专利名称：：用作抗癌剂的萜类衍生物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及现有技术(HelveticaChimicaActaVol.70，1987，2019-2027和HelveticaChimicaActaVol.71，1988，964-976)中称作Sarcodictyins的萜类衍生物，它能用作治疗剂。以前没有报道过本发明所提到的Sarcodictyins的治疗用途。根据本发明，特别是就Sarcodictyins的细胞毒素活性来说，它能够在人或动物的癌症治疗中用作抗肿瘤治疗剂。所以，本发明涉及一种选自于下组中的用作治疗剂的化合物(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-7-羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsA)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-6-(乙氧基羰基)-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-7-羟基-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsB)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-3，7-二羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsC)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-3-乙酰氧基-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-7-羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsD)；(Z)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-3，7-二羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsE)；和(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(1R，4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，2Z，5E，8Z)-7，10-环氧-1，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-1，7-二羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsF)。参照下列通式，在表1中报道了上述列化合物的结构式在上述通式中，符号*表示手性中心。表1\SarcodictyinC(A1)MeOH(E)uSarcodictyinD(A1)MeOAC(E)uSarcodictyinE(A1)MeOH(Z)uSarcodictyinF(A2)MeOH(E)u</table></tables>在上述表1中符号Me是指甲基；符号Et是指乙基；符号OAc是指OCOCH3。符号(E)u和(Z)u分别是指下列通式的(E)和(Z)咪唑丙烯酰基基团(E)咪唑丙烯酰基(Z)咪唑丙烯酰基特别是上述所提到的SarcodictyinA到F可因其细胞毒性即抗肿瘤活性而在人或动物的癌症治疗中作为治疗剂。所说的癌症可选自于肉瘤、癌、淋巴瘤、成神经细胞瘤、黑素瘤、骨髓瘤、维尔姆斯瘤、白血病和腺癌中。按照HelveticaChimicaActaVol.70，1987，第2025页中所述的方法，本发明的Sarcodictyin可从地中海Stoloniferan的珊瑚“SarcodictyonRoseum”(Rolandiarosea)(Forbes1847)中分离得到。通过(a)“体外”试验评价它们在促进微管蛋白合成中的活性和(b)“体外”试验评价它们对L1210细胞和耐阿霉素的L1210细胞(L1210/Dx)的细胞毒性来证实本发明的Sarcodictyin的生物活性。例如，按照试验(a)和(b)中所述的方法评价SarcodictyinA(内部编码FCE29123)和SarcodictyinC(内部编码FCE29119)的活性。(a)微管蛋白的合成试验用合成-分散两步循环法制备小牛的脑微管蛋白(ShelanskiM.L.，GaskinF.和CantorC.R.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.70，765-768，1973)并在液氮下存放在MAB(0.1MMES，2.5mMEGTA，0.5mMMgSO4，0.1mMEDTA，0.1mMDTT，pH6.4)中。全部试验都是在存放少于4周的蛋白质上进行的。在每次试验前，把微管蛋白在4℃下保存30分钟。用Gaskin等的方法(GaskinF.，CantorC.R.和ShelanskiM.L.，J.Molec.Biol.89，737-758，1974)监控合成。把含有微管蛋白(1mg/ml)和1mMGTP的比色杯移至37℃下并在装有一部自动记录仪和恒温调节的样品室的Perkin-elmer557的双波长双束分光光度计连续进行混浊度的测定。30分钟后，加入4mMCaCl2并测定10分钟的解聚作用作为降低的混浊度。在15分钟的固定间隔，加入等分剂量的试验化合物并监控混浊度的变化。数据表示了试验化合物诱发的再聚合百分比。表2显示了所得到的试验结果。表2上述表中的数据清除地表明即使有通常抑制微管蛋白合成的CaCl2的存在试验的Sarcodictyin也能够促进微管蛋白的再聚合。正如现有技术所熟知的，微管是在抗癌化疗中最重要的亚细胞靶(Rowinsky等，Review，Vol.82，No.15，1990年8月1号)。不象能够诱发解聚微管的传统抗微管剂如秋水仙碱和长春花属的生物碱，Sarcodictyin似乎具有类似于一种从天然产物中筛选出的最有益的抗癌剂紫杉醇的作用机理即诱发细管聚合并形成非常稳定和无功能性的微管。所以，就Sarcodictyin能够促进微管快速形成和稳定从而引起肿瘤细胞中的细胞分裂的暂停的能力而言，它能够在人或动物的癌症治疗中用作抗肿瘤治疗剂。(b)细胞培养和药物敏感性的试验在RPMI1640培养基(GIBCO，Grandisland，NY)中L1210和L1210/DX(抗阿霉素)鼠白血病细胞系体外生长从而作为稳定的悬浮培养物，其中的RPMI1640培养基含有10％胎小牛血清(Flow，Irwine，UK)，2mML-谷氨酰胺(GibcoEurope，Glasgow，UK)，10uM巯基乙醇，100个单位/ml青霉素和100ug/ml链霉素。在12孔/平皿(Costar，Cambridge，MA)上接种指数增长的细胞(1×105个细胞/毫升)并在接种后马上加入各种浓度的试验化合物。在37℃潮湿的5％CO2大气中把该平皿温育48小时。在一台ZBICoulter计数器(Hialeah，FL)计数存活细胞数来评价对细胞生长的抑制。在导出的浓度-反应曲线上计算50％的抑制浓度(IC50)。对每种试验化合物浓度来说，使用双份培养物。表3报道了所得到的结果。表3*治疗48小时R.I.＝耐药指数＝ID50L1210/DXID50L1210正如上述表中的数据所证实的，Sarcodictyin对L1210和抗阿霉素的L1210细胞(L1210/DX)二者都具有良好的体外细胞毒活性。就Sarcodictyin对L1210/DX细胞的功效而言，它能够用于耐化学治疗剂如蒽环(anthracycline)糖甙特别是阿霉素的肿瘤治疗中。用这样一种方法能够治疗人或动物，即该方法包括将药物有效量的选自于SarcodictyinA，SarcodictyinB，SarcodictyinC，SarcodictyinD，SarcodictyinE和SarcodictyinF中的一种化合物给药于患者。因此，改善了该人或动物的症状。本发明的Sarcodictyin能够以各种剂型给药，如以片剂、胶囊、糖或膜包衣的片剂、液体溶液或悬浮液的形式口服给药；以栓剂的形式直肠给药；肠胃外给药如肌肉内给药或静脉注射或输液给药。剂量取决于患者的年龄、体重和身体条件和给药途径；例如，给成人口服如本发明的代表化合物FCE29213(SarcodictyinA)所采用的剂量可以在每天大约0.01g到大约1g的范围内。本发明还包括药物组合物，它含有本发明的Sarcodictyin作活性成分以及药物可接受的赋型剂(可是载体或稀释剂)。含有本发明化合物的该药物组合物一般是按照常规的方法制备的并可以药物的适当形式给药。例如，固体口服形式可含有活性化合物及稀释剂如乳糖、左旋糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁或钙，和/或聚乙二醇；粘合剂如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂如淀粉、藻酸、藻酸盐或羟乙酸淀粉钠；发泡混合物；染料；矫味剂；湿润剂如卵磷脂、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、月桂醇硫酸酯；和药物制剂中所用的一般的无毒和药效非活性物质。该药物制剂可以用熟知的方法生产，例如，混合、制粒、压片、包衣或膜包衣的工艺方法。口服的液体分散液可以是如糖浆、乳液和悬浮液。糖浆可以包括例如蔗糖或含有甘油的蔗糖和/或甘露醇和/或山梨醇作载体。悬浮液和乳液可以包括例如天然胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。用于肌肉内注射的悬浮液或溶液可含有活性成分及药用载体例如，无菌水、橄榄油、油酸乙酯、乙二醇类如聚乙二醇和如果需要，定量的盐酸利多卡因。用于静脉注射或输液的溶液可以包括例如，无菌水或优选无菌、含水和等渗的盐水溶液形式作载体。栓剂可含活性化合物及药用载体例如，可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯表面活性剂或卵磷脂。权利要求1.一种选自于下组的用作治疗剂的化合物(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-7-羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsA)；(E)-3-(1-基甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-6-(乙氧基羰基)-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-7-羟基-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsB)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-3，7-二羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsC)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-3-乙酰氧基-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-7-羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsD)；(Z)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-环氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-3，7-二羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsE)；和(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(1R，4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，2Z，5E，8Z)-7，10-环氧-1，4，4a，7，10，11，12，12a-八氢-1，7-二羟基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并环十-11-基酯(SarcodictyinsF)。2.权利要求1所述的化合物，其用作微管蛋白合成的促进剂，它能够引起肿瘤细胞中的细胞分裂暂停。3.权利要求1所述的化合物，其用作抗肿瘤剂。4.权利要求1所述的化合物，其用于治疗抗化学治疗剂的肿瘤。5.根据权利要求4所述的化合物，其中的化学治疗剂是蒽环糖甙。6.根据权利要求5所述的化合物，其中的蒽环糖甙是阿霉素。7.权利要求1所述的化合物在制备用作人或动物的癌症治疗中抗肿瘤治疗剂的药剂的用途。8.一种药物组合物，它含有权利要求1所述的化合物作为活性成分和药用载体和/或稀释剂。9.权利要求8所述的药物组合物，其用作微管蛋白合成的促进剂，它能够引起肿瘤细胞中的细胞分裂暂停。10.权利要求8所述的药物组合物，其用作人或动物的癌症治疗中的抗肿瘤治疗剂。11.权利要求8所述的药物组合物，其用于治疗抗化学治疗剂的肿瘤。12.根据权利要求11所述的药物组合物，其中的化学治疗剂是一种蒽环糖甙。13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中的蒽环糖甙是阿霉素。全文摘要本发明涉及现有技术中称作Sarcodictyins的萜类衍生物用作治疗剂，和含有它的药物组合物。尤其是Sarcodictyins能够在人或动物的癌症治疗中用作抗肿瘤治疗剂。文档编号A61K31/415GK1155839SQ96190508公开日1997年7月30日申请日期1996年4月23日优先权日1996年4月23日发明者C·巴蒂斯蒂尼,M·西奥梅,F·皮特拉,M·丹布罗西奥,A·格尔里洛申请人:法玛西雅厄普约翰公司