专利名称：酸枣仁解郁安神组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种具有解郁安神功效，治疗失眠症、抑郁症的酸枣仁组合物及其制 备方法，属于中药领域。
背景技术：
失眠是一种最常见的睡眠障碍；抑郁症是一种常见的情感性精神障碍，以显著而 持久的心境低落为主要特征的综合症。我国传统中医学认为，不寐即失眠；抑郁症属“郁 证”，不寐与郁证均属于情志疾病范畴，均是由于情志刺激导致人体阴阳气血失调，脏腑功 能紊乱，以至心神失养或不安所致，是人体致病的重要因素。祖国医学多从调肝养血安神入 手治疗情志异常，临床疗效显著。现代医学认为失眠不单是睡眠生理紊乱过程，同时还是 一个心理紊乱过程。研究表明失眠症的患者多伴有焦虑、抑郁和其它精神病理症状。随着 社会竞争的日益加剧、生活节奏的加快，抑郁症、失眠等情志疾病的发病率正急剧上升。目 前临床应用的抗抑郁与镇静催眠类药物多为西药，毒副作用明显，价格昂贵，有成瘾性等缺 点o人们在长期环境压力下可导致各种情绪障碍，以抑郁为常见的表现，而失眠又是 精神疾病早期和常见的症状。临床研究表明抑郁症患者在情绪低落的同时，又常表现出心 烦意乱，焦虑等特征，有80%的病人还可出现严重的失眠，因此采用安神开窍中药治疗实属 必要。现今国内外研究解郁安神类中药，还是分别按照抗抑郁、镇静催眠类西药的研究思路 进行，不能体现中药多途径、多靶点的整体作用。而临床常采用安神类中药治疗抑郁症，说 明此类中药常同时表现解郁、安神两方面的药理活性，按照西药研究模式把它们分割开来， 不符合中医药传统理论和用药方式。在对近10年来抗抑郁复方中药的组成及治法进行分析，发现各类抗抑郁药物中 以安神药出现频率为最高，而单味药中，使用最多的是酸枣仁、远志。酸枣仁为传统的解郁 安神类中药，具有养肝宁心、敛汗生津之功效，用于治疗虚烦不眠、神经衰弱、体虚多汗等， 常以单方或复方形式用于虚烦不眠。近年来的化学研究表明酸枣仁药材中包括皂苷、黄酮、 生物碱类成分，虽有文献报道酸枣仁皂苷、黄酮类部位均有镇静催眠作用，但也有研究对皂 苷的镇静催眠药效表示质疑。而本课题组多年的研究表明酸枣仁生物碱类也具有明显的镇 静催眠和抗抑郁作用，说明这些有效部位的不同配伍变化(包括部位组成和比例的改变) 可引起功效上发生改变。基于上述研究思路，本发明以中医药整体理论为基础，以“解郁安 神”为治疗原则，研制出一种治疗失眠症、抑郁症的中药有效部位组合物。

发明内容
本发明的目的是提供一种治疗失眠症、抑郁症的药物组合物。本发明的另一目的是提供酸枣仁各有效部位的制备方法。本发明的配方的原料组成及重量配比为酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮0_50份。
优选的原料组成及用量为酸枣仁总皂苷90-160份，酸枣仁总生物碱12-16份，酸 枣仁总黄酮0-10份。最佳方案的原料组成及用量为酸枣仁总皂苷92份，酸枣仁总生物碱13份。本发明中所用酸枣仁(SEMEN ZIZIPHI SPIN0SAE)为鼠李科植物酸枣Ziziphus jujubaMill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H. F. Chou 的干燥成熟禾中子。所用药材为市售的经过检验合格的中药材。在本发明中，所述中药组合物的剂型可为口服液、片剂、胶囊、软胶囊、滴丸、合剂 和颗粒剂等，优选为口服液。制备本发明的有效部位的方法包括以下工艺步骤①酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入6 10质量倍的体积百分浓 度为60% 80%的乙醇水溶液，加热回流提取2 3次，每次1 3小时，滤过，合并提取 液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用2 6倍量水溶解，18% HC1调pH 5，用正丁醇萃取4-6次， 得正丁醇液1及酸水液；②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水调pH12，用 2 5倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉 末；③将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液，中间提取液A液以 1 % NaOH洗涤6-10次，合并碱水层，用5% HC1调pH 5，再以正丁醇萃取4_6次，回收溶剂， 浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末；④中间提取液A液以NaOH洗涤后的正丁醇液，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉 碎，即为酸枣仁总皂苷粉末；⑤将酸枣仁有效部位酸枣仁皂苷16-200份，生物碱4-30份，黄酮0_50份混合均 勻，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种制剂。上述制备方法中步骤①中优选方法为酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂 后，加入8质量倍的体积百分浓度为70 %的乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次2小时，滤 过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用4倍量水溶解，18% HC1调pH 5，用正丁醇萃取 5次，得正丁醇液1及酸水液。优化方法为步骤②中酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2。然后酸水液加氨 水调pH12，用3倍量乙酸乙酯萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生 物碱粉末。优化方法为步骤③中将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液。 中间提取液A液以1 % NaOH洗涤8次，合并碱水层，用5% HC1调pH 5，再以正丁醇萃取5 次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末。优化方法为步骤⑤中酸枣仁总皂苷为92份，酸枣仁总生物碱为13份。本发明的有益效果为根据酸枣仁各部位的极性与酸碱性不同，采用酸碱和溶液 萃取法分离纯化的工艺制得，制备方法简单，产品价格适中。在现有制备工艺中未见同时分 离酸枣仁中三种有效部位的报道。与现有技术相比，以本发明制备的酸枣仁各有效部位组 合而成的组合物，其解郁安神药理活性超过酸枣仁药材，且进一步制成的制剂可减少服用 量，增强药物的顺应性，无毒副作用。


图1酸枣仁各有效部位提取、分离流程图。
具体实施例方式以下通过实施例来进一步阐述本发明所述药物组合物的有益效果。实施例实施例1-8的药材处理方法相同，不同之处仅在于三种酸枣仁有效部位重量配比 的差异，如表1所示，药材处理方法如下a.酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入8质量倍的体积百分浓度为 70%的乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无 醇味后用4倍量水溶解，18% HC1调pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。b.酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2。然后酸水液加氨水调pH12，用3倍 量乙酸乙酯萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末。c.将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液。中间提取液A液 以1 % NaOH洗涤8次，合并碱水层，用5% HC1调pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶剂，浓 缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末。d.中间提取液A液以NaOH洗涤后的正丁醇液，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉 碎，即为酸枣仁总皂苷粉末。e.将酸枣仁的有效部位酸枣仁总皂苷、酸枣仁总生物碱、酸枣仁总黄酮等如表1 所示混合均勻，加入适宜药用辅料，按常规方法制成口服液。表18组中药组合物口服液的原料配比(单位mg)
组别酸枣仁总生物碱酸枣仁总黄酮酸枣仁总皂苷1510652830200
3115020414015551720062040110713092
8200200对8组实施例制成的口服液进行药效学比较1.材料1. 1实验动物雄性ICR小鼠(SPF级，体重20士2g)购于中国医学科学院中国协 和医科大学实验动物研究所，合格证号SCXK(京)2009-0008。实验前在实验室饲养1周， 适应环境。室温22士2°C，相对湿度65% 70%。日光照12h，自由饮食、摄水。1.2药物与试剂盐酸氟西汀分散片(美国礼来公司，批号9705A，20mg/片)；
6戊巴比妥钠(广州化学试剂厂，CP)；利血平注射液(广东邦民制药厂有限公司，批号 090918,1ml lmg)；解郁安神颗粒(吉林百姓堂药业有限公司，批号20100103075，5g/袋)。1. 3实验仪器水槽、秒表、MC-3数字式温度体温计2.灌胃药液的配置2. 1不同配比复方灌胃药液的配置将表1中酸枣仁有效部位按不同剂量混合均勻，以蒸馏水溶解，折合成小鼠的等 效剂量按照0. lml/10g灌胃给药。2. 2阳性对照药的制备取盐酸氟西汀分散片(20mg/片)1片，以40ml蒸馏水溶解，配成0. 5mg/ml的药液， 按照0. 15ml/10g给药，即为抗抑郁阳性对照组。取解郁安神颗粒(5g/袋)1袋，以40ml蒸馏水溶解，配成0. 125mg/ml的药液，按 照0. lml/10g给药，即为催眠阳性对照组。2. 3酸枣仁药材药液的配置酸枣仁粉碎，通过40目筛，加入8质量倍的体积百分浓度为70 %乙醇溶液，加热回 流提取3次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩至浸膏，真空干燥得酸枣仁粗提物，加 蒸馏水配成79. 4mg/ml的药液。3.不同配比的复方酸枣仁口服液药效学评价3. 1将实验动物按表2分组及给药，于每日上午9:00 10:00灌胃一次，连续灌胃 14天。分别于第1，5，10天监测体重。3. 2与阈上剂量戊巴比妥钠协同实验各组小鼠于给药第6天，灌胃0. 5h后腹腔 注射阈上剂量戊巴比妥钠，剂量为40mg/kg。注射后开始计时，记录睡眠潜伏期及睡眠时间。 以翻正反射消失时为睡眠起始时间，翻正反射恢复为睡眠结束时间。腹腔注射后到睡眠起 始这段时间为睡眠潜伏期，潜伏期超过15min，按15min记录。3. 3小鼠强迫游泳实验给药方案同上，末次给药后lh进行实验。实验前(即第 13天)小鼠训练游泳6min, 24h后测试将小鼠放入水深10cm的5000ml烧杯内(高20cm, 直径14cm)，水温25士2°C。观察6min，记录比较各组后4min内小鼠的不动时间。3. 4动物不动行为的评判标准悬尾实验中动物不动行为的评判标准是小鼠头部 向下，四肢自然下垂，脊背未向两侧弯曲。小鼠前肢有微幅移动仍视为不动。强迫游泳实验 中，小鼠微卷躯体，头部露出，但保持总体水平姿势漂浮于水面，即为不动时间。3. 5拮抗利血平诱发的小鼠体温降低实验动物分组及给药方案同上。体温测定 采用数字式电子体温计。事先用少许硅油涂擦电子体温计，使之润滑，将体温计探头轻轻插 入小鼠肛门l_2cm，当温度显示稳定后记录读数，作为基础体温。之后灌胃给予相应药物，lh 后腹腔给药利血平注射液2. 5mg/kg，然后分别在1、4及24小时后测定体温，以体温降低值 (AT = 作为指标，进行统计分析。4统计学分析数据以均值士标准差的形式表示。采用单因素方差分析法进行统计学分析。数 据由SPSS软件处理，p < 0. 05或p < 0. 01具有显著性差异。表2实验动物分组及给药方案
5 结果本实验所得数据以均值士标准差的形式表示。数据由SPSS软件处理，采用单因 素方差分析法进行统计学分析，P < 0. 05或p < 0. 01具有显著性差异。统计内容包括与 阈上剂量戊巴比妥钠协同实验中睡眠潜伏期及睡眠时间、小鼠强迫游泳实验中不动时间和 拮抗利血平诱发小鼠体温降低幅度。5.1小鼠体重检测各组小鼠在第1，5，10，15天的体重统计见表3。结果表明，各组间小鼠体重均无显 著性差异，且体重变化的幅度和趋势较为随意，说明药物对小鼠体质无明显影响。表3小鼠体重监测值(g) (x ) 5. 28组实施例的中药组合物对阈上剂量戊巴比妥钠镇静催眠协同作用的影响各组小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间结果见表4。表48组实施例的中药组合物对小鼠阈上剂量戊巴比妥钠镇静催眠协同作用的影 响(x ±s) 注广与模型对照组比较p < 0. 05，“与模型对照组比较p < 0. 01由表4结果显示给药3、4、5、6、8组与模型对照组比较，睡眠潜伏期差异有高度统计学意义(P <0.01)，明显缩短各给药组小鼠睡眠潜伏期。给药2、3、4、5、6、7、8组与模型 对照组比较，睡眠时间差异有高度统计学意义(P < 0.01)，可以显著延长各给药组小鼠阈 上剂量戊巴比妥钠所致睡眠时间。5. 38组实施例的中药组合物对小鼠强迫游泳不动时间的影响各组小鼠强迫游泳不动时间结果见表5。表58组实施例的中药组合物对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响G ) 注与模型对照组比较ρ < 0. 05，#与模型对照组比较ρ < 0. 01小鼠在强迫游泳模型中表现的不动状态反映了动物的绝望行为，可模拟人类的抑 郁状态。从表中可以看出，酸枣仁各部位不同配比药液组与模型对照组比较均能不同程度 的缩短强迫游泳小鼠的不动时间，药液1、4、6、8组及酸枣仁药材组与模型对照组比较能显 著缩短强迫游泳小鼠的不动时间，有统计学意义(P < 0. 01，ρ < 0. 05)。其他组虽能不同 程度地缩短强迫游泳小鼠不动时间，但差异较小。特别是药液7组小鼠不动时间减少百分 率达到61. 54%，与模型对照组相比较有显著性差异(ρ < 0. 01)。5. 48组实施例的中药组合物对利血平诱发小鼠体温变化的影响实验结果见表6。表68组实施例的中药组合物对利血平诱发小鼠体温变化的影响G ) 注与模型对照组比较ρ < 0. 05，#与模型对照组比较ρ < 0. 01从表中可以看出，腹腔注射利血平Ih时，各组体温均开始下降，4h内体温明显下 降，且24h后体温并未恢复。解郁安神颗粒对照组、药液1、2、3、4、5、7组在Ih内具有明显 拮抗体温下降的作用，与模型组比较有统计学意义。4h后体温下降幅度最大，1、2、3、5、7 组体温下降幅度较模型对照组小，具有明显拮抗体温下降的作用体温变化有统计学意义(P <0. 05或P <0.01)，其余给药各组也不同程度地降低了利血平的作用幅度，但并无统计学 意义。表6可知，24h时，各组体温较4h时均有不同程度的恢复。其中药液3、4、5、7、8组体 温上升，尤其是药液4、7组回升明显。
权利要求
一种酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，它由下列重量份的酸枣仁有效部位所组成酸枣仁总皂苷16 200份，酸枣仁总生物碱4 30份，酸枣仁总黄酮0 50份。
2.根据权利要求1所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，它由下列重量份的酸枣 仁有效部位所组成酸枣仁总皂苷90-160份，酸枣仁总生物碱12-16份，酸枣仁总黄酮0-10份。
3.根据权利要求1所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，所述酸枣仁总皂苷92份， 酸枣仁总生物碱13份。
4.根据权利要求1-3任意一项所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，通过以下方 法制得①酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入6 10质量倍的体积百分浓度为 60% 80%的乙醇水溶液，加热回流提取2 3次，每次1 3小时，滤过，合并提取液，滤 液浓缩乙醇至无醇味后用2 6倍量水溶解，18% HC1调pH 5，用正丁醇萃取4-6次，得正 丁醇液1及酸水液；②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水调pH12，用2 5 倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末；③将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液，中间提取液A液以 NaOH洗涤6-10次，合并碱水层，用5 % HC1调pH 5，再以正丁醇萃取4_6次，回收溶剂，浓缩 物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末；④中间提取液A液以NaOH洗涤后的正丁醇液，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即 为酸枣仁总皂苷粉末；⑤将酸枣仁有效部位酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮 0-50份混合均勻，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种制剂。
5.根据权利要求1-3任意一项所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，所述组合物 的剂型为口服液、片剂、胶囊剂、滴丸剂和颗粒剂中的一种。
6.一种酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤①酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入6 10质量倍的体积百分浓度为 60% 80%的乙醇水溶液，加热回流提取2 3次，每次1 3小时，滤过，合并提取液，滤 液浓缩乙醇至无醇味后用2 6倍量水溶解，18% HC1调pH 5，用正丁醇萃取4-6次，得正 丁醇液1及酸水液；②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水调pH12，用2 5 倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末；③将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液，中间提取液A液以 NaOH洗涤6-10次，合并碱水层，用5 % HC1调pH 5，再以正丁醇萃取4_6次，回收溶剂，浓缩 物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末；④中间提取液A液以NaOH洗涤后的正丁醇液，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即 为酸枣仁总皂苷粉末；⑤将酸枣仁有效部位酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮 0-50份混合均勻，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种制剂。
7.根据权利要求6所述酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤①为酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入8质量倍的体积百分浓度为70%的乙 醇水溶液，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用 4倍量水溶解，18% HC1调pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。
8.根据权利要求6所述酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤② 中酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水调pH12，用3倍量乙酸乙 酯萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末。
9.根据权利要求6所述酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤③ 中将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液，中间提取液A液以1 % NaOH 洗涤8次，合并碱水层，用5% HC1调pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干 燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末。
10.根据权利要求1-3任意一项所述酸枣仁解郁安神组合物在制备治疗失眠症、抑郁 症药物的应用。
全文摘要
本发明公开了一种酸枣仁解郁安神组合物及其制备方法，包括酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮0-50份。根据酸枣仁各部位的极性与酸碱性不同，采用酸碱和溶液萃取法分离纯化的工艺制得，制备方法简单，产品价格适中。在现有制备工艺中未见同时分离酸枣仁中三种有效部位的报道。与现有技术相比，以本发明制备的酸枣仁各有效部位组合而成的组合物，其解郁安神药理活性超过酸枣仁药材，且进一步制成的制剂可减少服用量，增强药物的顺应性，无毒副作用。
文档编号A61P25/20GK101926865SQ20101027872
公开日2010年12月29日 申请日期2010年9月11日 优先权日2010年9月11日
发明者乔卫, 刘婧姝, 周晶, 李陆, 杨奕, 段宏泉, 符敬伟 申请人:天津医科大学