专利名称：凝血酶抑制剂的喷雾干燥的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种恒重的凝血酶抑制剂的制备方法，特别是所述抑制剂的喷雾干燥。本发明还涉及凝血酶抑制剂的新盐、含所述盐的药物以及这些盐用于制备具有抗血栓形成的药物的用途。
本发明特别涉及通式I的新盐、其制备方法和用途，其中式I具有以下含义 其中，n是0、1、2，以及其互变体。
优选环己基丙氨酸的R构型和脱氢脯氨酸的S构型。
在WO96/25426(实施例93，第128页)中描述了凝血酶抑制剂I的乙酸盐的制备。在使用乙酸缓冲液操作的RP柱分离活性物质的过程中(参见PCT申请第65页，25/26行)，产物以乙酸盐的形式得到，与其在先来历无关。在贮存过程中，乙酸盐吸湿并形成大量的副产物。
式I定义的化合物可通过用氨水滴定活性物质的酸性溶液得到。在此过程中，活性物质的内铵盐沉淀出来，并可通过过滤或离心并干燥，以纯的方式得到。通式I的氢氯化物可通过向内铵盐中加入化学计算量的HCl而得到。适合的溶剂是水、C1-C6醇、C1-C6醚、C1-C6酯、甲苯、二甲苯、DMF、DMSO、THF。通过过滤或离心分离产物然后干燥。
活性物质易于不可逆地吸附有机溶剂。有机溶剂的残余物对于药物制剂是不利的。从水中分离将是一种有吸引力的方法。这不会产生恒重的产物，因为活性物质是高度吸湿的。吸湿的程度取决于相对空气湿度。
为了测量吸湿率，将干燥的活性物质的试样贮存在干燥器中，其中使用饱和的盐溶液在恒定温度下设定好恒定湿度。通过在几天间隔后称重来测量重量的变化。通过下式测量重量增加。
重量增加＝(吸附后的重量-干重)×100/干重例如，n＝1的真空干燥的活性物质样品的重量增加如表1所示。
表1
其中活性物质从制备经贮存至制药过程均要求在恒定的温度下的工艺过程的建立是非常耗费的。
本发明的一个目的是制备一种易加工的恒重的活性物质。我们已经令人惊奇地发现，对比所有其它的真空干燥技术，通过喷雾干燥活性物质I可得到恒定的残余水分含量，并且因此其可在进一步的操作中保持恒重。
此外由于结晶对生物利用率的影响，得到的无定形形式对制药是特别有意义的。
通过双组分喷嘴将待干燥的活性物质的水溶液雾化。使用并流的气流，优选氮气将分散的液滴干燥为无定形的固体颗粒。通常在旋风分离器中将这些固体颗粒移去。将废气过滤并通入涤气塔中。
待干燥的溶液的浓度在5-40重量％的范围内，优选15-25重量％范围。
气体的入口温度在80-150℃的范围内，优选110-130℃的范围内。
气体的出口温度在30-70℃的范围内，优选50-60℃的范围内。
雾化气体的压力在1.1-10巴的范围内，优选2-5巴。
这种方法制备的产物是致密的，且其易于进行药物加工。
这种方法制备的产物可以在敞开的空气中加工，而其重量不会快速变化。
通式I的喷雾干燥产物在喷雾干燥后的数天后，即使在75％的相对湿度中表现出的重量增加仍小于1％。
通式I的真空干燥和冻干产物在75％的相对湿度中表现出的重量增加大于6％。
此外，比较本发明式I的盐和富马酸盐及乙酸盐的贮存稳定性，令人惊奇地显示，本发明的活性物质比相应的有机酸盐在贮存中更稳定。
表2在开放的容器中于70℃，1巴下贮存。数据为开放容器中基于初始活性物质含量的活性物质含量，以HPLC中的％面积表示。
表3以％面积表示的活性物质HPLC含量，式I中n＝1的活性物质
式I的化合物是凝血酶抑制剂，可用于以下症状-其致病机理直接或非直接基于凝血酶的蛋白分解作用的疾病，-其致病机理基于凝血酶依赖的受体活化和信号转导的疾病，-与体细胞基因表达的刺激[例如通过PAI-1、PDGF(血小板衍生的生长因子)、P-选择蛋白、ICAM-1、组织因子]或抑制(例如平滑肌细胞中的NO合成)有关的疾病，-基于凝血酶的促有丝分裂作用的疾病，-基于上皮细胞(例如血管内皮细胞)的收缩性和渗透性的凝血酶依赖性变化的疾病。
-凝血酶依赖的血栓栓塞现象，例如深度静脉血栓形成、肺栓塞、心肌或大脑梗塞、房颤、旁路闭塞，-播散性血管内凝血(DIC)，-再闭塞和用于缩短与溶栓剂(诸如链激酶、尿激酶、尿激酶原、t-PA、APSAC、从动物的唾液腺中得到的纤维蛋白溶酶原活化剂以及所有这些物质的重组和变异形式)联合用药的再灌注时间，-在PTCA之后早期再闭塞和后期再狭窄的发生，-凝血酶依赖的平滑肌细胞增生，-CNS(例如在阿耳茨海默氏症中)中活性凝血酶的累积，-肿瘤生长，以及预防肿瘤细胞的粘连和转移。
新化合物可特别用于治疗和预防凝血酶依赖性血栓栓塞现象，例如深度静脉血栓形成、肺栓塞、心肌或大脑梗塞和不稳定性心绞痛、也可用于播散性血管内凝血(DIC)。它们还进一步适用于与溶栓剂(诸如链激酶、尿激酶、尿激酶原、t-PA、APSAC、以及其它纤维蛋白溶酶原活化剂)的联合药物治疗，以减少再灌注时间和延长再闭塞时间。
其它优选的用途为预防经皮经腔的冠状血管形成术之后的凝血酶依赖的早期再闭塞和后期再狭窄、预防凝血酶诱导的平滑肌细胞增生、预防CNS(例如在阿耳茨海默氏症中)中活性凝血酶的累积、控制肿瘤并预防导致肿瘤细胞粘连和转移的机理。
新化合物还可用于涂覆人造表面，诸如血液透析膜及其所需的导管体系和管线，以及用于血管外循环的充氧器、斯腾特式印模(Stents)和心脏瓣膜。
新化合物还可用于其致病机理是直接或非直接基于激肽原酶，特别是激肽释放酶的蛋白分解作用的疾病，例如炎性疾病，诸如哮喘、胰腺炎、鼻炎、关节炎、荨麻疹和其它内部的炎性疾病。
本发明的化合物可采用常规方法，通过口服或非经肠(皮下的、静脉内、肌内的、腹膜内、直肠内)给药。也可使用蒸汽或喷雾方式，通过鼻咽腔给药。所述化合物可特别用于口服。
剂量根据病人的年龄、状态和体重，以及根据给药方式而变化。活性物质的每人每日用量通常为口服约10-2000mg，非经肠给药为约1-200mg。该剂量可以以2-4次单独给药或作为缓释形式每日一次给药。
新化合物可以常规的固体或液体药用剂型使用，例如不包或包膜片剂、胶囊、粉末、颗粒、丸剂、栓剂、溶液、软膏、乳膏和喷雾剂。上述剂型可采用常规方法生产。为此活性物质可与常规药物助剂一起加工，所述药物助剂为诸如片剂粘合剂、填充剂、防腐剂、片剂崩解剂、流动调节剂、增塑剂、湿润剂、分散剂、乳化剂、溶剂、缓释剂、抗氧化剂和/或推进气体(参见H.Sucker等Pharmazeutische Technologie，Thieme-Verlag，Stuttgart，1978)。上述方法得到的给药剂型通常含有0.1-99重量％的活性物质。
实施例实施例1N-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺(内铵盐)将90g(0.116摩尔)化合物N-Boc-N-((叔丁氧基羰基)亚甲基-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺-N-乙酰基-(S)-半胱氨酸盐(WO98/09950的实施例3所述)、360g水和44.56g(浓度38％，0.464摩尔)盐酸在65℃下加热2小时。冷却至室温后用乙酸乙酯萃取一次，分离相并用25％氨水溶液105g调节pH值为8.2。产物沉淀出来。随后搅拌1小时、抽滤、冰水洗涤然后在真空烘箱中干燥。得到无色固体形式的N-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺41.66g(0.091摩尔，79％)。
实施例2N-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺盐酸盐将溶于100kg水的29.4KgN-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺(纯度88％，57摩尔)与5.45Kg(浓度38％，57摩尔)盐酸混合，通过过滤澄清并喷雾干燥。得到无色粉末状的27.1kgN-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺盐酸盐(纯度93％，51摩尔，89％)。
实施例3N-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺二盐酸盐将3.2g(6.1毫摩尔)N-((羟基羰基)亚甲基)-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺盐酸盐加入40ml水中，且在加入1M盐酸6.1g之后，将溶液冷冻干燥。得到无色粉末状的3.25g N-((羟基羰基)亚甲基-(R)-环己基丙氨酰-(S)-3，4-脱氢脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺二盐酸盐(6.1毫摩尔，100％)。
权利要求
1.恒重的式I凝血酶抑制剂及其互变体的制备方法 其中，n是0、1、2，其中，喷雾干燥活性物质的水溶液。
2.权利要求1的方法，其中待干燥的溶液的浓度在5-40重量％的范围内。
3.权利要求1或2中的方法，其中气体入口温度在30-70℃的范围内。
4.式I的化合物及其互变体和立体异构体， 其中，n是0、1、2。
5.无定形形式的权利要求4的化合物。
6.一种药物，除了含有常规的载体和助剂之外，还含有权利要求4或5的式I化合物。
7.权利要求4或5的式I化合物用于制备治疗或预防以下疾病的药物的用途·其致病机理直接或非直接基于凝血酶的蛋白分解作用的疾病，·其致病机理基于凝血酶依赖的受体活化和信号转导的疾病，·与体细胞基因表达的刺激或抑制有关的疾病，·基于凝血酶的促有丝分裂作用的疾病，·基于上皮细胞的凝血酶依赖的收缩性和渗透性的变化的疾病。·凝血酶依赖的血栓栓塞现象，·播散性血管内凝血，·再闭塞和用于缩短与溶栓剂联合用药的再灌注时间，·在PTCA之后早期再闭塞和后期再狭窄的发生，·凝血酶依赖的平滑肌细胞增生，·CNS中活性凝血酶的累积，·肿瘤生长，以及预防肿瘤细胞的粘连和转移。
8.用于涂覆表面的权利要求4或5中的式I化合物。
全文摘要
本发明涉及恒重的式I凝血酶抑制剂及其互变体的制备方法,其中,n是0、1、2,其中,喷雾干燥活性物质的水溶液。
文档编号A61P35/00GK1350545SQ00807276
公开日2002年5月22日 申请日期2000年5月3日 优先权日1999年5月10日
发明者B·沙菲尔, G·哈姆斯, H·阿舍尔, G·A·克雷 申请人:巴斯福股份公司