专利名称：化合物茯苓酸作为制备药物的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及化合物茯苓酸(3β乙酰氧基16α羟基羊毛甾8，24(31)二烯21酸)的用途，尤其涉及在制药领域中的用途。

背景技术：
化合物茯苓酸的结构式为
该化合物的分子式为C33H52O5，白色针状结晶，分子量528，该化合物可由中药白茯苓中提取制备，目前尚无其该单一化合物在制药中的应用。


发明内容
本发明的目的在于提供化合物茯苓酸的新用途，即在制药中的新应用。
实际上，本项目涉及化合物茯苓酸作为制备治疗或预防移植后排斥反应的药的应用。
涉及化合物茯苓酸在制备治疗或预防外周血淋巴细胞凋亡的药中的应用。
涉及化合物茯苓酸在制备治疗或预防外周血CD4+和CD8+淋巴细胞数量百分比异常的药中的应用。
为了更好的理解本发明的实质，下面用化合物茯苓酸与橄榄油的混合物的药理实验及结果来说明其在制药领域中的新用途，橄榄油仅仅作为载体，无实质的药理作用，实验中用使用相同的橄榄油的对照组进行对比。
采用中药白茯苓粉末150kg，乙醚冷浸三次，每次48小时，过滤，取冷浸液，减压回收乙醚后得淡黄色浸膏(150g)，经Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1-20∶1)处理，得Fr.1、Fr.2、Fr.3(20g)、Fr.4和Fr.5，五种物质，取Fr.3(20g)再次予以Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1)处理，得Fr.3.1、Fr.3.2(15g)和Fr.3.3三种物质，取Fr.3.2(15g)予以ODS C.C.MeOH∶H2O(85∶15)处理，得Fr.3.2.1、Fr.3.2.2、Fr.3.2.3(8g)Fr.3.2.4和Fr.3.2.5五种物质，取Fr.3.2.3(8g)甲醇反复重结晶，化合物茯苓酸-白色结晶(1500mg)。消毒后与橄榄油混合成1mg/ml和10mg/ml两种浓度备用。
1.毒性试验 口服给药健康雄性SD大鼠，体重250-300克，清洁级，视给药剂量选用1mg/ml或10mg/ml两种浓度的茯苓酸橄榄油混合物予以0.5mg/kg，1.0mg/kg，2.0mg/kg，10.0mg/kg剂量分组，对照组采用相同体积的橄榄油，每组10只，予以灌胃治疗，每日一次，观察七天无一只死亡。
2.用常规药理试验观察了茯苓酸橄榄油溶液灌胃对大鼠外周血淋巴细胞线粒体膜电位的改变，外周血淋巴细胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴细胞和CD8+淋巴细胞数量百分比变化。试验结果证明，在1.0mg/kg和10mg/kg上述灌胃剂量条件下，茯苓酸可以有效降低外周血淋巴细胞凋亡百分比。小剂量茯苓酸(0.5m/kg，1.0mg/kg，2.0mg/kg)条件下，可以有效提高CD4+淋巴细胞数量百分比，在大剂量(10mg/kg)条件下，对CD4+淋巴细胞数量百分比调节不显著。对各剂量茯苓酸均可有效提高CD8+淋巴细胞数量百分比。
上述结果说明，茯苓酸在一般情况下，可以有效降低外周血淋巴细胞凋亡；同时可以通过调整剂量，达到调节CD4+淋巴细胞和CD8+淋巴细胞数量百分比的目的。
3.茯苓酸抑制器官移植后排斥反应的研究试验采用以Wister大鼠为供体，SD大鼠为受体，建立改良的Ono心脏移植模型，给模型予以10mg/kg的茯苓酸每日一次灌胃治疗。通过对模型的供体心脏病理检查、外周血淋巴细胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴细胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴细胞和CD8+淋巴细胞数量百分比进行研究。结果表明在接受移植物的机体免疫状态较为极端的条件下，一定剂量的茯苓酸(10mg/kg)可以有效发挥抗移植排斥反应的作用，保护移植的心脏，同时保护外周血淋巴细胞减少其凋亡百分比，稳定外周血CD8+淋巴细胞数量百分比，避免其异常增高，而且该特点具有相对特异性，即茯苓酸对外周血CD4+淋巴细胞数量百分比仍未见明显调节作用。
从以上结果，可以得出本发明优点在于 (1).本发明对已知化合物茯苓酸(3β乙酰氧基16α羟基羊毛甾8，24(31)二烯21酸)发掘了新的医药用途，开拓了一个新的应用领域。
(2).本发明的茯苓酸提取自天然药物，安全无毒，药理作用强，预示着很好的药理作用前景。
(3).本发明的产品配制成的药物具有显著的抗排斥反应的药理学作用。
(4).本发明的产品配制成的药物具有显著的降低接受移植的受体的外周血淋巴细胞凋亡的作用。
(5).本发明的产品配制成的药物在一定条件和剂量下，具有特异性调节接受移植的受体的外周血CD8+淋巴细胞的药理学作用。
(6).本发明的产品配制成的药物在一定条件和剂量下，具有显著调节CD4+和CD8+淋巴细胞数量百分比的作用。

具体实施例方式 下面描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此。
实施例1 采用中药白茯苓粉末150kg，乙醚冷浸三次，每次48小时，过滤，取冷浸液，减压回收乙醚后得淡黄色浸膏(150g)，经Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1-20∶1)处理，得Fr.1、Fr.2、Fr.3(20g)、Fr.4和Fr.5，五种物质，取Fr.3(20g)再次予以Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1)处理，得Fr.3.1、Fr.3.2(15g)和Fr.3.3三种物质，取Fr.3.2(15g)予以ODS C.C.MeOH∶H2O(85∶15)处理，得Fr.3.2.1、Fr.3.2.2、Fr.3.2.3(8g)Fr.3.2.4和Fr.3.2.5五种物质，取Fr.3.2.3(8g)甲醇反复重结晶，化合物茯苓酸-白色结晶(1500mg)。与橄榄油混合成100mg/ml浓度混合物，消毒，密封后制成产品。
实施例2 用实施例1所得的化合物茯苓酸-白色结晶与橄榄油混合成10mg/ml浓度混合物，消毒，密封后制成产品。
实施例3 用实施例1所得的化合物茯苓酸-白色结晶200mg按照已知的方法制成胶囊剂成为产品。
权利要求
1.化合物茯苓酸在制备治疗或预防移植排斥反应的药中的应用。
2.化合物茯苓酸在制备治疗或预防外周血淋巴细胞凋亡的药中的应用。
3.化合物茯苓酸在制备稳定外周血CD8+淋巴细胞数量百分比的药中的应用。
4.化合物茯苓酸在制备调节外周血CD4+淋巴细胞数量百分比的药中的应用。
全文摘要
本发明涉及化合物茯苓酸在制药领域中的用途，该产品具有降低移植手术后受体对移植物的排斥反应，保护受体外周血淋巴细胞线粒体膜电位稳定，减少外周血淋巴细胞凋亡百分比，稳定外周血CD8+淋巴细胞数量百分比等功能，在非移植条件下，降低外周血淋巴细胞凋亡百分比，调节CD4+和CD8+淋巴细胞数量百分比等功能，用于治疗在动物和人类器官、组织、细胞等移植时降低移植物排斥反应，调节、稳定机体的淋巴细胞数量、比例和功能。
文档编号A61P7/00GK101301295SQ200710144479
公开日2008年11月12日 申请日期2007年10月23日 优先权日2007年10月23日
发明者刘宏宇, 张学峰, 帆 张 申请人:刘宏宇, 张学峰, 帆 张