专利名称：利用pkc抑制剂来生产治疗htlv－1感染的药物的用途的制作方法
本申请要求1996年4月30日提交的美国临时申请系列号60/024,938的优先权。
本发明广泛地涉及一种治疗1型人T细胞亲淋巴性病毒(HTLV-1)感染的方法。尤其，本发明提供一种抑制HTLV-1病毒的蛋白活性如Tax 1活性诱导的作用和抑制HTLV-1复制的方法。本发明特别提供利用特定种类的同功酶选择性蛋白激酶C(PKC)抑制剂来治疗HTLV-1感染和与此相关的疾病如T细胞白血病和HTLV-1诱导的中枢神经系统疾病。
感染1型人T细胞亲淋巴性病毒(HTLV-1)的人易于发展为成年T细胞白血病。另外，HTLV-1感染的人可能表现慢性神经变性性疾病如热带强直性下身轻瘫和脊髓病。本领域目前还没有对HTLV-1感染的特定治疗方法。对与HTLV-1感染相关的疾病的治疗只是对症治疗并且该治疗没有提供令人满意的结果。因此，本领域需要开发治疗HTLV-1感染和与此相关疾病的治疗剂。
白血病的特征是一种血形成细胞的赘生物增殖。不同类型的白血病按照所涉及的细胞类型分类并且根据疾病的持续时间分为急性和慢性白血病。如果不治疗，所有类型的白血病都将致死。通常，死亡的原因是由白细胞浸润骨髓和取代正常的造血细胞引起的并发症。成年T细胞白血病可能与HTLV-1感染相关。在近四分之一世纪内，全世界都在努力改进白血病的治疗。利用目前最好的治疗方案治疗，可以使得目前90％以上患急性成淋巴细胞白血病(ALL)的儿童得到完全缓解。然而，患ALL特别是T细胞白血病的成年人对该治疗的反应通常不如儿童，并且大多数试验仅产生50％或更少的完全缓解率，而且仅具有一年或更少的中等持续时间。因此，本领域仍旧需要开发新的治疗与HTLV-1感染相关的成年T细胞白血病的治疗剂。
HTLV-1感染也可能引起慢性神经变性性疾病。慢性神经变性性疾病如热带强直性下身轻瘫和脊髓病可引起机能丧失、反射活性抑制和其它并发症。通常，神经变性性疾病的治疗是保守的和对症治疗，不能完全痊愈。因此，本领域也需要开发新的治疗与HTLV-1感染相关的慢性神经变性性疾病的治疗剂。
因此，本发明的目的是提供一种抑制感染细胞中1型人T细胞亲淋巴性病毒复制的方法。
本发明的另一目的是提供一种抑制细胞中Tax 1病毒蛋白活性作用的方法。
本发明的另一目的是提供一种治疗1型人T细胞亲淋巴性病毒感染的哺乳动物的方法。
本发明的另一目的是提供一种治疗与1型人T细胞亲淋巴性病毒感染相关的成年T细胞白血病的方法。
本发明的另一目的是提供一种治疗与1型人T细胞亲淋巴性病毒感染相关的慢性神经变性性疾病的方法。
通过一种或多种下列实施方案来提供本发明这些目的和其它目的。
本发明一个实施方案提供一种抑制细胞中1型人T细胞亲淋巴性病毒复制的方法，它包括让所述细胞与病毒复制抑制量的蛋白激酶C抑制剂接触。
本发明另一实施方案提供一种抑制细胞中Tax1病毒蛋白活性作用的方法，它包括让所述细胞与病毒蛋白活性抑制量的蛋白激酶C抑制剂接触。
本发明另一实施方案提供一种治疗1型人T细胞亲淋巴性病毒感染的哺乳动物的方法，它包括给予所述哺乳动物治疗有效量的蛋白激酶C抑制剂。
本发明另一实施方案提供一种治疗与1型人T细胞亲淋巴性病毒感染相关的成年T细胞白血病的方法，它包括给予需要该治疗的成年人治疗有效量的蛋白激酶Cβ同功酶选择性抑制剂。
本发明另一实施方案提供一种治疗与1型人T细胞亲淋巴性病毒感染相关的慢性神经变性性疾病的方法，它包括给予所述哺乳动物治疗有效量的蛋白激酶Cβ同功酶选择性抑制剂。
因此，本发明提供与治疗HTLV-1感染和与此相关的疾病有效的化合物相关的技术。
本发明发现，特定种类的蛋白激酶C抑制剂，即蛋白激酶C的β-同功酶抑制剂，特别是PKC的β-同功酶选择性抑制剂可在治疗学上用于抑制HTLV-1病毒蛋白活性诱导的作用，特别是抑制病毒复制。因此，这些化合物可在治疗学上用于治疗HTLV-1感染的病人。
HTLV-1复制包括在产生性的感染和潜伏性感染的再活化过程中HTLV-1染色体组的繁殖。完整的潜伏性HTLV-1染色体组的再活化包括HTLV的复制，例如形成HTLV-染色体组的多重转录，适时进行HTLV-1转录，HTLV-1表达，例如病毒特异性蛋白如Tax1的翻译，病毒的装配以及释放感染性HTLV-1颗粒和HTLV-1蛋白。
HTLV-1病毒蛋白如Tax1通过与病毒系统以及宿主系统相互作用发挥其作用。HTLV-1病毒蛋白活性诱导的作用包括但不限制于调节HTLV-1病毒的转录以及改变其它细胞基因(Kwanyee等，自然23:776-778,1988；Tan等，Mol.Cell.Biol.9:1733-1745,1989；和Yoshimura等，EMBO J 9:2537-2542,1990)。Tax1病毒蛋白由HTLV-1感染的细胞通过细胞外分泌(Lindholm等，生物新闻.2:1034-1043,1990)。所分泌的细胞外Tax1可被周围细胞溶解并激活细胞中的转录因子如NF-κB(Smith等，临床研究杂志87:761-766,1991；Arima等，病毒杂志65:6892-6899,1991)。已表明，HTLV-1感染的细胞产生某些转录因子如NF-κB(Lindholm等，J.Virology70:2525-2532,1996)。
感染HTLV-1的人易于发展为成年T细胞白血病(Poiesz等，PNAS77:7415-7419,1980；Hinuma等，PNAS 78:6476-6480,1981)。另外，HTLV-1感染的人可能表现慢性神经变性性疾病如热带强直性下身轻瘫和脊髓病(Gessanin等，Lancet Ⅱ:407-410,1985,Osame等，LancetⅠ:1031-1032,1986)。
尽管不需限制于任何技术解释，但申请人认为PKC影响HTLV-1病毒蛋白活性和病毒复制。病毒蛋白Tax1直接与PKC相互作用并激活PKC(Lindholm等，病毒学杂志70:2525-2532,1996)。已证明，某些PKC抑制剂阻断感染HTLV-1的细胞中Tax1诱导的细胞蛋白如NF-κB的激活(Lindholm等，病毒学杂志70:2525-2532,1996)。也已证明，PKC抑制阻断了适时产生HTLV-1的mRNA，它是有效率地进行病毒复制所需要的(Adchi等，生化及生物物理研究通讯169:469-475,1990)。其它支持PKC在有效地进行HTLV-1复制中作用的证据是，PKC抑制剂减少牛白血病病毒的病毒，所述牛白血病病毒在结构上和生物学上与HTLV-1类似(Jensen等，病毒学杂志66:4427-4433,1992)。因此，本发明所描述的PKC抑制剂化合物可通过抑制病毒蛋白活性，特别是通过抑制病毒复制，在治疗学上治疗HTLV-1感染和与此相关的疾病。
优选地，本发明方法利用那些有效地抑制β同功酶的蛋白激酶C抑制剂。通常，在先有的技术中，将一组适宜的化合物描述为二-吲哚基马来酰亚胺或大环的二-吲哚基马来酰亚胺。在先有技术中公知的二-吲哚基马来酰亚胺包括那些在美国专利5,621,098,5,552,396,5,545,636,5,481,003,5,491,242h 5,057,614中所描述的化合物，将所有这些引入本文供参考。尤其，大环的二-吲哚基马来酰亚胺由式Ⅰ表示。这些化合物及其制备方法在美国专利5,552,396中描述，将其引入本文供参考。将这些化合物以治疗有效量给予人来抑制HTLV-1病毒蛋白活性如Tax 1活性诱导的作用和抑制HTLV-1复制，或治疗HTLV-1感染。也可以将这些化合物作为预防剂给予在可能上述疾病危险中的病人。
在本发明方法中所使用的优选的化合物为式(Ⅰ)化合物或其可药用盐，前体药物或酯
其中W为-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亚烷基、取代的亚烷基、C2-C6亚烷烯、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-杂环-、-杂环-(CH2)mO-、-稠合的双环-、-稠合的二环-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-、或-NHCO-；X和Y独立地为C1-C4亚烷基、取代的亚烷基、或者X、Y、和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1为氢或不超过4个取代或未取代的取代基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、卤代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2为氢、CH3CO-、-NH2或羟基；R3为氢、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5独立地为氢、C1-C4烷基、苯基、苄基或与它们所连接的氮一起形成饱和的或不饱和的5或6元环；AA为氨基酸残基；m独立地为0,1,2，或3；并且n独立地为2,3,4或5。
在本发明中所使用的更优选的化合物由式Ⅰ表示，其中-X-W-Y部分包含4-8个原子，所述原子可以是取代的或未取代的。最优选地，-X-W-Y部分包含6个原子。
其它在本发明中所使用的优选的化合物为那些式Ⅰ化合物，其中R1和R2为氢；并且W为取代的亚烷基、-O-、-S-、-CONH-、-NHCO-或-NR3-。在本发明中所使用的特别优选的化合物为式Ⅰa化合物或其可药用盐，前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4为羟基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5为氢或C1-C4烷基；R6为氢、C1-C4烷基或苄基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。最优选的式Ⅰa化合物为下列化合物或其可药用盐、前体药物或酯，其中Z为CH2；并且R4为-NH2、-NH(CF3)或-N(CH3)2。
其它在本发明方法中所使用的优选的化合物为这样的化合物，其中在式Ⅰ中的W为-O-,Y为取代的亚烷基，并且X为亚烷基。这些优选的化合物为式Ⅰb化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-；R4为-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6独立地为H或C1-C4烷基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。最优选的式Ⅰb化合物为那些化合物，其中p为1；并且R5和R6为甲基。
因为它们含碱性部分，所以，式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物也可以以其可药用酸加成盐的形式存在。通常用于形成该盐的酸包括无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸和磷酸以及有机酸如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、枸橼酸、苯甲酸、乙酸和相关的无机和有机酸。因此，该可药用盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏鳞酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马索酸盐、马来酸盐、2-丁炔-1,4-二酸盐、3-己炔-2,5-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、马尿酸盐、β-羟基丁酸盐、羟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐等。特别地，使用盐酸和甲磺酸盐。
除了可药用盐外，也可以存在其它盐。它们可在化合物的纯化中、在其它盐的制备中、或在化合物或中间体的鉴定和定性中作为中间体。
式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物的可药用盐也可以以各种溶剂化物如与水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯等的溶剂化物的形式存在。也可以制备该溶剂化物的混合物。该溶剂化物的来源可以是结晶的溶剂、在制备或结晶的溶剂中固有的或外来的。
应理解，可以存在式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物的各种立体异构体形式；例如，W可以在取代的亚烷基部分中包含手征性碳原子。通常将化合物制备成外消旋体并且可以方便地以该形式使用。或者，如果需要，可通过常规技术分离或合成两个独立的对映异构体。该外消旋体和独立的对映异构体及其混合物形成本发明方法中所使用的化合物部分。在本发明中所使用的化合物也包括式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物的前体药物。前体药物是通过化学方法修饰并且可在其作用部位通过生物学方法灭活的药物，而且，可通过一种或多种酶或其它体内方法将其降解或修饰成母体生物活性形式。或许，该前体药物具有与母体不同的药动学特性，能够更容易地跨粘膜上皮吸收，具有更好的盐形式或溶解性，和/或改善的系统稳定性(例如血浆半衰期增加)。典型地，该化学修物饰包括1)、可通过酯酶或脂肪酶裂开的酯或酰胺；2)、可通过特异性或非特异性蛋白酶识别的肽；或3)、通过膜选择前体药物形式或修饰的前体药物形式在作用部位蓄积的衍生物；或者上述1-3的任何组合。例如，在H.Bundaard,Design of Prodrug,(1985)中描述了选择和制备适宜的前体药物衍生物的常规方法。
Davis等在美国专利5,057,614中描述了各种二-吲哚-N-马来酰亚胺衍生物的合成并且先前确定的美国专利5,552,396和Faul等在EP申请0 657 411 A1中描述了适用于本发明的优选化合物的合成，所有这些引入本文供参考。
一种在本发明方法中使用的特别优选的蛋白激酶-β抑制剂为上述美国专利5,552,396实施例5g中所描述的化合物((S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2'''-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮盐酸盐)。该化合物是有效的蛋白激酶C抑制剂。与其它激酶相比其选择蛋白激酶C并且是高度同功酶选择性的，即它对β-1和β-2同功酶是选择性的。该化合物的其它盐也应该是有利的，特别是甲磺酸盐。
可通过在非反应性有机溶剂，优选有机溶剂/水混合物，并且最优选水-丙酮中，将式Ⅱ化合物
与甲磺酸反应来制备优选的甲磺酸盐。也可以使用其它溶剂如甲醇、丙酮、乙酸乙酯及其混合物。溶剂与水的比率不重要并且通常通过试剂的溶解性来确定。优选的溶剂与水的比例通常为0.1∶1-100∶1，该比例为溶剂与水的体积比。优选地，该比例为1∶1-20∶1并且最优选5∶1-10∶1。最佳比例依赖于所选择的溶剂并且优选是丙酮，该溶剂与水的比例为9∶1。
尽管其它比例，特别是其中甲磺酸过量的比例是有效的，但该反应通常包括大约等摩尔量的两种试剂。将甲磺酸加到反应中的速度不重要并且可以快速加入(＜5分钟)或用6小时或更长时间加入。该反应在0℃-回流的温度范围内进行。将反应混合物搅拌直至通过X-射线粉末衍射确定完全形成盐，这需要5分钟-12小时。
优选并且容易地将本发明盐制备成结晶形式。当干燥或暴露在20-60％相对湿度中时，可以很容易地将该盐的三水合物转化为一水合物。该盐基本上是显示确定熔点、双折射和X-射线衍射图形的结晶。通常该结晶具有少于10％的非晶形固体并且优选具有少于5％并且最优选少于1％的非晶形固体。
通过过滤或其它本领域已知的分离技术直接从反应混合物中分离甲磺酸盐，产率为50％-100％。如果需要，可使用重结晶或其它本领域已知的纯化技术来进一步纯化该盐。
本领域技术人员将知道，本发明蛋白激酶C抑制剂治疗有效量为足以抑制HTLV-1复制或抑制病毒蛋白活性如Tax1的量。测定HTLV-1复制和病毒蛋白活性如Tax1活性的方法是在本领域技术人员能力内的事情。该量特别依赖于治疗剂中该化合物的浓度和病人的体重而改变。通常，蛋白激酶C抑制剂作为治疗HTLV-1感染的治疗剂给予的量将由主治医师根据疾病的状况确定。作为指导方针，当确定适宜的剂量时，将考虑感染的程度、免疫系统的抵抗力、白细胞的数量、病毒的感染量、病人的体重和年龄。
通常，适宜的剂量为在治疗部位产生的蛋白激酶C抑制剂的浓度在0.5nM-200μM，通常在0.5nM-20μM，并且更常见在大约0.5nM-200nM范围内的剂量。预期，在很多状况下，0.5nM-20nM的血浆浓度应该是足够的。
为了获得这些治疗浓度，可给予需要治疗的病人大约0.001mg/天/kg体重-50.0mg/天/kg体重的蛋白激酶C抑制剂。通常，应该需要不超过大约10.0mg/天/kg体重的蛋白激酶C抑制剂。如上所述，上述剂量可根据具体情况改变。
可在本领域容易获得的几个试验装置中评估本发明化合物的功效。可测定本发明化合物对所培养的T细胞系的生长和存活的作用，其中，所述T细胞系来自患有与HTLV-1感染相关的成年T细胞白血病的病人。也可以测定本发明化合物对感染细胞中HTLV-1病毒复制的作用。也可以测定本发明化合物对病毒蛋白如Tax1激活所培养细胞中细胞转录因子如NF-κB的能力的作用。见Lindholm等，J.Virology70:2525-2532,1996，将其引入本文供参考。预期，对于患有HTLV-1感染和与此相关疾病的病人来说，本发明化合物减弱病毒蛋白如Tax1诱导的作用、减少病毒复制和/或抑制HTLV-1感染的T细胞的生长的能力是有益的临床作用。
优选地，在给药前，将式Ⅰ化合物及其优选的式Ⅰa和Ⅰb化合物配制成制剂。通过已知的方法，利用公知的和容易获得的赋形剂来制备适宜的药用制剂。在本发明方法适用的组合物的制备中，通常，将活性组分与载体混合，或用载体稀释，或包封在可以以胶囊、小药囊、纸和其它容器形式存在的载体中。当载体用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体物质，用作活性组分的载体、赋形剂或介质。因此，该组合物可以以片剂、丸剂、粉剂、锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂(作为固体或在液体介质中)、软的和硬的明胶胶囊剂、栓剂、无菌注射溶液和无菌包装粉剂形式存在，用于口服或局部应用。
一些适宜的载体、赋形剂和稀释剂包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲基和丙基酯、滑石粉、硬脂酸镁和矿物油。另外，制剂中可包括润滑剂、湿润剂、乳化和悬浮剂、防腐剂、甜味剂和调味剂。可以将本发明组合物配制成给药后快速、持续或延迟释放活性组分的制剂。优选地，将本发明组合物配制成单位剂量形式，各剂量包含大约0.05mg-大约3g，通常大约为750mg的活性组分。然而，已知，所给予的治疗剂量将由医生根据相关情况决定，所述情况包括所治疗疾病的严重性、所给予的化合物和给药途径。因此，上述剂量范围不以任何方式限定本发明。术语“单位剂量形式”是指通过物理方法完全分离的单位，它适用于作为人或其它哺乳动物单位剂量，各单位中含预先测定产生所需治疗作用量的活性物质和适宜的药用载体。
除了上述制剂外，大多数制剂可通过口服给予，在本发明方法中所使用的化合物也可以局部给予。局部制剂包括软膏、霜剂和凝胶。
通常，利用(1)油状基质，即含固定油或烃如白凡士林或矿物油的基质，或(2)吸收基质，即含无水物质或可吸收水物质如无水羊毛脂的基质来制备软膏剂。通常，在油状或吸收基质形成后，将活性组分(化合物)加到可获得所需浓度的基质量中。
霜剂是油/水乳剂。它们包括典型地含固定油、烃等如蜡、凡士林、矿物油等的油相(内相)和含水和任何水溶性物质如添加的盐的水相(连续相)。利用乳化剂，例如表面活性剂如十二烷基硫酸钠；亲水胶体如阿拉伯胶样粘土，铝硅酸镁盐等来稳定两相。通常，基于乳化形成时，以获得所需浓度的量加入活性组分(化合物)。
凝胶包含选自油状基质、水或乳剂-悬浮液基质的基质。向基质中加入胶凝剂，该凝胶剂在基质中形成一种新基质来增加其粘度。凝胶剂的实例为羟丙基纤维素、丙烯酸聚合物等。通常，在加入凝胶剂前，将活性组分以所需浓度加到该制剂中。
局部用药制剂中所加入的化合物的量不是重要的；该化合物的浓度应该在一个范围内，该范围足以让准备应用的制剂以释放所需量化合物到达所需治疗部位的量应用到受影响的组织区域。
应用到受影响组织的局部应用制剂的常规量依赖于制剂中化合物的浓度。通常，该制剂将以获得大约1-500μg化合物/cm2受影响组织的量应用于受影响组织。优选地，所应用的化合物的量大约为30-300μg/cm2，更优选大约为50-200μg/cm2，并且最优选大约为60-100μg/cm2。
下列制剂的实例仅用于说明而不以任何方式限定本发明范围。制剂1利用下列组分制备硬明胶胶囊量(mg/胶囊)活性剂 5干燥淀粉200硬脂酸镁10总量215mg将上述组分混合并以460mg的量填充到硬明胶胶囊中。制剂2利用下列组分制备片剂量(mg/胶囊)活性剂 15微晶纤维素 10发烟二氧化硅10硬脂酸 5总量 40mg将上述组分混合并压片，每片重665mg。制剂3如下制备各含60mg活性组分的片剂量(mg/胶囊)活性剂 60mg淀粉45mg微晶纤维素 35mg聚乙烯吡咯烷酮(10％的水溶液) 4mg羧甲基淀粉钠4.5mg硬脂酸镁0.5mg滑石粉 1mg总量 150mg将上述组分、淀粉和纤维素通过45目美国筛并彻底混合。将聚乙烯吡咯烷酮的溶液与所得到的粉剂混合，然后通过14目美国筛。将由此得到的颗粒在50℃下干燥并通过18目美国筛。然后，将预先通过60目美国筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉加到该颗粒中，混合后，将其在在压片机上压片，得到每片重150mg的片剂。
在上述说明书中已经描述了本发明的原理、优选的实施方案和作用方式。然而，本文中要保护的本发明不解释为用于限定所公开的特定形式，因为它们将被看作是用来说明而不是限制。本领域技术人员可进行改变，在不违背本发明精神情况下。
权利要求
1.一种抑制感染细胞中1型T细胞亲淋巴性病毒复制的方法，它包括让所述细胞与病毒复制抑制量蛋白激酶C的β同功酶抑制剂接触。
2.权利要求1方法，其中蛋白激酶C的β同功酶抑制剂为二-吲哚基马来酰亚胺或大环的二-吲哚基马来酰亚胺。
3.权利要求1方法，其中所述抑制剂是同功酶选择性的并且其中同功酶的选择性选自β-1和β-2同功酶。
4.权利要求3方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰ)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中W为-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亚烷基、取代的亚烷基、C2-C6亚烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-杂环-、-杂环-(CH2)mO-、-稠合的二环-、-稠合的二环-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y独立地为C1-C4亚烷基、取代的亚烷基、或者X、Y和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1为氢或不超过4个取代或未取代的取代基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、卤代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2为氢、CH3CO-、-NH2或羟基；R3为氢、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C4-C4烷基)、-SO2-(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5独立地为氢、C1-C4烷基、苯基、苄基或与它们所连接的氮一起形成饱和的或不饱和的5或6元环；AA为氨基酸残基；m独立地为0,1,2，或3；并且n独立地为2,3,4或5。
5.权利要求4方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰa)化合物或其可药用盐，前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4为羟基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5为氢或C1-C4烷基；R6为氢、C1-C4烷基或苄基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。
6.权利要求4方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰb)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-；R4为-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6独立地为H或C1-C4烷基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。
7.权利要求4方法，其中蛋白激酶C抑制剂包含(S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2”-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮或其可药用酸的盐。
8.权利要求7方法，其中可药用酸的盐选自盐酸盐和甲磺酸盐。
9.一种抑制细胞中Tax1病毒蛋白活性作用的方法，它包括让所述细胞与病毒蛋白活性抑制量的蛋白激酶C的β同功酶抑制剂接触。
10.权利要求9方法，其中蛋白激酶C的β同功酶抑制剂为二-吲哚基马来酰亚胺或大环的二-吲哚基马来酰亚胺。
11.权利要求9方法，其中所述抑制剂是同功酶选择性的并且其中同功酶的选择性选自β-1和β-2同功酶。
12.权利要求11方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰ)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中W为-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亚烷基、取代的亚烷基、C2-C6亚烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-杂环-、-杂环-(CH2)mO-、-稠合的二环-、-稠合的二环-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y独立地为C1-C4亚烷基、取代的亚烷基、或者X、Y和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1为氢或不超过4个取代或未取代的取代基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、卤代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2为氢、CH3CO-、-NH2或羟基；R3为氢、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2-(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5独立地为氢、C1-C4烷基、苯基、苄基或与它们所连接的氮一起形成饱和的或不饱和的5或6元环；AA为氨基酸残基；m独立地为0,1,2，或3；并且n独立地为2,3,4或5。
13.权利要求12方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰa)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4为羟基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5为氢或C1-C4烷基；R6为氢、C1-C4烷基或苄基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。
14.权利要求12方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰb)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-；R4为-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6独立地为H或C1-C4烷基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。
15.权利要求12方法，其中所述蛋白激酶C抑制剂包含(S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2'''-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮或其可药用酸的盐。
16.权利要求15方法，其中可药用酸的盐选自盐酸盐和甲磺酸盐。
17.一种治疗感染1型人T细胞亲淋巴性病毒的哺乳动物的方法，它包括给予所述哺乳动物治疗有效量的蛋白激酶C的β同功酶抑制剂。
18.权利要求17方法，其中蛋白激酶C的β同功酶抑制剂为二-吲哚基马来酰亚胺或大环的二-吲哚基马来酰亚胺。
19.权利要求17方法，其中所述抑制剂是同功酶选择性的并且其中同功酶的选择性选自β-1和β-2同功酶。
20.权利要求19方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰ)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中W为-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亚烷基、取代的亚烷基、C2-C6亚烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-杂环-、-杂环-(CH2)mO-、-稠合的二环-、-稠合的二环-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y独立地为C1-C4亚烷基、取代的亚烷基、或者X、Y和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1为氢或不超过4个取代或未取代的取代基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、卤代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2为氢、CH3CO-、-NH2或羟基；R4为氢、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2-(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5独立地为氢、C1-C4烷基、苯基、苄基或与它们所连接的氮一起形成饱和的或不饱和的5或6元环；AA为氨基酸残基；m独立地为0,1,2，或3；并且n独立地为2,3,4或5。
21.权利要求20方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰa)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4为羟基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5为氢或C1-C4烷基；R6为氢、C1-C4烷基或苄基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。
22.权利要求20方法，其中蛋白激酶C抑制剂为式(Ⅰb)化合物或其可药用盐、前体药物或酯
其中Z为-(CH2)p-；R4为-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6独立地为H或C1-C4烷基；p为0,1，或2；并且m独立地为2或3。
23.权利要求20方法，其中所述蛋白激酶C抑制剂包含(S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2'''-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮或其可药用酸的盐。
24.权利要求23方法，其中可药用酸的盐选自盐酸盐和甲磺酸盐。
25.一种治疗与1型人T细胞亲淋巴性病毒感染相关的成年T细胞白血病的方法，它包括给予需要该治疗的所述成年人治疗有效量的蛋白激酶C的β同功酶抑制剂。
26.一种治疗与1型人T细胞病毒感染相关的慢性神经变性性疾病的方法，它包括给予需要该治疗的所述哺乳动物治疗有效量的蛋白激酶C的β同功酶抑制剂。
27.权利要求26方法，其中所述慢性神经变性性疾病选自热带强直性下身轻瘫和脊髓病。
全文摘要
本文公开了利用同功酶选择性PKC抑制剂特别是应用同功酶选择性PKC抑制剂(S)－3,4－[N,N’－1,1’－((2”－乙氧基)－3”’(O)－4”’－(N,N－二甲基氨基)－丁烷)－二－(3,3’－吲哚基)]－1(H)－吡咯－2,5－二酮盐酸盐来治疗1型人T细胞亲淋巴性病毒感染的方法。
文档编号A61K31/407GK1231608SQ97198160
公开日1999年10月13日 申请日期1997年8月28日 优先权日1996年8月30日
发明者M·R·吉劳塞克, D·K·维斯, L·E·斯特拉姆 申请人:伊莱利利公司