollard D，Byrne J, et al. (1998). Expression of eyelooxygenase-land cyclooxygenase-2in human breast cancer. J. Natl. Cancer Inst. 90 :455_60 ；Kutchera W, Jones DA, Matsunami N， et al. (1996)Prostaglandin Hsynthase 2 is expressed abnormally in human colon cancer :evidence for a transcriptional effect. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93 4816-20 ；Gupta S, Srivastava Μ, Ahmad N， et al. (2000) Over-expression of cyclooxygenase-2in human prostate adenocarcinoma. Prostate 42:73-78)。过度表达的COX-2及其代谢产物参与肿瘤的生成、发展及血管的增生(参 阅:Qiao L，Kozoni V，Tsioulas GJ, et al. (1995) Selected eicosanoids increase the proliferation rate of human colon carcinoma cell lines and mouse colonocytes in vivo.Biochim. Biophys. Acta 128 :215_23 ；MulIer-Decker K，Neufang G，Berger I， et al. (2002)Transgenic cyclooxygenase-2overexpression sensitizes mouse skin for carcinogenesis.Proc.Natl.Acad.Sci. USA 99 12483-88 ；Prescott SM. (2000) Is cyclooxygenase-2 the alpha and the omega in cancer ？ J Clin. Invest. 105 1511-94)。基因敲除的实验研究表明，COX-I也与肿瘤的发展密切相关(参阅=Chulada PC, Thompson MB， Mahler JF, et al. (2000)Genetic disruption of Ptgs-1， as well as of Ptgs—2，reduces intestinal tumorigenesis in Min mice. Cancer Res. 60 4705-8) ο C0X-2的抑制剂、C0X1/2抑制剂可以抑制肿瘤的生长(参阅:Piazza GA，Rahm AK, Finm TS, et al. (1997)Apoptosis primarily accounts for the growth-inhibitory properties of sulindac metabolites and involves a mechanism that is independent of cyclooxygenase inhibition, cell cycle arrest, and p53 induction. Cancer Res. 57 2452-9 ；Seed MP, Brown JR, Freemantle, et al. (1997)The inhibition of colon_26adenocarcinoma development and angiogenesis by topical diclofenac in 2. 5% hyaluronan. Cancer Res. 57 :1625-9)。 LOX及其代谢产物与肿瘤生成、进展、转移及血管的生成也密切相关。LOX在催 化花生四烯酸代谢的过程中，根据将氧原子插入花生四烯酸位置的不同，可分为不同的亚 型 5-L0X、8-L0X、12-L0X 和 15_L0X(参阅=Brash AR. (1999) Lipoxygenases :occurrence, functions, catalysis, and acquisition of substrate. J. Biol. Chem. 274 :23679_82)。 越来越多的研究证据表明，5-L0X及其代谢产物参与了肿瘤的进展(参阅=Steele VE, Holmes CA, Hawk ET, et al. (1999)Lipoxygenase inhibitors as potential cancer chemo-preventives. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 8 467-83)、是月中瘤细胞增殖 的介质(参阅Anderson KM，Seed T，Jajeh Α，et al. (1996)An in vivo inhibitor of 5—lipoxygenase，MK886，at micromolar concentration induces apoptosis inU937 and CML cells. Anticancer Res. 16 :2589_99) ；5-L0X的抑制剂可以抑制肿瘤的生长(参阅 Gunning WT, Kramer PM, Steele VE et al. (2002)Chemo-prevention by lipoxygenase and leukotriene pathway inhibitors of vinyl carbamate—induced lung tumors inmice. Cancer Res. 62 4199-201)。其它 8-L0X、12-L0X、15_L0X 及其代谢产物也参与了 肿瘤的生存和发展，8-L0X和12-L0X及其代谢产物可能促进肿瘤的生成和发展(参阅 Muga SJ, Thuillier P， PavoneA, et al. (2000)8S-lipoxyge-nase products activate peroxisome proliferators-activated receptor alpha and induce differentiation in murine keratino-cytes. Cell Growth Differ. 11 447-54 ；Honn KV, Tang DG, Gao X，et al. (1994) 12-lipoxygenases and 12(s)-HETE :role in cancer metastasis. Cancer Metastasis Rev. 13 :365_96)，而15-L0X及其代谢产物可能抑制肿瘤的发展(参 阅:His LC, Wilson LC, Eling TE. (2002)Opposing Effects of 15-Lipoxygenase-l and-2 Metabolites on MAPK Signaling in Prostate. Alteration in peroxisome proliferatoractivated receptor gamma. J. Biol. Chem. 277 40549-56)。一系列的研究表明，在肿瘤组织中LOX及C0X、特别是5-L0X及C0X-2表达和 活性是增加的，抑制5-L0X和C0X-2表达和/或活性可能是预防和治疗癌症的有效途径 (参阅RomanoM, Claria J. (2003) Cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase converging functions on cell proliferation and tumor angiogenesis -implications for cancer therapy. FASEB J 17:1986-95)。非留体类抗炎药是一类目前在临床广泛应用的解热镇 药，有的是COX的抑制剂，有的是COX和LOX的双重抑制剂。托芬那酸，属于非留体类解 热镇痛药，是COX和LOX的双重抑制剂，最先由丹麦GEA公司研制幵发，并首先在丹麦上 市，主要用于治疗偏头痛。最近的研究表明，托芬那酸对实验动物的人胰腺癌、结直肠癌 具有明显的抑制作用，而且可以增加胰腺癌细胞对放射治疗的敏感性；其作用机制可能与 托芬那酸能降解肿瘤细胞内的核转录因子(SP1、SP3、SP4)、抑制表皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)及 VEGF 受体的产生、抑制生存素(Surviv in)生成 和激活 ESE-1/EGR-1 信号通路相关(参阅Abdelrahim M，Baker CH, Abbruzzese 几， et al. (2006)Tolfenamic acid and pancreatic cancer growth, angiogenesis, and Sp protein degradation. J. Natl. Cancer Inst. 98 855~68 ；Abdelrahim MBiAbbruzzese CH, Sheikh-Hamad JL, et al. (2007)Regulation of vascular endothelial growth factor receptor-1expression by specificity proteins 1,3, and 4 in pancreatic cancer cells.Cancer Res. 67 3286~94 ；Konduri S,Colon JiBaker CH,et al. (2009)Tolfenamic acid enhances pancreatic cancer cell and tumor response to radiation therapy by inhibiting survivin protein expression. Mol. Cancer Ther. 8 :533_42 ；Lee SH, Bahn JH, Choi CK, et al. (2008)ESE-l/EGR-lpathway plays a role in tolfenamic acid-induced apoptosis in colorectal cancer cells. Mol. Cancer Ther· 7 :3739_50·)0 然而，托芬那酸的抗肿瘤活性不强(参阅:Abdelrahim M，Baker CH，Abbruzzese几，et al. (2006)Tolfenamic acid and pancreatic cancer growth, angiogenesis, and Sp protein degradation. J. Natl. Cancer Inst. 98 :855-68.)。非留体类抗炎药在抗肿瘤方面的潜力已引起研究者的重视，早在1999年，就有研 究者申请专利，将含羧基的非留体类抗炎药修饰成肿胺衍生物后，其可选择性抑制C0X-2， 并具有抗肿瘤活性(参阅us 6399647B2, Amide derivatives for antiangiogenic and/ or antitumorigenic use)。其在评价修饰物时，是用抑制COX的活性为指标的，这可能有 一定的局限性，因为最近的研究表明L0X也参与肿瘤的发展和血管的生成，而且非LOX和COX作用也可能参与抗肿瘤活性。尽管在专利中，也提到了托芬那酸，但没有具体的实施例。
托芬那酸是邻苯胺基苯甲酸的一种。本发明拟以邻苯胺基苯甲酸为先导化合物， 修饰合成一系列新的化合物，以增加抗肿瘤活性和改善药物代谢动力学为目标，找到高效 (抗肿瘤、解热镇痛等)、低毒的新化合物。

发明内容
本发明的目的在于提供一类具有抗癌和解热镇痛活性的新型低毒化合物及其制 备方法。该类化合物对小鼠的急性毒性较低，ICR小鼠，静脉给药，半数致死量(LD5tl)大 于100mg/kg ；在一定剂量下，对于人肺癌(NCI-460)、肝癌(SMMC-7721, BEL-7402)、胃癌 (BGC-823)、鳞状上皮癌(KB)、前列腺癌(PC-3)、宫颈癌(HELA)、卵巢癌(H0-8910)、乳腺癌 (BT549)、结肠癌(Caco-2)、胰腺癌(ASPC-1，PANC-1)、白血病(HL-60，K562)和胶质细胞瘤 (U251)细胞株具有较强的抑制作用；对移植裸鼠的人肿瘤细胞也具有明显的抑制作用；静 脉注射后，该类化合物能迅速分布到组织，有较长消除半衰期；对热、化学性刺激引起的疼 痛具有明显的抑制作用；而且，该类化合物的制备方法简便，易于操作，成本很低，非常有利 于产业化。本发明采用的技术方案是如通式I所示的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐
权利要求
如通式I所示的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐I式中，R1为氢、硝基或氨基；R2为氢、硝基或卤素；R3为氢或卤素；R4为氨基、C1 C10烷仲胺基、二C1 C5烷叔胺基、苯仲胺基、苯C1 C3烷氧仲胺基、羟基、C1 C10烷氧基、苯氧基、苯C1 C3烷氧基；若R4是羟基，则R1、R2和R3不同时为氢。F2009101010048C0000011.tif
2.根据权利要求1所述的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐，其中，R1为 氢、硝基或氨基；R2为氢、硝基、氟或氯；R3为氢或氯；R4为氨基X1-Cltl烷仲胺基、二 C1-C5烷 叔胺基、苯仲胺基、苯C1-C3烷氧仲胺基、羟基、C1-C5烷氧基、苯氧基、苯C1-C3烷氧基；若R4 是羟基，则R1、R2和R3不同时为氢。
3.根据权利要求2所述的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐，其中，R1为 氢；R2为硝基或氟；R3为氯；R4为氨基、(^-(5烷仲胺基、二C1-Qg叔胺基、苯仲胺基、苯C1-C3 烷氧仲胺基、羟基、C1-C5烷氧基、苯氧基、苯C1-C3烷氧基。
4.根据权利要求3所述的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐，其选自-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮甲酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮乙酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮戊酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮苯甲酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮苯酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮单甘油酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰乙胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰正丙胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰正辛胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯甲胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯甲氧胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰二乙醇胺、4-硝基-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙酯、 4-硝基-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸酰正丙胺、 6-氯-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸、 2-[(3_氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙酯、 2-[(3_氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸酰正丙胺。
5.制备如权利要求1所述的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐的方法，其 包括以下步骤a).将式II化合物
6.根据权利要求1-4任一项所述的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐在 制备预防和/或治疗肿瘤疾病的药物或功能食品中的应用。
7.根据权利要求6所述的肿瘤疾病是指肺癌、肝癌、胃癌、鳞状上皮癌、前列腺癌、宫颈 癌、卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、白血病或胶质细胞瘤。
8.根据权利要求1-4任一项所述的邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐在 制备预防和/或治疗机体炎症、痛疼疾病的药物或功能食品中的应用。
全文摘要
本发明提供了邻苯胺基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐、其制备方法、及其在制备预防和/或治疗肿瘤等机体异常增生疾病的药物或功能食品中的应用、以及其在制备预防和/或治疗机体炎症、痛疼等疾病的药物或功能食品中的应用。
文档编号A61P29/00GK101985428SQ20091010100
公开日2011年3月16日 申请日期2009年7月29日 优先权日2009年7月29日
发明者吴耀东, 张涛, 杨岚, 王树龙, 葛求富, 郭殿武, 黄滨南 申请人:杭州民生药业有限公司