专利名称：一种氨基多糖-阿司匹林复合物纳米微粒的制备方法
技术领域：
本发明属于新药研发领域一种氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒的 制备方法
背景技术：
急性心肌梗塞(AMI)与血栓栓塞性疾病的发病率与死亡率均甚高，研 究防治此类疾病的药物为世人所瞩目.自20世纪60年代发现阿司匹林(Aspirin, Asp) 具显著的抗血小板聚集作用，70年代即用于AMI的治疗和预防，循证医学研究证明阿司匹 林是预防和治疗卒中、心绞痛、心梗、老年性痴呆、偏头痛等疾病的有效药物，其可减少心、 脑及外周血管等血栓和栓塞事件达25%，然而口服Asp普通片剂，药物在胃内迅速释放， 局部浓度过高，对胃肠道粘膜有剌激作用，尤其对于需要长期服药的病人顺应性较差，临床 常用的肠溶片能够减轻胃粘膜损伤，但不降低消化道出血发生率，从而严重妨碍了 Asp的 更为广泛应用.此外，近年许多实验研究发现，有的患者尽管服用常规剂量甚至较大剂量 的阿司匹林，但仍不能完全抑制血栓素的生成和血小板聚集，尤其对有症状动脉血栓患者 中，阿司匹林不能阻止至少75%的严重血管事件发生，即产生称为阿司匹林抵抗(aspirin resistance, AR)或阿司匹林失败(aspirin failire)现象，为此，国内外尝试了大量的研 究工作，旨在改善阿司匹林的性质，尤其近年来这方面的研究报道较多，其研究基本点集中 于Asp在传统缓释材料下的释放特性研究或是将阿司匹林和小分子物质成盐、酯，但大多 仅限于体外研究，临床数据不充分，实际应用效果尚无定论.对于AR的对策有文献报道加 大阿司匹林剂量可以减少部分AR的发生，但由于继发的出血和胃肠道反应，常导致治疗中 止.晚近又将氯吡格雷与阿司匹林合用，至于疗效如何也有争议.因此，迄今采取何种措施 提高阿司匹林的临床疗效、降低不良反应、扩大其应用范围，克服AR现象仍是医药界研究 的热点之一. 已有证据表明AR的发生与阿司匹林生物利用度，血小板功能，受体基因多态性等 多环节因素变化有关，由于全球有大量的患者依赖阿司匹林的抗血小板治疗，所以关于阿 司匹林抵抗的研究已经引起广泛关注，其应对措施除采用加大药物剂量或两种抗血小板药 联合应用外，尽快开发新型阿司匹林替代药物是预防和治疗AR心血管病患者的更好选择.
氨基多糖(chitosan， Chi)是从昆虫、甲壳类动物骨骼和真菌细胞壁及一些绿藻 中提取的甲壳质脱乙酰基衍生物，化学结构为氨基葡萄糖聚合物，由于其来源丰富、对人体 无毒、优良的生物相溶性和可降解性等优点，倍受世界各国药学研究人员的瞩目.以糖及 其衍生物为基团对先导化合物进行化学修饰可以提高药效，降低毒副作用，并与前体药物 发挥协同抗病作用已得到国内外学者的认同.本发明采用新方法研究制备了氨基多糖-阿 司匹林复合物纳米微粒，经查新证明国内外无类同报告，该研究对于提高AR心血管疾病防 治效果、降低不良反应并为开发理想的新型阿司匹林替代药物提供了新的制造技术，具有 巨大的社会效益及经济效益.

发明内容
该发明的目的是提供一种以氨基多糖衍生物为主要载体辅料制备氨基 多糖_阿司匹林复合物纳米微粒的方法，以弥补已有技术的不足. 本发明采用氨基多糖(chitosan)衍生物和阿司匹林为原料，其具体方法是先将 氨基多糖衍生物溶解，在搅拌条件下将氨基多糖衍生物溶液和阿司匹林原料药混合后，倾入到分散相溶液中，并向其中加入乳化剂、交联剂等溶液，通过控制反应温度、体系酸碱度、 搅拌速度和固化时间，即得到氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒、溶剂和乳化剂的混合 液，最后将其分离，干燥得到本发明的固体产品. 本发明具有操作方便，制备技术工艺简便稳定和制造成本低廉等优点.本发明对 原材料有广泛的适用性，所有具有游离氨基的甲克质衍生物均可以适用.因此，本发明的 原料来源十分广泛.本发明的重要意义还在于复合物纳米微粒制备中采用了复合交联的 方法，结果使微粒更加致密、性能更加稳定.本发明采用的材料安全无毒副作用、具有良好 的生物相容性、生物可降解性、成膜性能好等特点.本发明有望开发一类治疗和预防AR心 血管疾病的理想药物，具有良好的研究和开发应用前景.因此，该发明技术具有很好经济 开发潜力.
具体实施例方式本发明采用氨基多糖(chitosan)衍生物为原料，先溶解得到氨 基多糖衍生物的溶液，氨基多糖衍生物溶液的浓度是4% _12%，可使用脱乙酰度范围是 50% _98%，分子量为20， 000Da-2， 000， OODa的氨基多糖及其衍生物，阿司匹林的添加量是 氨基多糖的0. 1-6倍，在搅拌条件下将氨基多糖衍生物溶液和阿司匹林原料药混合，倾入 到有机分散相中，混合液体积可以是有机分散相的1/6-1/24，向其中加入乳化剂及控制搅 拌速度、温度、体系酸碱度和搅拌时间，即得到氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒、溶剂 和乳剂的混合液，最后将其分离、干燥得到固体产品氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒.
氨基多糖-阿司匹林复合物纳米微粒溶液的酸碱度可以是pH l-12，搅拌速度可 以是1000-10000rpm，为了降低微粒粒径搅拌速度可以是8000-20000rpm，搅拌时间可以是 0. 5-10小时，反应温度可以是5-6(TC，为了加速微粒固化，固化温度可以降低到6-10°C .
考虑到阿司匹林水中易水解，复合物纳米微粒制剂易于出现药物突释现象，采用 化学交联剂如30%戊二醛与5%三聚磷酸钠联合应用使微粒固化，交联剂也可以是甲醛、 谷氨酸钠、硫酸钠其中的二者，交联度可以是1 : 3-1 : 5;所使用的调节pH的试剂可以 是10%碳酸氢铵，也可以是氢氧化钠、氨水、氢氧化钾，盐酸，醋酸；所使用的分散相可以是 甲苯，也可以是石蜡油、蓖麻油、精制豆油；所使用的乳化剂可以是吐温80，也可以是司盘、 十二烷基硫酸钠. 过滤或离心方式得到的氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒通过20-45 t:干燥便 得到微粒制品. 本发明的氨基多糖衍生物可以包括部分脱乙酰基几丁质、全部脱乙酰基几丁质 (即氨基多糖)、羧甲基氨基多糖、羟乙基氨基多糖、羟丙基氨基多糖、氨基多糖季氨盐、聚 乙烯醇接枝氨基多糖等.
具体实施方式
举例
实施例1 将阿司匹林加入到聚乙烯醇接枝氨基多糖溶液中混合均匀后，在搅拌条件下滴入 到含有吐温的5(TC精制豆油中，以7000r/min高速搅拌3h，然后在4(TC超声乳化40min，待 温度下降至3(TC，倾入乙醚中并立即加甲醛与谷氨酸钠组成的复合交联剂固化，减压过滤 乙醚洗涤，挥去精制豆油和乙醚，室温下干燥，即得深黄色氨基多糖_阿司匹林复合物纳米 微粒. 实施例2
将阿司匹林加入到氨基多糖溶液中混合均匀后，在搅拌条件下滴入到含有十二烷 基硫酸钠的40°C甲苯中，以5000r/min高速搅拌lh，然后在25。C超声乳化20min，调节pH，
待温度降至15t:，倾入乙醚中并立即加甲醛与三聚磷酸钠组成的复合交联剂固化，减压过
滤乙醚洗涤，挥去甲苯和乙醚，加入梯度乙醇脱水，室温干燥，即得浅黄色氨基多糖-阿司 匹林复合物纳米微粒.
实施例3 将阿司匹林加入到氨基多糖季氨盐溶液中混合均匀后，在搅拌条件下滴入到含有 司盘80的3(TC蓖麻油中，以6000r/min高速搅拌2h，然后在15。C超声乳化30min，待温度 下降至l(TC，倾入乙醚中并立即加戊二醛与三聚磷酸钠组成的复合交联剂固化，减压过滤 乙醚洗涤，挥去蓖麻油和乙醚，室温真空干燥，即得深黄色氨基多糖_阿司匹林复合物纳米 微粒.
权利要求
一种氨基多糖-阿司匹林复合物纳米微粒的制备方法。
2. 根据权利要求1所述的一种氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒的制备方法，其制 备方法采用的是复合凝聚法。
3. 根据权利要求1所述的一种氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒的制备方法，其复 合物纳米微粒制备中采用了复合交联的方法。
4. 根据权利要求1所述的一种氨基多糖_阿司匹林复合物纳米微粒的制备方法，其所 述的氨基多糖包括部分脱乙酰基几丁质、全部脱乙酰基几丁质(即氨基多糖)、羧甲基氨基 多糖、羟乙基氨基多糖、羟丙基氨基多糖、氨基多糖季氨盐、聚乙烯醇接枝氨基多糖等.
5. 根据权利要求3所述的复合物纳米微粒制备中采用了复合交联的方法，其交联剂是 甲醛、戊二醛、三聚磷酸钠、谷氨酸钠、硫酸钠其中的二者。
全文摘要
本发明提供一种制备氨基多糖-阿司匹林复合物纳米微粒的方法将氨基多糖衍生物溶解后与阿司匹林原料药混合，倾入到分散相溶液中，并向其中加入乳化剂、交联剂等溶液，通过控制反应温度、体系酸碱度、搅拌速度和固化时间，即得到氨基多糖-阿司匹林复合物纳米微粒。本发明的突出特点是该技术方法具有操作方便、工艺简便稳定、原料来源十分丰富等优点；本发明的重要意义还在于复合物纳米微粒制备中采用了复合交联的方法；本发明采用的材料安全无毒副作用、具有良好的生物相容性、生物可降解性等特点；本发明有望开发一类防治心血管疾病的理想药物，具有良好的研究和开发应用前景；因此，该发明技术具有很好的经济开发潜力。
文档编号A61K9/16GK101700228SQ200910128089
公开日2010年5月5日 申请日期2009年3月19日 优先权日2009年3月19日
发明者周莉, 宋益民, 范鸣浩 申请人:青岛科技大学