专利名称：一种含银杏内酯药物组合物及其制备方法与用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域，具体涉及一种含银杏内酯药物组合物及其制备方法与用途，更具体地说，涉及一种由磷酸川芎嗪和银杏内酯组合而成的药物组合物，其制备方法以及在制备治疗缺血性心脑血管疾病药物方面的应用。
背景技术：
银杏内酯为银杏中的一类主要活性成分，可消除血小板聚集、抑制血栓形成，可防止动脉粥样硬化，对心肌、大脑局部缺血具有很好的保护作用等，包括银杏内酯A、B、C、M、J和白果内酯。
磷酸川芎嗪为2，3，5，6-四甲基吡嗪磷酸盐一水合物(C8H12N2·H3PO4·H2O)，为白色或类白色结晶性粉末，具有抗血小板聚集作用，并对已聚集的血小板有解聚作用，扩张小动脉，改善微循环、增加脑血流和活血化瘀作用。磷酸川芎嗪吸收及排泄迅速，可以通过血脑脊液屏障。临床用于缺血性脑血管疾病(如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞)。
由于化学药物和中药的复方药品不良反应报道较多，中国食品药品监督管理局于2005年2月2日发布了“关于暂停受理银杏达莫注射液等117个品种已有国家标准药品注册申请有关事宜的通知”，由此看来疗效确切、质量稳定的化学药物和中药的复方药品的研发和生产仍然具有一定的难度。
申请号为CN200410083882.9的专利文献公开了一种银杏药物组合物、其制备方法与用途，用的原料药为银杏叶提取物和磷酸川芎嗪。其中所述的银杏提取物是多种有效成分的混合物，而活性成分银杏内酯只占其中的很少一部分。在以后的动物实验和临床应用中疗效并不是非常的理想。
但目前，尚无将银杏内酯提纯后和磷酸川芎嗪以一定比例进行组配后，制成药品进行临床使用的报导。

发明内容
针对以上现有技术的不足，本发明研究人员经过大量的试验，制备出以银杏内酯和磷酸川芎嗪为主要活性成分，按一定重量配比，疗效更好的含银杏内酯药物组合物。
本发明的一个目的是公开一种含银杏内酯药物组合物，它以银杏内酯和磷酸川芎嗪为主要活性成分。
本发明的另一个目的是公开上述含银杏内酯药物组合物的制备方法。
本发明的又一目的是公开上述含银杏内酯药物组合物的用途。
本发明所述的含银杏内酯药物组合物可制备成各种药剂学上的可用剂型，因此可使用该组合物还可含有一种或多种辅剂；比如氯化钠、淀粉、滑石粉和硬脂酸镁等，药学领域可接受的辅剂。
本发明所述的磷酸川芎嗪可采用符合药用标准的原料。
本发明所述的银杏内酯提取物，其中所含的银杏内酯重量百分含量在85％以上。银杏内酯提取物可以是任何方法制备的，只要其中银杏内酯的重量百分含量达到85％以上，都可以用来制备本发明含银杏内酯药物组合物。
本发明含银杏内酯药物组合物中，磷酸川芎嗪含量为银杏内酯的1-100倍；优选为磷酸川芎嗪含量为银杏内酯的5-20倍；更优选为磷酸川芎嗪含量为银杏内酯的10倍。
本发明所述的银杏内酯提取物也可以采用以下方法制备将申请号为CN200410083882.9的专利文献中的银杏提取物或符合《中国药典》标准的银杏叶提取物作为起始原料，将原料用水溶解，石油醚脱脂，醋酸乙酯萃取，碳酸氢钠溶液洗涤，醋酸乙酯液浓缩，稀释，超滤，滤液浓缩，干燥，粉碎的方法得到本发明银杏内酯提取物。
具体的说，本发明银杏内酯提取物是经过下述步骤制备而成的将原料用5倍量的水溶解，用石油醚脱脂后，水溶液用等体积的醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液，用0.1mol/L的碳酸氢钠溶液洗涤4次，洗涤后的醋酸乙酯液用水洗涤至中性；将醋酸乙酯液浓缩，浓缩液加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得本发明银杏内酯提取物。
本发明所述的含银杏内酯药物组合物可以制备成各种药剂学上的可用剂型，如冻干粉针剂、片剂、胶囊剂、小容量注射剂、大容量注射剂，优选的剂型为小容量注射剂、大容量注射剂。本发明所述的含银杏内酯药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。比如使用磷酸川芎嗪、银杏内酯与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
本发明所述的含银杏内酯药物组合物当制备成大容量注射剂时，需加入适量氯化钠作为等渗调节剂。
本发明研究人员进行大量实验发现，当银杏药物组合物中磷酸川芎嗪重量为银杏内酯重量的10倍配比时协同作用最好、疗效最佳。实验结果见表1。
表1 活性成分配比优选实验


注±表示药理作用差；+表示药理作用一般；++表示药理作用较好；+++表示药理作用最好。
本发明最优选银杏药物组合物大容量注射剂的规格为250ml/瓶，每瓶含有磷酸川芎嗪100mg，银杏内酯10mg。
用法如下静脉滴注，一次一瓶，10～15天为一疗程。
本发明所述的含银杏内酯药物组合物通过银杏内酯和磷酸川芎嗪相互补充协同作用，可起到意想不到的效果。银杏内酯可消除血小板聚集、抑制血栓形成，可防止动脉粥样硬化，对心肌、大脑局部缺血具有很好的保护作用；磷酸川芎嗪吸收及排泄迅速，可以通过血脑脊液屏障发挥作用。
本发明所述的含银杏内酯药物组合物为银杏内酯和磷酸川芎嗪按特定比例组配而成的复方制剂，其吸收及排泄迅速，可以通过血-脑脊液屏障。通过二者相互补充协同作用于机体，充分发挥活血化瘀，有抗血小板凝集，扩张血管，改善微循环作用，适用于缺血性心脑血管疾病的冶疗，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉挛、脑功能不全、老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、心绞痛、心肌梗塞。也可用于肝纤维化、糖尿病引起的微循环病变，脉管炎等。
具体实施例方式
下面用实施例进一步描述本发明，有利于对本发明及其优点、效果更好的了解，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。
下述的用于制备本发明银杏内酯提取物的原料药是将市售的银杏叶采用申请号CN200410083882.9专利文献中的方法制备成的银杏提取物或直接为市售的银杏叶提取物。
实施例1将原料用5倍量的水溶解，用石油醚脱脂后，水溶液用等体积的醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液，用0.1mol/L的碳酸氢钠溶液洗涤4次，洗涤后的醋酸乙酯液用水洗涤至中性；将醋酸乙酯液浓缩，浓缩液加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得本发明银杏内酯提取物；其中银杏内酯含量大于85％。
实施例2称取上述(含银杏内酯4g)银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪40g，可配成100000ml药液，最终制成大容量注射剂400瓶(规格为250ml/瓶)。在浓配罐中加适量85℃注射用水，向浓配罐中投入900g氯化钠、充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.04％加入活性炭，加热90℃，保温20分钟，降温至50℃，将药液脱炭过滤至稀配罐中，在稀配罐中加入磷酸川芎嗪和银杏内酯提取物，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.8±0.2，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于输液瓶中，灌封时逐瓶充氮，灭菌，即得输液产品。
实施例3称取上述(含银杏内酯8g)银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪40g，可配成2000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支。在配制罐中加适量48℃注射用水，再加入磷酸川芎嗪和银杏内酯提取物，充分搅拌使完全溶解，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.5，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，灌封于安瓿中，灌封时安瓿逐支充氮，灭菌，即得小容量注射剂。
实施例4称取上述(含银杏内酯2.5g)银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪50g，可配成1000ml药液，最终制成小容量注射剂1000支。在配制罐中加适量48±2℃注射用水，再加入磷酸川芎嗪和银杏内酯提取物，充分搅拌使其完全溶解，加入右旋糖酐40赋形剂，按配制总体积的0.02％加入活性炭，静置20分钟，补加注射用水至配液量，调PH为4.8，将药液脱炭过滤，药液再经终端过滤，药液经终端过滤后灌装(装量1.0ml/支)，半加塞后冻干，制成冻干粉针产品。
实施例5称取上述(含银杏内酯1g)银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪100g，可最终制成片剂1000片。将银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪混合与80克淀粉混匀后用淀粉浆制粒，过20目筛整粒，干燥，加1克硬脂酸镁压制成片，即得含银杏内酯药物组合物片剂。
实施例6称取上述(含银杏内酯2g)银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪16g，可最终制成胶囊剂。将银杏内酯提取物、磷酸川芎嗪与80克淀粉、80克滑石粉混匀后，过100目筛，装胶囊，得含银杏内酯药物组合物胶囊剂。
实验例1本实验例为本发明实施例2的含银杏内酯药物组合物大容量注射剂(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，银杏内酯10mg，2.25g氯化钠)外观性状、pH值、重金属及其它规定的注射剂检查项目的检测。
√性 状 本品为微黄色至浅黄色的澄明液体。
√pH 值 pH值应为3.5-5.5(中国药典2000年版二部附录VI)。
√重金属 精密量取本品25ml，置坩埚中，水浴蒸干，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIII H第二法)，含重金属不得过百万分之五。
√热 原取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录XI D)，剂量按家兔体重每1kg缓缓注射10ml，应符合规定。
√其 他应符合注射剂项下有关各项规定(中国药典2000版二部附录IB)。
实验例2本实验例为本发明实施例2的含银杏内酯药物组合物大容量注射剂(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，银杏内酯10mg，2.25g氯化钠)中主要组分的定性测定。
取本品2ml，加碘化铋钾2滴，即生成橙红色沉淀。
在银杏内酯和磷酸川芎嗪含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的保留时间应与对照品相对应的峰保留时间一致。
本品显钠盐与氯化物的鉴别反应(中国药典2000年版二部附录III)。
以上3种实验为本发明含银杏内酯药物组合物所含组份的定性反应，说明本发明含银杏内酯药物组合物中含有确定的组份。
实验例3本实验例为本发明实施例2的含银杏内酯药物组合物大容量注射剂(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，银杏内酯10mg，2.25g氯化钠)中组份的定量检测。每ml含银杏内酯应为36-44μg，磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)应为0.36-0.44mg。
银杏内酯含量测定照《中国药典》2000年版一部银杏提取物项下含量测定中萜类内酯下的高效液相色谱法进行测定。
磷酸川芎嗪含量测定按照申请号CN200410083882.9中的含量测定方法进行测定。
按照本发明实施例2通过小试制备通过三批，每批200瓶，测定如下，每ml含量结果见表2。
表2 含量测定结果

阳性对照药按照申请号为CN200410083882.9的专利文献中的方法制备；本发明药物按照实施例2方法制备，均为大容量注射剂。
药理实施例1对小鼠缺氧耐力的影响实验取健康昆明种小鼠30只，体重20～24g。随机分成正常对照组，阳性对照组、本发明药物组。每组10只，雌雄各半，分笼饲养。各组分别静脉注射给予相应药物，对照组给相应体积的生理盐水，1次/d，连续7d。于末次给药后1小时，将小鼠分别置于体积为150ml磨口瓶中，内放15g钠石灰，密闭观察其存活时间。结果见表3。
表3 对小鼠常压缺氧的影响(X±S)

注与正常对照组比较**P＜0.01；与阳性对照组比较#P＜0.05。
药理实施例2对小鼠心肌缺氧的保护作用实验取健康昆明种小鼠30只，体重18～22g，随机分成3组，随机分成正常对照组，阳性药物组、本发明药物组。每组雌雄各半，分笼饲养。各组分别静脉注射给予相应药物，对照组给相应体积的生理盐水。给药方法1次/天，连续7天。于末次给药后1小时用乌拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉，背部固定，分离气管，以动脉夹夹闭气管，用心电仪观察心电，并用秒表记下小鼠夹闭气管后至心电消失的时间。结果见表4。
表4 对小鼠心肌缺氧的影响(X±S)


注与正常对照组比较**P＜0.01；与阳性对照组比较#P＜0.05。
药理实施例3对大鼠体内血栓形成的影响将大鼠随机分成3组，每组10只，分别为正常对照组，阳性药物组、本发明药物组。各组分别静脉给予相应药物，对照组给相应体积的生理盐水，对照组给生理盐水。每日1次，连续给药7天，末次给药后1小时，将大鼠用10％水合氯醛，按0.3g/kg体重麻醉后固定，分离左颈总动脉，在血栓仪上以2mA电流刺激血管7min后，记录血栓形成时间。结果见表5。
表5 对大鼠体内血栓形成的影响(X±S)

注与正常对照组比较**P＜0.01；与阳性对照组比较#P＜0.05。
由上述药理实验可以看出，本发明含银杏内酯药物组合物比现有制剂的疗效有提高。
权利要求
1.一种含银杏内酯药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有磷酸川芎嗪和银杏内酯提取物，磷酸川芎嗪含量为银杏内酯的1～100倍。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其中磷酸川芎嗪含量为银杏内酯的5～20倍。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其中磷酸川芎嗪含量为银杏内酯的10倍。
4.权利要求1～3之一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，其中银杏内酯提取物是通过将原料用水溶解，石油醚脱脂，醋酸乙酯萃取，碳酸氢钠溶液洗涤，醋酸乙酯液浓缩，稀释，超滤，滤液浓缩，干燥，粉碎的方法得到的。
5.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，其中银杏内酯提取物的制备方法为将原料用5倍量的水溶解，用石油醚脱脂后，水溶液用等体积的醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液，用0.1mo1/L的碳酸氢钠溶液洗涤4次，洗涤后的醋酸乙酯液用水洗涤至中性；将醋酸乙酯液浓缩，浓缩液加水稀释至相对密度为1.05，用截留分子量为200和600的超滤膜过滤，收集富含分子量为200-600的溶液，浓缩，干燥，粉碎，即得。
6.根据权利要求1～3之一所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物可以制备成各种药剂学上的可用剂型，如粉针剂、冻干粉针剂、片剂、胶囊剂、小容量注射剂、大容量注射剂，优选的剂型为小容量注射剂、大容量注射剂。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述的制剂为大容量注射剂，大容量注射剂中含有适量氯化钠作为等渗调节剂。
8.权利要求1～3之一所述的药物组合物在制备治疗缺血性心脑血管疾病，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉挛、脑功能不全、老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、心绞痛、心肌梗塞各疾病药物方面的应用。
9.权利要求1～3之一所述的药物组合物在制备治疗肝纤维化、糖尿病引起的微循环病变，脉管炎各疾病药物方面的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，具体公开了一种含银杏内酯药物组合物，其中含有磷酸川芎嗪和银杏内酯提取物，药物组合物中所含磷酸川芎嗪重量为银杏内酯重量的1～100倍，还公开了该药物组合物的制备方法，本发明药物组合物为磷酸川芎嗪和银杏内酯组成的复方制剂，通过二者相互补充协同作用于机体，充分发挥活血化瘀、抗血小板凝集、扩张血管、改善微循环作用，可应用于制备缺血性心脑血管疾病的药物。
文档编号A61K9/19GK1771957SQ20051010959
公开日2006年5月17日 申请日期2005年10月28日 优先权日2005年10月28日
发明者张玉梅 申请人:阿尔贝拉医药控股(通化)有限公司