专利名称：一种长春花属生物碱脂质体及其生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种长春花属生物碱脂质体及其生产工艺，具体地说是长春新碱、长春碱和长春瑞滨的脂质体和它们的pH梯度法生产工艺，属于化学制药领域。
背景技术：
长春花属生物碱如长春新碱、长春瑞滨和长春碱是临床上常用的广谱抗肿瘤药物。目前主要应用于急慢性白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤，以及一些实体肿瘤，如神经母细胞瘤、肾母细胞瘤和Ewing肉瘤及乳腺癌和小细胞肺癌等。但是如同其他抗肿瘤化疗药物一样，长春新碱在使用过程中对患者产生较大的毒副作用，主要为限制剂量的毒副作用有神经毒性，多在给药后6～8周出现，表现为感觉神经和自主神经受损，严重的会出现共济失调、足下垂或脑神经麻痹。此外还有胃肠道反应，漏出血管外对皮下组织的刺激作用造成病人疼痛难忍等。这些毒副作用极大地限制了长春新碱的临床应用。
脂质体为磷脂双层膜结构，主要成分是磷脂和胆固醇，对人体无毒性无免疫原性。由于其尺径大小，表面易被控制，膜特性，容量大和生物兼容性等特点，近年来被用于一些抗肿瘤药物的包裹，当药物被投放到病灶部位后，药物从脂质体中缓慢释放出来，达到降低毒性提高疗效的目的，因此用脂质体包裹长春新碱不失为一种理想的降低毒性并消除注射疼痛的方法。
目前，国外脂质体长春新碱作为药物正在进行临床III期的试验，主要成分为长春新碱、神经鞘磷脂(sphingomyelin，SM)和胆固醇。这种脂质体降低了长春新碱的毒性，但是药物稳定性和体内循环时间都有待提高。

发明内容
本发明要解决的主要技术问题是提供一种毒副作用小、稳定性高、体内循环时间长的长春花属生物碱脂质体。
本发明要解决的另一个技术问题是提供这种长春花属生物碱脂质体的生产工艺。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案一种长春花属生物碱脂质体，由长春花属生物碱、脂质体材料和抗氧化剂组成，药/脂比例(w/w)为0.05～0.2∶1；其中脂质体材料包括磷脂和胆固醇，二者的摩尔比为40～60∶30～50mol％；抗氧化剂由α-tocopherol和desferal组成，二者的浓度分别为0.015～0.025mg/ml及0.10～0.20mg/ml。
脂质体材料中还含有DSPE-PEG2000(多聚乙烯-乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)，磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000三者的摩尔比为40～60∶30～50∶4～9。
所述磷脂选自神经鞘磷脂(MS)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)或氢化磷脂酰胆碱(HSPC)中的一种。
所述长春花属生物碱选自长春新碱、长春瑞滨和长春碱中的一种，本发明使用的是它们的硫酸盐或重酒石酸盐(vinorelbine bitartrate)，可方便地购得。
我们使用过DSPC、HSPC和SM分别与胆固醇组成磷脂双层膜结构的脂质体，其中以SM和胆固醇组成的脂质体稳定性最好。SM(或者HSPC、DSPC)是组成双层膜的磷脂，是脂质体最基本组成成分。胆固醇的作用是降低膜的流动性提高双层膜的稳定性。它们浓度的配比原则是为取得最佳稳定性的脂质体，SM(或HSPC、DSPC)40～60mol％，胆固醇30～50mol％，高于或低于这个浓度比例脂质体都不会稳定，有文献报道胆固醇浓度不能低于30mol％，否则就不会起到任何作用，但是胆固醇浓度又不能高于50mol％，那样反而会加快包裹药物从脂质体中渗漏出来。
提高药物稳定性是通过在配方中加入微量的α-tocopherol和desferal实现的。它们的作用一个是抑制磷脂和胆固醇的水解和氧化，另一个作用是抑制长春新碱的氧化。稳定性试验表明，在本发明配方剂量下合用这两个抗氧化剂的脂质体的渗漏率远远低于只用其中一种抗氧化剂的脂质体。
通常情况下，药脂比越低药物的包封率会越高，稳定性也随之增加，因此很多包封率较高的脂质体药物的药脂比在0.05∶1或更低。然而药脂比越低，进入脂质体中的药物含量越少，极不利于药物的临床应用。但是由于脂质体容量有限，如果再加上均匀分布于磷脂双层两侧的大分子PEG，又占用部分脂质体容量，所以提高药脂比非常困难。本发明采用上述配方，使药脂比最高能够达到0.2∶1，同时包封率不低于90％。国外文献和脂质体产品中从未见过高于此比例的，国内许多研究机构所制备的脂质体药物的药脂比远远低于此比例。
在减少药物毒副作用的同时尽量延长药物在体内循环的时间从而增加药物疗效也是脂质体药物研发所追求的目标，本发明通过在配方中加入亲水性大分子多聚乙烯-乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)来实现这个目的，与国外只有SM和胆固醇组成的脂质体相比，本发明在体内的循环时间明显延长。对于长春花属生物碱而言，所用DSPE-PEG2000的较佳浓度范围是4～9mol％低于4mol％也可延长药物的体内循环时间，但效果不十分显著；而PEG的浓度超过9mol％时，会使脂质体形成泡沫状micelle而不呈现双层结构。DSPE-PEG2000能够增强脂质体膜表面亲水性，降低各种血浆蛋白对脂质体的结合，使脂质体可非常有效地躲避网状内皮系统的吞噬，稳定性及包封率得到提高，漏出率降低，使脂质体的体循环时间明显延长，体内重新分布，降低所包药物的毒性反应，同时在病灶中的浓度也显著提高，因而增加治疗指数。另外由于注射时药物仍包裹在脂质体中，消除了药物漏出后对组织的刺激造成疼痛。
为了便于实施，本发明选择pH梯度法作为基本生产工艺，通过试验优化其各项反应条件，最终摸索出适合于长春花属生物碱脂质体规模化生产的工艺路线。
一种长春花属生物碱脂质体注射液的生产工艺，包括以下步骤(1)制备多层脂质体按照前述配方的量配制含有脂质体材料和抗氧化剂的氯仿或氯仿/甲醇溶液，旋转蒸发成膜，加入200～400mM，pH值为2～5柠檬酸溶液水化；(2)制备小单层脂质体将步骤(1)得到的含有多层脂质体的柠檬酸溶液进行五个冷冻-融化循环后，经挤压机挤压成粒径为80～120纳米的小单层脂质体液；(3)制备长春花属生物碱脂质体将长春花属生物碱的硫酸盐或重酒石酸盐溶液在60℃条件下加入到小单层脂质体液中混合，应用0.3～0.6M的磷酸氢二钠溶液调节脂质体外液pH值至7.0～7.6，在60℃水浴中放置10分钟以上，使长春花属生物碱进入小单层脂质体中，冷却至室温，除去游离的长春花属生物碱得到成品。
步骤(1)中使用200～400mM柠檬酸的作用主要是提高长春花属生物碱的包封率。200～400mM可稳定脂质体渗透压，优选浓度为300mM；pH值采用2～5主要是建立pH梯度。包封率最好的pH值是2，但考虑到酸性过强，在脂质体破坏后会对人体有害，所以我们优选pH值4.0。
所述步骤(2)中的五个冷冻-融化循环是指将多层脂质体用干冰(-20℃)冷冻后在室温下自然融化，然后再用干冰冷冻，如此循环五次。作用是进一步提高包封率和稳定性。小单层脂质体的粒径优选100纳米。
所述步骤(3)所应用的磷酸氢二钠溶液浓度为0.5M。用磷酸氢二钠溶液调节脂质体外pH值到高于7.0即可，但不能高过7.6，否则pH梯度不容易保持。
所述步骤(3)中除去游离的长春新碱的方法为层析法和离心分离法，属本领域公知常识，故不冗述。层析柱法可以使用Sephadex G-50柱，将脂质体长春新碱上柱，生理盐水洗脱即可离心法是将脂质体长春新碱置入离心机，在100,000g条件下离心5分钟，去除上清液，用生理盐水溶解pellet即可。
本发明的优点是本发明公开的配方能够制得包封率大于90％的脂质体，毒性低，稳定性高，加入DSPE-PEG2000后，进一步延长了药物的体内循环时间，有利于药物的缓释和疗效提高。使用优化后的pH梯度法操作简便、省时，制得的脂质体包封率高，回收率90％，磷脂，胆固醇及DSPE-PEG2000的回收率为85％左右。脂质体渗漏率低，粒径均匀(100±10纳米)，稳定性好，4℃放置保存一年粒径无变化，包封率仍在85％以上。同时该方法便于灭菌及除去热原，可实现规模生产。
下面结合具体实施方式
对本发明作进一步说明。
具体实施例方式
表1脂质体配方

以上材料来源如下长春碱(vinblastine)、长春新碱(硫酸盐)和长春瑞滨(vinorelbine)购于深圳万乐药业。
神经鞘磷脂(SM，sphingomyelin)、DSPC(distearoylphosphatidylcholine)、HSPC(hydrogenated soybean phosphatidylcholine)、胆固醇和PEG2000-DSPE购于美国Avantipolar Lipids(Alabaster，AL)公司。
α-tocopherol和desferal购于美国Sigma公司。
实施例11.制备多层脂质体将注射用SM、胆固醇和DSPE-PEG2000三者溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.2∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.2，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
本品脂质体长春新碱稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春新碱仍包裹于脂质体中。
实施例21.将注射用SM和胆固醇溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.2∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.2，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
实施例31.制备多层脂质体注射用DSPC、胆固醇和DSPE-PEG2000三者溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.1∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.4，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
本品脂质体长春新碱稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春新碱仍包裹于脂质体中。
实施例四1.制备多层脂质体注射用DSPC和胆固醇溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.1∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.4，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
实施例51.制备多层脂质体将注射用HSPC、胆固醇和DSPE-PEG2000三者溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.05∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.4，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
本品脂质体长春新碱稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春新碱仍包裹于脂质体中。
实施例61.制备多层脂质体将注射用HSPC和胆固醇溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.05∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.4，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
实施例71.制备多层脂质体将注射用SM、胆固醇和DSPE-PEG2000三者溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.2∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.6，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
本品脂质体长春新碱稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春新碱仍包裹于脂质体中。
实施例81.制备多层脂质体将注射用SM、胆固醇和DSPE-PEG2000三者溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春新碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.2∶1的量将注射用硫酸盐长春新碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.0，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春新碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春新碱脂质体成品。
本品脂质体长春新碱稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春新碱仍包裹于脂质体中。
实施例9
1.制备多层脂质体将注射用SM和胆固醇溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春碱脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.2∶1的量将注射用硫酸盐长春碱溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.4，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春碱。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春碱脂质体成品。
本品脂质体长春碱稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春碱仍包裹于脂质体中。
实施例101.制备多层脂质体将注射用SM、胆固醇和DSPE-PEG2000三者溶于氯仿/甲醇液中(v/v，2∶1)，加入抗氧化剂α-tocopherol和desferal。将上述液体放入旋转蒸发瓶中旋转蒸发成膜，再将该膜浸泡在300mM pH4.0柠檬酸溶液中。
2.制备小单层脂质体五个冷冻-融化循环后，将上述液体放入挤压机中多次挤压，得到粒径100纳米的小单层脂质体。挤压使用的碳纤维膜分别为0.14及0.08纳米。
3.制备长春瑞滨脂质体在60℃条件下，按药/脂比为0.2∶1的量将注射用重酒石酸盐长春瑞滨溶液加入小单层脂质体中混合，应用0.5M的磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液调节pH值至7.0，在60℃水浴中放置10分钟。冷却至室温，除去游离的长春瑞滨。
通过0.22纳米的微孔膜除菌、热原及其它杂质，即得到长春瑞滨脂质体成品。
本品脂质体长春瑞滨稳定性好，在10倍缓冲液试验以及与小牛血清培养的试验中，24小时后75-80％的长春瑞滨仍包裹于脂质体中。
实施例11、急性毒性试验一.材料DBA/2J小鼠和CD-1小鼠购于中国医学科学院动物研究所硫酸长春新碱购于深圳万乐药业。
硫酸长春新碱脂质体注射液，实施例2。
二.方法比较硫酸长春新碱和硫酸长春新碱脂质体注射液一次性小鼠尾静脉给药后的急性毒性反应和死亡分布。
将小鼠随机分组，每组10只，硫酸长春新碱和硫酸长春新碱脂质体注射液各用30只小鼠。分别注射硫酸长春新碱和硫酸长春新碱脂质体注射液，剂量为2、4、6毫克/公斤体重。观察37天，每日观察小鼠体重变化、急性中毒症状和死亡数目来确定半数致死量(LD50)。结果见表2。
三.结果表2.长春新碱和脂质体长春新碱的急性毒性试验(LD50)

长春新碱脂质体有效降低载荷药物的毒性，在不同种数的动物试验中降低毒性1.7-2.1倍。
权利要求
1.一种长春花属生物碱脂质体，其特征在于由长春花属生物碱、脂质体材料和抗氧化剂组成，药/脂比例(w/w)为0.05～0.2∶1；其中脂质体材料包括磷脂和胆固醇，二者的摩尔比为40～60∶30～50mol％；抗氧化剂由α-tocopherol和desferal组成，二者的浓度分别为0.015～0.025mg/ml及0.10～0.20mg/ml。
2.根据权利要求1所述的一种长春花属生物碱脂质体，其特征在于所述脂质体材料中还含有多聚乙烯-乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)；磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000三者的摩尔比为40～60∶30～50∶4～9mol％。
3.根据权利要求1或2所述的一种长春花属生物碱脂质体，其特征在于所述磷脂选自神经鞘磷脂(MS)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)或氢化磷脂酰胆碱(HSPC)中的一种。
4.根据权利要求1或2所述的一种长春花属生物碱脂质体，其特征在于所述长春花属生物碱选自长春新碱、长春瑞滨和长春碱中的一种。
5.一种长春花属生物碱脂质体的生产工艺，包括以下步骤(1)制备多层脂质体按照权利要求1或2所述配方的量配制含有脂质体材料和抗氧化剂的氯仿或氯仿/甲醇溶液，旋转蒸发成膜，加入200～400mM，pH值为2～5柠檬酸溶液水化；(2)制备小单层脂质体将步骤(1)得到的含有多层脂质体的柠檬酸溶液进行五个冷冻-融化循环后，经挤压机挤压成80～120纳米的小单层脂质体液；(3)制备长春花属生物碱脂质体将长春花属生物碱的硫酸盐或重酒石酸盐溶液在60℃条件下加入到小单层脂质体液中混合，应用0.3～0.6M的磷酸氢二钠溶液调节脂质体外液pH值至7.0～7.6，在60℃水浴中放置10分钟以上，使长春花属生物碱进入小单层脂质体中，冷却至室温，除去游离的长春花属生物碱得到成品。
6.根据权利要求5所述的一种长春花属生物碱脂质体的生产工艺，其特征在于所述步骤(1)中柠檬酸浓度为300mM；pH值为4.0。
7.根据权利要求5所述的一种长春花属生物碱脂质体的生产工艺，其特征在于所述步骤(2)中的五个冷冻-融化循环是指将多层脂质体用干冰冷冻后在室温下自然融化，然后再用干冰冷冻，如此循环五次。
8.根据权利要求5所述的一种长春花属生物碱脂质体的生产工艺，其特征在于所述步骤(2)中小单层脂质体的粒径为100纳米。
9.根据权利要求5所述的一种长春花属生物碱脂质体的生产工艺，其特征在于所述步骤(3)所应用的磷酸氢二钠溶液浓度为0.5M。
10.根据权利要求5所述的一种长春花属生物碱脂质体的生产工艺，其特征在于所述步骤(3)中除去游离的长春新碱的方法为层析法或离心分离法。
全文摘要
本发明公开了一种长春花属生物碱脂质体及其生产工艺，属于化学制药领域。一种长春花属生物碱脂质体，由长春花属生物碱、脂质体材料和抗氧化剂组成，药/脂比例(w/w)为0.05～0.2∶1；其中脂质体材料包括磷脂和胆固醇，二者的摩尔比为40～60∶30～50mol％；抗氧化剂由α－tocopherol和desferal组成，二者的浓度分别为0.015～0.025mg/ml及0.10～0.20mg/ml。该生产工艺包括(1)制备多层脂质体；(2)制备小单层脂质体；(3)制备长春花属生物碱脂质体。本发明的优点是成品毒性小、包封率高、稳定性好；方法操作简便，可工业化生产。
文档编号A61K9/127GK1795859SQ20041010262
公开日2006年7月5日 申请日期2004年12月27日 优先权日2004年12月27日
发明者曹利人, 马洁 申请人:北京文卓医药生物制品技术开发有限公司, 中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所