专利名称：一种磷脂-维生素e琥珀酸聚乙二醇酯胶束的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种磷脂-维生素E琥珀酸聚乙二醇酯胶束在制备促进功效成分透皮吸收促渗剂中的应用，尤其涉及一种磷脂和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯混合的水溶性胶束冻干水溶粉。属于制药或化妆品领域。
背景技术：
胶束(micelles)是一个热力学稳定体系，广泛用于难溶性药物的增溶，提高生物利用度。胶束在药学中长期应用于难溶药物的增溶，经增溶后药物可达到临床治疗所需浓度。表面活性剂被放置到溶液中后，会迅速降低溶液的界面张力，但是随着量的增加，表面活性剂分子在水溶液表面的浓度呈上升趋势，饱和后，如果继续加人表面活性剂，此时溶液的界面张力不再发生变化。表面活性剂分子这时就会迅速转人溶液内部，从而形成亲水基向外疏水基向内的表面活性剂分子缔合体，称之为胶束[陆彬.胶束给药系统及其进展
(i)[J].中国药师杂志，2006，9 (5):428-431.]。混合胶束为两种或多种表面活性剂按一定比例混合而得的胶束体系，其临界胶束浓度(critical micelles concentration, CMC)比单一组分胶束低，稳定性通常高于单组分胶束，在临床应用中有明显的优势，如提高增溶量，提高淋巴或肿瘤靶向性，降低毒性。聚合物胶束制备主要有三种方法:直接溶解法、透析法和自组装溶剂蒸发法。自组装溶剂蒸发法是先把聚合物溶解到有机溶剂中，然后在搅拌条件下加入到水中，亲水段逐渐进入水相，疏水段则 聚集成核，形成聚合物胶束，然后加热，蒸出有机溶剂。磷脂是生物膜的组成成分，生物体内存在其相关分解酶，很容易代谢，因而磷脂具有生物降解性和生物兼容性，磷脂分子中的两条长脂肪酸链使之具有疏水性。然而，磷脂分子量较小，形成的囊泡和胶束稳定性不够，作为长循环和缓释材料的应用方面受到很大的限制。目前的解决办法是在其中加入含有长循环的组分:聚乙二醇、多聚糖、环糊精等成为长循环磷脂，以提高磷脂胶束或胶囊的稳定性。已有文章报道了不同链长的PEG形成的聚乙二醇一二硬脂酞磷脂酞乙醇胺(PEG-DsPE)胶束的特性。维生素E琥珀酸聚乙二醇酯(TPGS)是维生素E的水溶性衍生物，由亲水的极性聚乙二醇头和亲酯的非极性维生素E琥珀酸酯尾组成，临界胶束浓度为0.026%, HLB值13。TPGS最早由Eastman公司于1950年开发上市，并且被美国药典收载为药用辅料。在国外现已广泛应用于制剂研究中作为增溶剂、吸收促进剂、乳化剂、增塑剂以及水难溶性和脂溶性药物传递系统的载体，如固体分散体、眼部给药的载体、鼻腔内给药的载体等。近年来研究发现TPGS还可以抑制P-糖蛋白对药物的外排作用。TPGS与聚合物单体共聚形成新的聚合物，可以克服一些聚合物的机械强度过高，降解速度过慢的缺点，还可以提高原有聚合物的释放速率。将TPGS与乳酸共聚得到聚乳酸-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯共聚物(PLA-TPGS)，用来制备加载紫杉醇的纳米球。Ma等合成了聚己内酯-乳酸-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯共聚物(PCL-PLA-TPGS)，加载多西他赛后，在第5天和第30天的体外释放速率分别为21.38%和45.29%，明显快于PCL纳米球的释放(11.12%,22.01% )0同时TPGS能够抑制皮肤细胞内的P-糖蛋白将药物制剂或化妆品功效成分(P-gp底物类的，例如辅酶QlO)外排到血液中，增加在皮肤内部的滞留，从而增强疗效。TPGS作为药用辅料的安全性也有一定的保证，Eastman公司的研究人员发现,成年大鼠口服TPGS维生素E琥珀酸酯和聚乙二醇1000的LD5tl值均超过7g/kg，Zhan等用TPGS-FOL(叶酸)结合物制备多柔比星纳米粒靶向化疗叶酸受体丰富的肿瘤细胞，证明了加入50% TPGS-FOL纳米制剂的LD5tl值比不加50% TPGS-FOL制剂的LD5tl值显著降低。且TPGS在体内可生物降解，这都证明TPGS作为维生素E营养补充剂或作为药用辅料应用时是很安全。TPGS经常与其它脂质和共聚物形成混合胶束，TPGS的加入能够显著增加药物包封率和胶束的稳定性。文献中已有一些报导:TPGS/聚乙二醇-乙醇酸磷酯(TPGS/PEG-PE)、F127/TPGS (F127/TPGS) ,TPGS/ 聚乳酸乙醇酸-乙二(TPGS/PLGA-PEG)、PEG_DSPE/TPGS 等。因此，TPGS可作为混合胶束的材料，且可以改善其自身CMC过高的缺点，避免人体体液稀释时的不稳定。

发明内容
本发明提供了一种磷脂-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯胶束在制备促进功效成分透皮吸收中间体中的应用，所述胶束主要由磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯所制成，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 10-1: 50。优选地，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 10。或者，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 50。或者，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 30。
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优选地，所述的磷脂为天然磷脂、合成磷脂中的一种或几种的混合物。优选地，所述的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯为TPGS200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000中的一种或几种的混合物。优选地，所述胶束是由如下方法所制成:将磷脂和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，搅拌；缓缓注入水中，加热旋蒸回收乙醇，水溶液冷冻干燥，即制得磷脂维生素E琥珀酸聚乙二醇酯胶束水溶粉。本发明中磷脂-TPGS混合胶束的制备方法为自组装溶剂蒸发法，其中溶剂采用乙醇，成本较低，易于工业化生产。即先将磷脂和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，搅拌；缓缓注入水中，加热回收乙醇，制得磷脂-TPGS水溶性混合胶束。然后再采用溶剂-冷冻干燥法，具体过程为:将反应后的溶液置于-20 °C的冰箱预冻12h,迅速转移入冷冻干燥机内，真空条件下冷冻干燥48h。即得磷脂-TPGS水溶粉，制得的水溶粉溶于水后可以自组装成平均粒径约为25nm的纳米胶束。亦可采用溶剂-减压干燥法和溶剂_喷雾干燥法来进行水溶液干燥。溶剂-减压干燥法为:将反应结束的混合液置于旋转蒸发仪上，40°C下减压蒸发去除反应溶剂，残留物在室温下继续减压干燥过夜。溶剂-喷雾干燥法利用高压泵，以70 200大气压的压力，将混合液通过雾化器(喷枪)，聚化成10 200 μ m的雾状微粒与热空气直接接触，进行热交换，简便快捷。本发明的制成的磷脂-TPGS水溶粉复溶后进行了粒径和外观测定。平均粒径为25nm,粒度大小均匀，分布较窄。且胶束成形良好，圆整度适中，大小较均匀。
本发明提供的磷脂-TPGS胶束水溶粉具有以下优点:1)磷脂和TPGS混合形成胶束可以降低胶束的CMC，增加胶束稳定性和安全性。2)磷脂和TPGS混合形成胶束可以减小胶束粒径，使其能够进入皮肤角质层细胞内部，与角蛋白相互作用，使角蛋白堆积疏松，降低角质层细胞的致密程度。3)胶束携带的磷脂可以在皮肤表面构成脂质通道，达到对化妆品功效成分的双重促渗作用。4)冻干后制成水溶粉更利于与其他成分的混合，增加稳定性，便于保存。5)该磷脂-TPGS水溶粉的整个制备过程简单可操作，便于工业化大生产。经文献调研，目前未有将磷脂-TPGS制成空白混合胶束后冷冻干燥制成水溶粉来增加化妆品功效成分透皮促渗剂的报道。
具体实施方案:实施例1处方:磷脂40mg，TPGS2000mg·
制备工艺:将磷脂40mg和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯2000mg溶于50ml乙醇后，搅拌30min，使混合均匀，缓缓注入蒸馏水中，加热旋蒸回收乙醇，制得质量比为1: 50的磷脂-维生素E琥珀酸聚乙二醇酯混合胶束溶液。将反应后的溶液置于_20°C的冰箱预冻12h，迅速转移入冷冻干燥机内，真空条件下冷冻干燥48h，即得质量比为1: 50的磷脂-TPGS胶束水溶粉。实施例2处方:磷脂50mg，TPGS2000mg制备工艺:将磷脂50mg和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯2000mg溶于50ml乙醇后，搅拌30min，使混合均匀，缓缓注入蒸馏水中，加热旋蒸回收乙醇，制得质量比为1: 40的磷脂-TPGS混合胶束。将反应后的溶液置于_20°C的冰箱预冻12h，迅速转移入冷冻干燥机内，真空条件下冷冻干燥48h，即得质量比为1: 40的磷脂-TPGS胶束水溶粉。处方:磷脂60mg，TPGS1800mg制备工艺:将磷脂60mg和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，搅拌30min，使混合均匀，缓缓注入蒸馏水中，加热旋蒸回收乙醇，制得质量比为1: 30的磷脂-TPGS混合胶束。再将反应结束的混合液置于旋转蒸发仪上，40°C下减压蒸发去除反应溶剂，残留物在室温下继续减压干燥过夜得质量比1: 30的磷脂-TPGS水溶粉。实施例4处方:磷脂90mg，TPGS1800mg制备工艺:将磷脂90mg和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，搅拌30min，使混合均匀，缓缓注入蒸馏水中，加热旋蒸回收乙醇，制得质量比为1: 20的磷脂-TPGS混合胶束。再将反应结束的混合液置于旋转蒸发仪上，40°C下减压蒸发去除反应溶剂，残留物在室温下继续减压干燥过夜得质量比1: 20的磷脂-TPGS水溶粉。实施例5处方:磷脂180mg，TPGS1800mg制备工艺:将磷脂ISOmg和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，搅拌30min，使混合均匀，缓缓注入蒸馏水中，加热旋蒸回收乙醇，制得质量比为1: 10的磷脂-TPGS混合胶束。再利用高压泵，以70 200大气压的压力，将混合液通过雾化器(喷枪)，聚化成10 200 μ m的雾状微粒与热空气直接接触，进行热交换得质量比为1: 10的磷脂-TPGS水溶粉。实施例6处方:磷脂300mg，TPGS1600mg制备工艺:将磷脂300mg和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯1600mg溶于50ml乙醇后，搅拌30min，使混合均匀，缓缓注入蒸馏水中，加热旋蒸回收乙醇，制得质量比为1: 10的磷脂-TPGS混合胶束。再利用高压泵，以70 200大气压的压力，将混合液通过雾化器(喷枪)，聚化成10 200 μ m的雾状微粒与热空气直接接触，进行热交换得质量比为1: 5的磷脂-TPGS水溶粉。实验例1.透射电镜实验观察胶束外观取各种质量水溶粉适量，复溶于一定量的蒸馏水中，滴于电镜制样铜网上，吸附一段时间，1.5%的磷钨酸负染，滤纸吸干剩余液体，灯照干燥5min，放入透射电镜中，观察形态。由电镜图可知:胶束成形良好，圆整度适中，大小较均匀。2.粒径仪测量混合胶束粒径和电位取各种质量比水溶粉适量，复溶于一定量的蒸馏水中，采用动态激光散射法来测定混合胶束的粒径，粒径分布和电位。结果显示:粒度大小均匀，分布较窄，胶束的平均粒径25nm。3.荧光探针法测定混合胶束的临界胶束浓度(CMC)荧光探针技术主要是通过检测探针分子的荧光强度的变化来确定体系性质的变化，向无荧光基团的高分子溶液中加入荧光探针的分子，它对溶液体系中的极性改变有着十分灵敏的检测能力。荧光测定条件:发射光谱波长λ = 350nm-500nm，激发光谱波长λ=334nm ;激发和发射设定参数分别为5和2.5 ;石英样品池IcmX Icm0采用1.0X KT4Mol/L的芘探针溶液。取各种质量比的水溶粉适量复溶于一定量的蒸馏水中，再稀释成一系列浓度，再分别加入到含芘的试管中，稀释到一定浓度，平衡一段时间测荧光光谱，记录数据，计算得到磷脂-TPGS混合胶束的CMC为0.142mg/ml。比TPGS的CMC(0.120mg/ml)要小。4.水溶粉稳定性实验TPGS的熔点仅为39°C，且磷脂容易发生氧化降解。根据《中国药典》2010年版中稳定性指导原则，设定温度25 ± 2°C，相对湿度60 ± 10 %，光照45001x± 5001x。取水溶粉分别在第1、2、3、6个月末取部分固体分散体，观察样品性 状。实验结果如表所示:由表中性状可知，水溶粉稳定性良好。
权利要求
1.一种磷脂-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯胶束的应用，所述胶束主要由磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯所制成，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为I: 10-1: 50，其特征在于，该胶束在制备促进药物或化妆品功效成分透皮吸收促进剂中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 10。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 50。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述磷脂和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1: 30。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的磷脂为天然磷脂、合成磷脂中的一种或几种的混合物。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯为TPGS200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000 中的一种或几种的混合物。
7.根据权利要求1-6任一项所述的应用，其特征在于所述胶束是由如下方法所制成:将磷脂和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，搅拌；缓缓注入水中，回收乙醇，水溶液干燥，即制得磷脂维 生素E琥珀酸聚乙二醇酯胶束水溶粉。
全文摘要
本发明公开了一种磷脂和维生素E琥珀酸聚乙二醇酯(TPGS)胶束作为药物或化妆品功效成分的透皮促渗剂的应用。皮肤表皮的角质层为多层致密的膜结构，由角质细胞与其间的脂质成分组成，二者共同构成一道致密的屏障而阻止药物等外界因素对其的影响。因此化妆品成分的透皮吸收必须克服角质层的屏障作用。本发明的磷脂-TPGS水溶粉采用乙醇注入法将一定比例的磷脂和TPGS制备成水溶性胶束，冷冻干燥后制得磷脂-TPGS水溶粉，其溶于水后自组装成平均粒径约为25nm的纳米胶束，能够进入皮肤角质层细胞内部，与角蛋白相互作用，角质层细胞的致密程度降低，同时携带的磷脂能构成脂质通道。这种胶束的稳定性非常好，对各类化妆品功效成分都有较好的促透效果。
文档编号A61K47/24GK103142479SQ20131010537
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月29日 优先权日2013年3月29日
发明者吕慧侠, 张振海, 程凤仪, 周建平 申请人:中国药科大学