专利名称：一组由阿司匹林与雌激素组成的防治骨质疏松症的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用阿司匹林与雌激素组成的药物组合物，该药物组合物制备的复方制剂，对妇女绝经期后骨质疏松具有较好的预防及治疗作用。
背景技术：
绝经期后骨质疏松属原发性骨质疏松症的其中一种。原发性骨质疏松症是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征，导致骨骼脆性增加和易发生骨折的全身性疾病，可分为绝经后骨质疏松和老年性骨质疏松两型。绝经期后骨质疏松是60岁以上妇女的常见病，多发病，主要是由于雌激素缺乏所致，常发生于绝经后数年内的女性，其中多数患者的骨转换率增高，旧骨大量迅速丢失，新骨形成加快，骨的新旧转换速率加速，但由于骨丢失超过了骨形成，骨量以丢失为主，形成了骨质疏松，故该型的骨质疏松也称为高转换型骨质疏松。妇女在妊娠和哺乳期，对钙磷的需要量较正常妇女增加一倍，如得不到合理的补充，就容易骨量减少或骨质疏松，一般妇女到35岁时骨骼的质量通常达到顶点，从这时起， 骨的重建过程仍继续进行，但质量开始减少。到围绝经期头3 5年间最迅速，以后丢失速度逐渐减慢，但持续进行，流行病学研究表明，50 69岁女性的骨质疏松症的发病率高于 50%，这段期间刚好是绝经后的5 10年，妇女的雌激素水平明显降低，这与骨质疏松的发生率密切相关；80岁以上的老年妇女骨密度更低，有随时发生骨折的危险。老龄是骨折的重要危险因子，85岁组发生前臂、肱骨、椎体和髋部骨折的可能性为45岁组妇女的8倍，在男性为5倍。绝经期后老年妇女骨代谢的机制主要是由于骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化受抑，成骨细胞分裂增殖缓慢及骨形成因子合成代谢受阻，由破骨细胞介导的成骨过程受到抑制、成骨细胞活性衰退致骨形成期延长，骨形成率降低；同时破骨细胞分化、成熟和骨吸收活性却仍相对处活跃状态，骨吸收能力超过了骨形成，骨转换率增加但骨丢失也增加，所以导致骨质疏松的发生。此外，随着年龄的增加活性氧簇水平增加，抗氧化能力减低， 谷胱甘肽还原酶的水平下降，使成骨细胞及骨细胞的凋亡增加，加速了骨丢失，因此氧化应激可能是老年性骨质疏松发生的重要原因。自然绝经或卵巢切除后绝经均可导致骨量丢失，后者发展更快，小梁骨丢失更为明显，说明了雌激素与骨质疏松症有密切的关系，绝经期由于卵巢功能衰退，雌激素分泌减少。雌激素具有抗骨吸收作用，是维持骨矿含量的关键激素，其机制主要与雌激素对骨生成的直接作用及对抗甲状旁腺的骨吸收作用有关；目前认为，雌激素抗骨吸收可能与其抑制成骨细胞凋亡和促进破骨细胞凋亡的作用有关。雌激素减少一直被认为是绝经期后骨质疏松症发生的重要原因，雌激素能增强成骨型细胞的表达并减少诱导骨吸收的环磷酸腺苷形成，还能与特异的DNA结合，促进特异mRNA合成。通过对绝经后骨质疏松症妇女应用大剂量雌二醇治疗进行的临床观察，证明了较大剂量的雌激素可有效的增加骨密度，促进骨的再矿化，有利于骨质疏松症的治疗。雌激素影响骨代谢的作用机制主要是通过钙调节激素(甲状旁腺激素、1，25双羟维生素D3、降钙素)而实现的。采用放射配基分析等方法在人和大鼠的成骨细胞、人初级成骨细胞、儿童骨膜分离的破骨细胞上发现雌激素受体，提示雌激素可能直接作用于骨细胞上的雌激素直接作用于成骨细胞和破骨细胞，通过各种细胞因子(白细胞介素-6等)抑制破骨细胞骨吸收作用。绝经后妇女血胰岛素、IGF-I和瘦素水平与骨密度均无直接关系。雌激素替代疗法是指给绝经后妇女补充适量雌激素，以缓解雌激素缺乏造成的绝经后症状的一种疗法。雌激素与孕激素合用称为激素替代疗法，加用孕激素的目的是为防止子宫内膜增生。雌激素替代疗法和激素替代疗法是目前已知疗效最为确切的抗骨吸收疗法。雌激素及雌激素类似物刺激成骨细胞的增殖和胶原合成，抑制成骨细胞分泌骨吸收刺激因子，从而降低骨转换，抑制骨吸收。并可促进活性维生素D3生成；降低破骨细胞对甲状旁腺素的敏感性，减少骨吸收；促进降钙素的合成。研究结果表明雌激素可防止80% 90 %的绝经后妇女的骨丢失，保持骨量，预防骨质疏松。然而随着应用病例的增多，雌激素替代疗法的副作用逐渐暴露，长期单独服用雌激素可使乳腺癌、子宫内膜癌发生率增加5 至7倍，使脑卒中和心脏病的发病率提高了 40%和四％，并使下肢和肺部发生血管栓塞的概率增加了 1倍。阿司匹林是常用的解热镇痛药，具有抗血小板和抗炎的双重效应，其通过抗血小板能显著降低冠心病患者心血管事件发生率己得到大量大规模临床试验的证实，本项目组近年的研究已证实该药还有预防骨质疏松的作用，并据此设计了小剂量阿司匹林和小剂量己烯雌酚组成复方制剂(简称A-D合剂)，希望通过添加阿司匹林以减少雌激素的用量，在增加抗骨质疏松的同时，也能减少雌激素的血栓形成等心血管意外。发明内容本发明提出用具有抗血小板和抗炎的双重效应的阿司匹林与雌激素联合应用防治“骨质疏松症”研究的理论和思路，我们发现阿司匹林与雌激素组成的方制剂，可以减少雌激素的临床用量，在抗骨质疏松疗效方面有协同作用，己烯雌酚与阿司匹林组方时，阿司匹林片用临床预防心血管意外的剂量IOOmg即可，己烯雌酚可用临床剂量的三分之一到十分之一的剂量即可，由于阿司匹林IOOmg剂量在临床通过抗血小板能显著降低冠心病患者心血管事件发生率己得到大量大规模临床试验的证实，其减少雌激素替代疗法导致的脑卒中，心脏病的发病率，下肢和肺部发生血管栓塞的概率必有明显的作用，该复方与单用雌激素相比，还具有不抑制骨形成的优点，是理想的抗骨质疏松药物。本发明提出用雌激素是指己烯雌酚，雌酮，戊酸雌二醇，尼尔雌醇，替勃龙，普瑞马林等，这些药物与阿司匹林组成复方制剂可用其临床常用剂量的二分之一到十分之一，其最佳的剂量是三分之一到五分之一，阿司匹林组成该复方的剂量为50mg到200mg，其最佳配方是lOOmg。本发明提出阿司匹林与雌激素组成的防治骨质疏松症的药物组合物，主要是指阿司匹林片和己烯雌酚组成的组合物，阿司匹林与己烯雌酚的组成比例为1000 1 2，即阿司匹林在该复合物中按重量计算为100毫克时，己烯雌酚在该复合物中按重量计算为 0. 1 0. 2毫克。这种药物组合物可按药剂学的工艺添加片剂生产的必要的辅料，压制成片剂，供临床应用，也可按现代工艺制备成丸剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的药物制剂，供临床应。本发明提出用阿司匹林与己烯雌酚组成的组合物，制备成片剂时，每片含阿司匹林100毫克，己烯雌酚0. 1 0. 2毫克。临床应用时每天1 2片。
具体实施例方式实施例一为证实小剂量阿司匹林和小剂量己烯雌酚组成复方制剂(简称A-D合剂)，具有抗骨质疏松作用，本实验以大鼠去卵巢建立骨质疏松模型，通过血液生化、骨形态计量学、骨密度等研究方法，观察该复方制剂是否可对去卵巢大鼠骨质疏松有增效作用并减少不良反应，现报告如下1材料和方法1.1 材料1. 1. 1实验动物及分组选用4月龄SPF级雌性SD大鼠42只(广东医学院实验动物中心提供)，体重OM±20)g。适应性喂养10d。于实验开始前随机挑选出6只作为基础组(BAS)，于实验前进行取材。其余36只大鼠随机分为假手术组(SHAM)，去卵巢组(OVX)、 己烯雌酚组(0VX+D)、阿司匹林己烯雌酚复方组(0VX+A-D)，每组9只。所有动物自由摄水及摄食(标准饲料，含钙1.33%，磷0. 95% )，在室温25 ^°C，湿度75 80%清洁级环境中喂养。1. 1. 2药物己烯雌酚片，合肥久联制药有限公司，每片0. 5mg ；阿司匹林己烯雌酚复方制剂(A-D合剂)每片含阿司匹林lOOmg，己烯雌酚0. Img0 (由广东医学院医药科技开发中心配制)；盐酸四环素，美国Sigma Chemical Co ;Calcein，美国Sigma Chemical Co。1.1. 3仪器美国Buehler LTD慢速锯；德国Leica2155硬组织切片机；德国 Leica碳化钨钢刀；日本Nikon自动化图像数字分析仪；美国OsteoMetrics骨组织形态计量学软件；美国 Norland 公司 p-DEXA Sabre scanner。1· 2 方法1. 2. 1动物处理在动物全身麻醉条件下，参照文献方法[5]对各实验组大鼠作双侧去卵巢手术，假手术组做同样手术，但不去除卵巢。术后三天开始随机分组，每组9只。正式实验假手术组以生理盐水5ml · kg—1 · Cf1灌胃，己烯雌酚组以己烯雌酚30 μ g · kg—1 · Cf1 灌胃，A-D合剂按阿司匹林IOmg · kg-1 · Cf1和己烯雌酚IOyg. kg-1 · 1灌胃，各组大鼠均连续灌胃给药90d。动物每周称重一次，按照体重变化调整给药剂量。所有动物在处死前14、 13天和4、3天分别皮下注射四环素30mg · kg—1 ·和钙黄绿素IOmg · kg—1 ·进行体内荧光标记。实验结束时，大鼠麻醉后心脏抽血处死，取血液做生化指标测定，并取左胫骨做骨组织形态计量学研究，取左股骨做骨密度扫描。。1.2.3血液生化检测血液生化指标如总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和碱性磷酸酶(ALP)均通过试剂盒进行检测，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。上述所有操作均按照试剂盒说明书要求进行。1. 2. 2骨组织形态计量取左侧胫骨，以慢速锯暴露骨髓腔，取其上段以10%福尔马林缓冲液固定Mh、随后进行梯度酒精脱水，二甲苯透明以甲基丙烯酸甲酯进行不脱钙骨包埋。包埋剂硬化后以石膏打磨机打磨成合适的形状，随后用Leica 2155型硬组织切片机切成9 μ m厚片和5 μ m薄片。9 μ m厚片直接封片测量动态参数；5 μ m薄片行硝酸银染色，封片后测量静态参数，运用公式te’7]计算有关参数。为避开初级海绵体，胫骨上段测量范围为生长板远端Imm 4mm之间的松质骨区域。静态测量参数包括骨组织总面积(T. Ar)、骨小梁面积(Tb. Ar)、骨小梁周长(Tb. Pm)、破骨细胞个数(N. Oc)、破骨细胞贴壁长度(Oc.S)。动态测量参数包括单荧光周长(sL.Pm)、 双荧光周长(dL. Pm)、双标记间隙(Ir. L. Wi)。参照相关公式，可以计算出计算参数骨小梁面积百分数(％Tb.Ar)降低、骨小梁厚度(Tb. Th)、骨小梁数目(Tb. N)、骨小梁分离度(Tb. Sp)、每毫米破骨细胞数目(0c. N)、破骨细胞周长百分数(％ Oc. Pm)、标记周长百分数(％ L. Pm)、骨矿化形成率(MAR)、骨形成率(BFR/BV)、骨形成率(BFR/BS)、骨形成率(BFR/TV)。1. 2. 4骨密度检测采用美国Norland公司p_DEXA Sabre扫描仪对左股骨整体进行骨密度扫描，扫描参数包括骨组织面积(Bone Area)、骨矿含量(BMC)，骨密度BMD按照以下公式计算BMD = BMC/Bone Area。1. 3统计计量资料用均数士标准差(S ± S )表示，采用SPSS16. 0软件行ANOVA 方差分析并以LSD-t检验进行组间比较，P < 0. 05可认为具有统计学意义。2 结果2. 1己烯雌酚与A-D合剂对去卵巢大鼠体重和子宫重量变化的影响己烯雌酚与A-D合剂对去卵巢大鼠体重和子宫重量变化的影响见表1 表1 己烯雌酚与A-D合剂对去卵巢大鼠体重和子宫重量变化的影响(^±>0
权利要求
1.一组防治骨质疏松症的药物组合物，其特征是阿司匹林与雌激素两种药物配伍，加上药剂学方面的辅料，可制成供临床应用片剂，胶囊剂，颗粒剂，冲剂，口服液，外用制剂，注射剂。
2.如权利要求1所述的防治骨质疏松症的药物组合物，其特征是雌激素是指己烯雌酚，雌酮，戊酸雌二醇，尼尔雌醇，替勃龙，普瑞马林。
3.如权力要求2所述的防治骨质疏松症的药物组合物，其特征是这些雌激素是以其临床应用剂量的二分之一到十分之一与阿司匹林组合。
4.如权利要求1所述的防治骨质疏松症的药物组合物，其特征是该药物组合物是由阿司匹林与己烯雌酚组成。
5.如权利要求1和4所述的防治骨质疏松症的药物组合物，其特征是阿司匹林与己烯雌酚的组成比例为1000 2000 1，即阿司匹林在该复合物中按重量计算为100 200毫克时，己烯雌酚在该复合物中按重量计算为0. 1 0. 2毫克。
6.如权利要求1和4所述的防治骨质疏松症的药物组合物，其特征是阿司匹林与己烯雌酚的组成比例为1000 1 2，即阿司匹林在该复合物中按重量计算为100毫克时，己烯雌酚在该复合物中按重量计算为0. 1 0. 2毫克。
全文摘要
本发明公开了一种由阿司匹林与雌激素组成的用于预防及治疗骨质疏松的药物组合物及其配方，设计了用具有抗血小板和抗炎的双重效应的阿司匹林与临床剂量的三分之一到十分之一的剂量雌激素的药物组合物，并证明了该组合物有明显的抗骨质疏松作用。由于阿司匹林100mg剂量在临床通过抗血小板能显著降低冠心病患者心血管事件发生率己得到临床证实，其减少在骨质疏松患者中应用雌激素替代疗法导致的脑卒中，心脏病的发病率，下肢和肺部发生血管栓塞的概率将有明显的作用，该复方与单用雌激素相比，还具有不抑制骨形成的优点，是理想的抗骨质疏松的新药物。
文档编号A61P19/10GK102397550SQ20111026982
公开日2012年4月4日 申请日期2011年8月30日 优先权日2011年8月30日
发明者吴玲芝, 吴铁, 崔燎, 林思恩, 黄健萍 申请人:广东医学院, 湛江广医医药科技开发有限公司