专利名称：注射用丹参川芎嗪冻干粉针制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种注射用药物的制备方法，尤其涉及一种治疗心脑血管疾病用冻干粉针剂的制备方法。
背景技术：
目前，心脑血管疾病已经成了严重危害中老年人生命健康的常见病之一；近几年患心脑血管疾病人群日趋增多，且趋于年轻化；据统计，我国心脑血管疾病患者已经达到2. 7亿。临床研究证明，“丹参川芎嗪注射液”、“复方丹参片”、“乐麦胶囊”等以丹参为主要原料的单方或中西复方制剂对心脑血管疾病均有确切疗效。目前，由于注射剂的疗效明显好于口服制剂，因此“丹参川芎嗪注射液”、“丹参川芎嗪葡萄糖注射液”在临床上得到了广泛的应用。然而，由于注射液的稳定性较差，易随时间的延长而发生分解，从而影响药品质量及疗效；为此，公告号为“CN100361672C”的专利文献公开了一种名称为“丹参川芎嗪冻干粉针剂及制备方法”的发明专利。该专利虽然克服了传统丹参川芎嗪注射液的缺陷，但该专利在丹参提取物的制备过程中只进行水煮、浓缩、 醇沉等工序，杂质去除不完全，制得的丹参提取物有效成分纯度低；而且在制备过程中未对丹参素和盐酸)11芎嗪含量进行量化指标控制。

发明内容
为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明旨在提供一种丹参提取物有效成分单一、并严格控制丹参素和盐酸川芎嗪含量比例的注射用丹参川芎嗪冻干粉针制剂的制备方法。为了实现上述目的，本发明的技术方案由丹参提取物、盐酸川芎嗪、填充剂按 1:10:0.5的重量比按以下方法制成
1)丹参提取物制备取丹参药材用米醋浸润24小时，取出后炒制成丹参炭；加入12倍丹参药材重量的水煎煮2小时，滤过；再加入10倍丹参药材重量的水煎煮1. 5小时，滤过； 合并两次滤液，静置12小时，取上清液离心机分离，收集离心液并减压浓缩至相对密度为 1. 25的一次浸膏；该一次浸膏冷却后加入95%乙醇至溶液含醇量达55%，静置24小时，取上清液过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 25的二次浸膏；该二次浸膏冷却后加入 95%乙醇至溶液含醇量达75%，静置24小时取上清液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 3的三次浸膏；在三次浸膏中加入4倍重量的注射用水和0. 5倍重量的活性炭，搅拌均勻后静置6小时，过滤，滤液上大孔吸附树脂柱，注射用水洗脱；将收集的一次洗脱液上聚酰胺柱，注射用水洗脱，收集二次洗脱液并浓缩至相对密度为1. 2的四次浸膏，用0. lmol/L 的盐酸溶液调节四次浸膏的PH值达4. 0 4. 5，制得丹参提取物，备用；
2)药液配制取盐酸川芎嗪溶于2.5倍重量的注射用水中，加入丹参提取物，搅拌均勻得A液；取填充剂溶于同等重量的注射用水中得B液；将A液、B液缓慢混合均勻得混合液， 加热至60°C，加入重量为该混合液0. 05%的针用活性炭，再加热20分钟，冷却，过滤脱碳； 向经过脱碳处理的混合液中加入0. 35倍混合液重量的注射用水，分别用0. 45um和0. 22um 的微孔滤膜过滤除菌，制成每Iml溶液中含丹参素0. 4^0. 5mg、含盐酸川芎嗪4mg的丹参川芎嗪溶液；
3)冷冻干燥将丹参川芎嗪溶液分装于西林瓶中，每瓶5ml，药液样品放入冻干机预冻至-45°C，保温5小时；缓慢升温至_20°C，需要24小时；缓慢升温至0°C，需要24小时；缓慢升温至25°C，需要16小时；在25°C保温4小时，至真空度无明显变化，即得注射用丹参川芎嗪冻干粉针剂。上述技术方案中，所述填充剂为山梨醇、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一种、或两种、或两种以上组合；所述离心机转速为4000 6000转/分。丹参又名赤参，紫丹参，红根等；为双子叶植物唇形科，干燥根及根茎。主产于安徽、河南、山东、陕西等地。根主含脂溶性的二萜类成分，如丹参酮I、II A、II B,隐丹参酮， 异隐丹参酮，羟基丹参酮，降丹参酮，异丹参酮等外，还含有水溶性的酚酸成分，如丹参素， 丹参酸甲、乙、丙，原儿茶酸，原儿茶醛等。其功效为活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神。盐酸川芎嗪，化学原料药，其结构为2. 3. 5. 6-四甲基吡嗪结构的化合物，系中药川芎中提取的生物碱；因其盐类有较好的稳定性，故常用盐酸川芎嗪代替川芎嗪使用。现代药理研究表明川芎嗪具有扩冠、降压、提高心肌耐缺氧能力，抑制血小板聚集，兴奋呼吸中枢，松弛支气管平滑肌，提出高通气功能，阻止免疫复合物形成，抑制病菌生长，促进炎症吸收，增强毛细血管致密性，降低血液粘度，改善循环，增加内脏重要器官血液的供应等作用。 此外尚有扩张小动脉，改善微循环和增加脑血流量，从而产生抗血栓形成和溶血栓和作用。丹参素的化学名称为β -3,4- 二羟基苯基乳酸。与现有技术比较，本发明由于采用了上述技术方案，在丹参提取物制备过程中采用了水煮、离心、浓缩、醇沉、吸附、洗脱等工序，不仅能够比较彻底的去除无用杂质，从而能够确保制得的丹参提取物有效成分单一；而且由于严格控制了丹参素和盐酸川芎嗪的含量，因此用本发明方法制备的干粉针制剂为复方制剂，该制剂质量稳定可控，疗效确切，安全性高，能抗血小板聚集，对已聚集和血小板有解聚作用。以下是用本发明方法制备得到的丹参川芎嗪对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤组织中的一氧化氮(No)、一氧化氮合酶(NOS)变化所作的影响试验，以验证用本发明方法提取得到的丹参川芎嗪的药理作用。1)材料和方法
a.仪器和试剂仪器采用752C型紫外分光光度计，试剂采用本发明方法制备的用丹参川芎嗪配制而成的注射液(使用时用无菌生理盐水溶解配制成lg/L注射液)，测定NO、NOS 的试剂盒(南京建成生物工程研究所生产)。b.分组7天龄SD大鼠，性别不限，体质量10 15g，随机分成3组，每组10只； 分别为空白对照组，缺氧缺血模型组，丹参川芎嗪治疗组。c. NO、NOS测定动物分别在缺氧缺血后6、24、48h断头处死，取结扎侧脑组织称重，用无菌生理盐水作为勻浆介质，按lg:10mL的比例在冰浴中充分勻浆制成10%组织勻浆，离心机分离后取上清液，测定N0、N0S ；NO采用硝酸还原酶法测定，NOS应用比色法测定。d.统计学方法应用SAS 8. 0软件进行统计分析，经方差齐性检验后，多组均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用q检验。2.结果见表1、表2
表1 丹参川芎嗪对新生大鼠脑组织NO的影响
权利要求
1.一种注射用丹参川芎嗪冻干粉针制剂的制备方法，其特征在于由丹参提取物、盐酸川芎嗪、填充剂按1:10:0. 5的重量比按以下方法制成1)丹参提取物制备取丹参药材用米醋浸润24小时，取出后炒制成丹参炭；加入12倍丹参药材重量的水煎煮2小时，滤过；再加入10倍丹参药材重量的水煎煮1. 5小时，滤过； 合并两次滤液，静置12小时，取上清液离心机分离，收集离心液并减压浓缩至相对密度为 1. 25的一次浸膏；该一次浸膏冷却后加入95%乙醇至溶液含醇量达55%，静置24小时，取上清液过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 25的二次浸膏；该二次浸膏冷却后加入 95%乙醇至溶液含醇量达75%，静置24小时取上清液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 3的三次浸膏；在三次浸膏中加入4倍重量的注射用水和0. 5倍重量的活性炭，搅拌均勻后静置6小时，过滤，滤液上大孔吸附树脂柱，注射用水洗脱；将收集的一次洗脱液上聚酰胺柱，注射用水洗脱，收集二次洗脱液并浓缩至相对密度为1. 2的四次浸膏，用0. lmol/L 的盐酸溶液调节四次浸膏的PH值达4. 0 4. 5，制得丹参提取物，备用；2)药液配制取盐酸川芎嗪溶于2.5倍重量的注射用水中，加入丹参提取物，搅拌均勻得A液；取填充剂溶于同等重量的注射用水中制得B液；将A液、B液缓慢混合均勻得混合液，加热至60°C，加入重量为该混合液0. 05%的针用活性炭，再加热20分钟，冷却，过滤脱碳；向经过脱碳处理的混合液中加入0. 35倍混合液重量的注射用水，分别用0. 45um和 0. 22um的微孔滤膜过滤除菌，制成每Iml溶液中含丹参素0. 4^0. 5mg、含盐酸川芎嗪4mg的丹参川芎嗪溶液；3)冷冻干燥将丹参川芎嗪溶液分装于西林瓶中，每瓶5ml，药液样品放入冻干机预冻至-45°C，保温5小时；缓慢升温至_20°C，需要24小时；缓慢升温至0°C，需要24小时；缓慢升温至25°C，需要16小时；在25°C保温4小时，至真空度无明显变化，即得注射用丹参川芎嗪冻干粉针剂。
2.根据权利要求1所述的注射用丹参川芎嗪冻干粉针制剂的制备方法，其特征在于 所述填充剂为山梨醇、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一种、或两种、或两种以上的组合。
3.根据权利要求1或2所述的注射用丹参川芎嗪冻干粉针制剂的制备方法，其特征在于所述离心机转速为4000 6000转/分。
全文摘要
本发明公开了一种注射用丹参川芎嗪冻干粉针制剂的制备方法，属于医药领域。其技术方案是将丹参进行浸润、水煮、离心分离、浓缩、醇沉、吸附、洗脱等工序处理，制得有效成分较单一的丹参提取物，然后将丹参提取物、盐酸川芎嗪、填充剂按1:10:0.5的重量比例溶于水中，经过滤、脱碳、微孔滤膜除菌、冷冻干燥等处理即得丹参川芎嗪冻干粉针制剂；在本发明方法制成的丹参川芎嗪冻干粉针制剂中，每1ml组合药物含丹参素0.4~0.5mg、含盐酸川芎嗪不低于4mg。本发明生产的制剂质量稳定可控，疗效确切，安全性高，能抗血小板聚集，对已聚集和血小板有解聚作用，是一种主要用于闭塞性脑血管疾病、缺血性心血管疾病的药物。
文档编号A61K36/537GK102357083SQ20111035023
公开日2012年2月22日 申请日期2011年11月8日 优先权日2011年11月8日
发明者伍朝平, 周牧, 朱麟, 薛捷 申请人:贵州拜特制药有限公司