专利名称：微波—超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法
技术领域：
本发明涉及微波一超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法，属于从酱油渣中提取大豆异黄酮的方法。
背景技术：
大豆异黄酮是一类存在于豆科植物中的微量活性成分,包含染料木苷、染料木黄酮、黄豆苷和黄豆苷元等12种成分。科学研究表明，大豆异黄酮具有很多重要的生理功能，与人体健康密切相关，除具有抗肿瘤作用外，还对衰老、心血管疾病、骨质疏松症及更年期综合症具有预防和治疗作用。酱油酿造的主要原料是大豆、蚕豆、豆饼或豆柏、豌豆、麸皮、小麦和食盐等，经酿造发酵、抽提酱油后产生大量的废弃的酱油渣。其水分、盐分、脂肪含量高，还含有一定量的蛋白质、纤维、黄酮、磷脂等。目前对其开发利用有限，主要用作饲料或肥料的配料，附加值低，对其有效成分如大豆异黄酮等的提取分离及高值化利用是酱油渣开发利用的一个重要方向。目前，大豆异黄酮的提取方法主要有溶剂萃取法、超临界CO2萃取法、超声辅助提取法、微波辅助提取法。传统溶剂提取法耗时耗能，消耗大量溶剂，经济与环境成本很高。超临界CO2流体萃取与传统溶剂提取法相比，提取率高、能耗低，但对设备要求较高。超声波通过在样品和溶剂之间产生的空穴作用，提高传质速率，具有省时、低温节能、提取率和产品纯度高的优点。微波辅助提·取法主要是利用微波的温度效应及电磁场效应来提高提取效率，与传统提取方法相比，可达到强化与优化传热传质的目的，具有选择性高、提取效率高、操作时间短、重现性好、污染小等优点。

发明内容
本发明的目的是提供一种从酱油渣中提取大豆异黄酮的方法。利用微波和超声波的协同提取作用，充分发挥了两种提取方法的优点，从而进一步提高酱油渣中大豆异黄酮的提取率。本发明所采取的技术方案如下:一种微波一超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法，具体步骤如下:(I)酱油渣粉碎脱脂:将新鲜酱油渣在温度60°C的条件下，恒温干燥至含水低于10%;把烘干的酱油渣，粉碎5min后，过60目筛，得干渣样品；按每克干酱油渣加入5mL石油醚，密封12小时后去除石油醚；剩余部分放通风处自然干燥，得到脱脂后的酱渣。(2)加入乙醇溶液溶解提取酱油渣中的大豆异黄酮，用0.lmol/L盐酸溶液调节pH到4 5之间；所述乙醇溶液的浓度为60%V/V，酱油渣和乙醇溶液的质量体积为1:35 ；(3)微波一超声波协同提取:将溶液放于微波-超声波协同萃取仪中，在超声波常开条件下即600W，设定微波功率500W，间歇萃取IOOs ;得萃取的酱油渣与乙醇的混合液；(4)大豆异黄酮提取液的处理:将萃取之后的酱油渣与乙醇的混合液抽滤，滤液以4000r/min的转速离心IOmin,取上清液；上清液在70°C、50r/min条件下旋转蒸发IOmin,得浓缩液，浓缩液放80°C恒温干燥箱烘干12h，得大豆异黄酮粗品。将本发明所得大豆异黄酮粗品，溶于NaOH溶液，采用分光光度法测其浓度，计算所得酱油渣中大豆异黄酮的提取率为0.652%。与采用超声波提取提取率为0.411%，微波提取所得提取率0.506%，相比较其提取率显著提高。本发明的有益效果是:该工艺集中了微波、超声波两种提取方法的优点，能提高酱油渣中大豆异黄酮的提取率；工艺简单、成本经济，具有广阔的推广应用前景。该方法快速、简便易行，同时克服了超临界CO2流体萃取法对设备要求高的缺点。
具体实施例方式原料由徐州恒顺万通食品酿造有限公司提供。将新鲜酱油渣放在60°C电热恒温干燥箱干燥至含水率低于10%。烘干后的酱油渣放在手提式粉碎机中，粉碎5min，过60目筛，得干渣样品。准确称取2g干酱油渣放入IOOmL烧杯中，加IOmL石油醚，用封口胶封住杯口，浸泡12小时，用移液枪除去石油醚，剩余部分放通风处自然干燥即得脱脂后的酱油渣。精确称取脱脂后的酱油渣2g放入IOOmL小烧杯中，加入70mL浓度为60%的乙醇溶液，用0.lmol/L盐酸溶液调节样品的pH值至4一5之间，将原料倒入250mL萃取瓶中，用微波-超声波协同萃取仪，在超声波常开条件下(600W)，将微波功率调整到500W，间歇萃取IOOs0将样品抽滤，滤液以4000r/min的转速离心lOmin，取上清液。在7(TC、50r/min条件下旋转蒸发lOmin，得浓缩液，浓缩液放80°C恒温干燥箱烘干12h，得大豆异黄酮粗品。

将所得大豆异黄酮粗品，溶于NaOH溶液，采用分光光度法测其浓度，计算所得酱油渣中大豆异黄酮的提取率为0.652%。
权利要求
1.一种微波一超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法，具体步骤如下: (O酱油渣粉碎脱脂:将新鲜酱油渣在温度60°c的条件下，恒温干燥至含水率低于10%;把烘干的酱油渣，粉碎5min后，过60目筛，得干渣样品；按每克干酱油渣加入5mL石油醚，密封12小时后去除石油醚；剩余部分放通风处自然干燥，得到脱脂后的酱渣。
(2)加入乙醇溶液溶解提取酱油渣中的大豆异黄酮，用0.lmol/L盐酸溶液调节pH到4 5之间；所述乙醇溶液的浓度为60%V/V，酱油渣和乙醇溶液的质量体积为1:35 ； (3)微波一超声波协同提取:将溶液放于微波-超声波协同萃取仪中，在超声波常开条件下即600W，设定微波功率500W，间歇萃取IOOs ;得萃取的酱油渣与乙醇的混合液； (4)大豆异黄酮提取液的处理:将萃取之后的酱油渣与乙醇的混合液抽滤，滤液以4000r/min的转速离心IOmin,取上清液；上清液在70°C、50r/min条件下旋转蒸发IOmin,得浓缩液，浓 缩液放80°C恒温干燥箱烘干12h，得含水率低于5%的大豆异黄酮粗品。
全文摘要
本发明公开了一种微波—超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法，属于大豆异黄酮的提取方法。酱油渣经粉碎、石油醚脱脂后，按照135的质量体积比加入60%的乙醇溶液，调节pH值至4-5之间，放于微波-超声波协同萃取仪中，超声波(600W)常开，微波功率500W，间歇萃取100s,提取液经抽滤、离心取上清液。再经浓缩、烘干，得大豆异黄酮粗品。经检测，大豆异黄酮的提取率可达0.652%。此法工艺简单，集中了微波、超声波的省时、节能、提取率高、产品纯度高、重现性高、污染小等优点，具有广阔的推广应用前景。
文档编号A61K36/48GK103223001SQ20131014952
公开日2013年7月31日 申请日期2013年4月25日 优先权日2013年4月25日
发明者王陶, 王明, 李文, 刘全德 申请人:徐州工程学院