专利名称：：环状六肽化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及具有优良抗肿瘤作用的环状六肽化合物或其盐。
背景技术：
：近年来，癌症已成为人类死亡的首要原因，并有继续发展下去的趋势。因此，大量地开展了有关抗癌药物开发方面的研究，越来越多的研究人员试验从植物中提取具有抗肿瘤作用的成分。本发明所涉及的含有N-甲基酪氨酸和丙氨酸的环状六肽化合物，其类似物已知有从药用植物茜草中提取的RA-VII(TPC-B)(特开昭58-21655号公报)、RA-V(Chem.Pharm.Bull.，32,284～290,1984)等，尤其是RA-VII受到了人们的重视。然而，RA-VII的药效并不是那么完全。本发明的目的是提供比RA-VII的药效更优良的环状六肽化合物。发明的公开本发明的化合物是通式(I)表示的环状六肽式中，R代表其中，R1和R2分别代表烷基、苯基或苄基；另或者R代表其中，n代表4～6的整数。本发明中的烷基为直链或支链的碳原子1～4个的烷基，如甲基、乙基、异丙基、正丁基、叔丁基等。本发明的化合物可通过下述的方法制备。即通式(I)中的R为氢原子的化合物(以下称为RA-V)的羟基与R’-X表示的含有氮原子的卤化物其中(R′代表非氢原子的R，X代表卤素原子)反应来制备。反应溶剂用N，N-二甲基甲酰胺，有良好的结果，也可以用二甲亚砜、1，4-二噁烷、丙酮、甲基乙基酮、四氢呋喃、1，2-二甲氧基乙烷、甲醇、乙醇等。本反应优选在减存在条件下进行，如加入碳酸钾、碳酸钠、氢化钾或氢化钠。反应温度决定于溶剂的沸点，一般在5～80℃下进行。实施发明的最佳形式列举以下实施例具体说明本发明。实施例制备的化合物的结构及名称如表1所示。表1实施例1(TI-351)RA-V372mg(0.49mmol)、2-氯乙基二甲胺盐酸盐106mg(0.74mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺3ml中，再加入碳酸钾271mg(2.0mmol)，室温下搅拌60小时。在反应液中再加入28％氨水1ml，室温下搅拌12小时。反应液中加入20ml氯仿稀释，用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩。得到的残渣通过氧化铝柱进行层析分离，氯仿-甲醇(20∶1)流分用甲醇重结晶，得到198mg的TI-351。m.p.220～222℃[α]26D-205.0°(c，0.21，CHCL3)实施例2(TI-356)RA-V379mg(0.50mmol)、2-氯乙基二异丙胺盐酸盐150mg(0.75mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺3ml中，再加入276mg(2.0mmol)的碳酸钾，室温下搅拌60小时。在反应液中再加入28％氨水1ml，室温下搅拌12小时。反应液中加入20ml氯仿稀释，用无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩，得到的残渣通过氧化铝柱进行层析分离，氯仿-甲醇(50∶1)流分再通过硅胶柱层析进行精制，自氯仿-甲醇(20∶1)流分得到321mgTI-356。非结晶性粉末m.p.223～226℃(分解)[α]27D-182.9°(c，0.19，CHCL3)实施例3根据实施例1和实施例2的方法，使用相应的原料，合成TI-355、TI-357、TI-358、TI-359、TI-360、TI-361(表2)。表2</tables>实施例489.2mg(0.10mmol)的TI-356溶于2ml乙醇中，冰冷却下，边搅拌边加入2N盐酸0.1ml，浓缩反应液，得到TI-356盐酸盐92.4mg。非结晶性粉末m.p.218～221℃(分解)[α]23D-209.5°(c，0.49，H2O)工业实用性本发明可提供优良的抗肿瘤剂。为此，采用常用的制剂技术可将本发明的化合物制成注射剂，用于静脉给药。给药量为每天0.1～10mg/m2，可根据患者年龄、体重、症状的不同而适当增减。以下举出试验例说明本发明化合物的优良作用。试验例[对Colon26(小鼠结肠癌)的抗肿瘤效果]依据CancerRes.，50，2290～2295(1990)的方法进行试验。切开BALB/c系雌性小鼠继代移植11天后的Colon26肿瘤块，从切开判断为患癌小鼠的身上摘出肿瘤块，除去结缔组织后，用剪子剪碎。然后，1g肿瘤中加入5ml的Hank′s平衡盐溶液，用Luer-Lok注射器匀浆化，硅酮纱布滤过后，再通过血细胞计数板来计数，调制成1.0×106Ce11s/ml。将此细胞悬浮液，按0.2ml/只的剂量，皮下移植到CDF1系雄性小鼠(6周龄，日本CharlesRiver公司)的右腋下部，作为试验用小鼠，每8只为一组。把TI-356溶解于表面活性剂(HCO60∶聚乙二醇＝2∶1的混合液)中，缓慢添加生理盐水，调制成0.5％的各种浓度试样液，以细胞移植日作第0日，第3日至第5日之间，静脉注射上述试液。对照药用RA-VII。用游标卡尺测量给药结束次日(第8日)肿瘤的长径和短径，通过下式计算肿瘤体积、肿瘤体积比及T/C(％)值，以此来判断化合物阻断肿瘤增殖的效果。若T/C值在42％以下，则判断为有效，结果如表3所示。T/C(%)=Tn/T1Cn/C1&times;100]]>Cn给药开始后第n日的对照组的肿瘤体积Tn给药开始后第n日的给药组的肿瘤体积表3</tables>权利要求1.式(I)表示的环状六肽化合物或其盐式中，R代表其中R1，R2分别表示烷基、苯基或苄基；另或者R表示其中n表示4～6。2.根据权利要求1记载的式(I)的化合物，是R为下式表示的环状六肽化合物或其盐。全文摘要本发明提供了药效优良的环状六肽化合物,其结构如式(Ⅰ)所示,式中,R表示右二式,R文档编号A61K38/00GK1196060SQ96196959公开日1998年10月14日申请日期1996年9月10日优先权日1995年9月14日发明者丝川秀治,一柳幸生,山岸武宏申请人:大正制药株式会社,丝川秀治