专利名称：乳腺炎的治疗方法
技术领域：
本发明涉及反刍动物乳腺炎的治疗或预防。
乳腺炎即乳房发炎是一个难以解决的问题，对乳品工业来说尤其如此。乳腺炎是由于包括葡萄球菌属、链球菌属和其他种属在内的多种不同病原体中的任一病原体感染所致。但乳腺炎的治疗却有些困难。有一种可用的方法是“干母牛”疗法，即，在母牛停止泌乳后的停奶期对母牛进行治疗。对干母牛的治疗来说唯一得到公认的途径是经乳头向乳房内注入抗生素。然而抗生素在乳房内注入后在乳腺内的扩散可能会受到限制。此外，这种治疗途径有引入致乳腺炎病原体的危险。曾考虑过全身性给药，但这样做的问题是能否使药物在乳腺内达到足以产生药效的浓度。
本申请人现已意外地发现，使用美国专利4，820，695所述的化合物，能够有效地治疗乳腺炎。上述专利描述了某些大环内酯类抗生素衍生物。其中有一种衍生物被美国沿用名组织(the United States Adopted Names organization)命名为“提米考新(tilmicosin)”。提米考新和美国专利4，820，695的其他化合物可用来治疗乳腺炎。
因此，本发是明的一个方面提供了一种治疗或预防乳腺炎的方法，该方法包括在不晚于妊娠雌性反刍动物分娩前25天，给予该动物式Ⅰ化合物或其酸加成盐，其前提是如果该妊娠雌性反刍动物一直在泌乳，则在给药后直到分娩前保持不再进一步泌乳;
其中R为下式的饱和或不饱和仲氨基
其中氮原子是另一个碳环体系的一部分，该碳环体系选自含有5-16个环原子的单环或含有8-20个环原子的二环或三环体系，或者这样一种基团，该基团中有一个或多个碳原子被以下基团取代C1-C4烷基、C2-C4链烯基、C2-C4炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧羰基、羟基、C1-C4链烷酰氧基、卤素、卤-C1-C4烷基、-N(C1-C4烷基)2、-N(CH2)m、
(C1-C4烷基)2、
、氰基、亚乙二氧基、苄基、苯基、或被1-3个选自下列基团的取代基取代的苯基硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、氨基、或一或二(C1-C4烷基)氨基;
m是4-7的整数;
R1是
R2是氢;C1-C5链烷酰基或带有1-3个卤素取代基的C1-C5链烷酰基;苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙酰基;或带有1-5个卤素或甲基或1-2个甲氧基、硝基或羟基取代基的苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙酰基;
R3是羟基;C1-C5链烷酰氧基;带有1-3个卤素取代基的C1-C5链烷酰氧基;苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或带有1-5个卤素或甲基或1-2个甲氧基、硝基或羟基取代基的苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或
本发明可用于任何反刍动物，但对牛特别有用。在本发明的一个实施方案中，在动物正在泌乳时给药，但给药后要把动物作为干母牛进行控制，使其一直到下一次分娩前不再进一步泌乳。在另一个实施方案中，在分娩前治疗非泌乳动物如未产母牛。
式Ⅰ化合物皮下给药。其用量并不严格，只要求该用量能有效控制与乳腺炎有关的具体病原体。一般来说，每千克体重用0.5-10毫克就能对乳腺炎达到所要求的控制效果;在许多情况下，适宜用量为每千克体重2-8毫克。有效用量可以分成多个剂量给予，但这样做没有什么优越之处，所以优选单次给药。
式Ⅰ化合物最好经过配制以便于给药。兽医配药技术已经很成熟。美国专利4，820，695提出了许多制剂。下面的实施例1提出了一种优选制剂。
因此，本发明的第二方面提供式Ⅰ化合物或其酸加成盐在制备用于治疗或预防妊娠雌性反刍动物乳腺炎的皮下药物中的应用，
m是4-7的整数;
R1是
R2是氢;C1-C5链烷酰基或带有1-3个卤素取代基的C1-C5链烷酰基;苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙酰基;或带有1-5个卤素或甲基或1-2个甲氧基、硝基或羟基取代基的苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙酰基;
R3是羟基;C1-C5链烷酰氧基;带有1-3个卤素取代基的C1-C5链烷酰氧基;苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或带有1-5个卤素或甲基或1-2个甲氧基、硝基或羟基取代基的苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基;或
为使本发明在减少提米考新残留浓度的同时达到最大收益，给药时间参照预产期来选择。应在不晚于分娩前25天时给药，优选在不晚于分娩前30天时给药。这段时间既能保证对乳腺炎进行有效治疗，又能保证动物在产犊时体内的提米考新已消失。
用下列实施例来说明本发明。
实施例1制剂的制备取一定量的提米考新在水中打浆，加磷酸将pH调至6，并加入丙二醇。所得制剂的配方如下提米考新 300毫克/毫升丙二醇 250毫克/毫升该制剂适用于按本发明来治疗乳腺炎。
实施例2制备致乳腺炎微生物的野外分离物，针对这些微生物对提米考新进行体外评定。已知其中的许多微生物对抗生素具有抗性。有三种金黄色葡萄球菌对氨苄青霉素和青霉素都有抗性，有几种无乳葡萄球菌(Staphylococcus agalactiae)和乳房葡萄球菌(Staphylococcus uberis)对链霉素和三磺嘧啶有抗性。
对标准的培养液稀释试验对提米考新进行体外评定，结果如下。
表1乳腺炎病原体的体外易感性微生物 分离物数目 不同MIC(μg/ml)下的累积数0.195 0.39 0.78 1.56 3.12 6.25 ＞50金黄色葡萄球菌 (24) 0 2 14 24 - -无乳链球菌 (10) 0 3 8 10 - -停乳链球菌 (10) 5 7 10 - - -乳房链球菌 (10) - - - 2 5 10实施例3对青年母牛给予提米考新本实验采用九头青年母牛，它们经配种后在两个月内按预产期产犊。将它们关在干燥的牛栏中，喂以未加药的配种青年母牛饲料，并让其随时可饮淡水。每头牛在背外胸部一次注射10毫克/千克的实施例1制剂。在分娩后首次泌乳时从每头青年母牛体内收集乳汁和血清样品，然后在12、24、36、48、60、72、84、96、108、120、132、144、156和168小时后收集。用藤黄微球菌(ATCC 9341)作为试验微生物进行微生物学测定，测定乳汁和血清样品中的提米考新活性。在任何一个血清样品中都没有检测到提米考新活性。乳汁提米考新活性和产犊间隔列在表2中。
表2产犊前34-60天一次皮下注射10毫克/千克提米考新后青年母牛中的乳汁提米考新活性(微克/毫升)
NA无活性NS无样品1从处理到产犊的间隔(天)实施例4停乳时给予提米考新本实验采用九头处于泌乳晚期的荷斯坦乳牛作为研究对象。给乳牛喂以未加药的乳用完全饲料，并让其可随时饮用淡水。停乳时，九头乳牛都一次皮下注射5毫克/千克的实施例1制剂，以三头乳牛为一组进行分组，令各组的停药时间各为24、72和120小时。在每个停药期中，从所有乳牛的每只乳房中采集乳汁样品。然后处死乳牛，从所有乳牛采集每只乳房的乳房组织样品。用HPLC测定法测定乳汁和乳房组织中的提米考新浓度。用对照乳汁和乳房组织制做标准曲线。乳汁和乳房组织各自的提米考新浓度分别列在表3表4中。每头乳牛的四只乳房中乳汁和乳房组织中提米考新的浓度比较一致，只有少数例外。
还测定了上述三组中每一组的平均值。对于24、72和120小时的停药期来说，乳汁中提米考新的平均浓度(微克/毫升)分别为4.30、2.16和1.85，而乳房组织中提米考新的平均浓度(微克/克)分别为3.57、3.34和5.97。处理后24、72和120小时时乳房组织与乳汁中提米考新平均浓度的比例为0.83、1.55和3.23，这表明在此期间提米考新在乳房组织中的浓度持续高于乳汁中的浓度。乳汁和乳房组织中提米考新的浓度均高于实施例2提出的抑制几乎所有受试分离菌生长的浓度。
表3乳汁提米考新浓度(微克/毫升)停药时间 取样乳房动物编号 (小时) RF RR LF LR 平均值 标准差727 24 4.21 5.84 4.67 5.16 4.97 0.70400 24 4.90 3.77 3.86 4.58 4.28 0.55754 24 3.16 4.29 3.46 3.63 3.64 0.484.30 0.67407 72 2.07 2.27 1.74 1.87 1.99 0.23760 72 3.84 3.58 2.73 2.42 3.14 0.68390 72 1.34 1.21 1.41 1.48 1.36 0.122.16 0.90386 120 0.66 1.84 0.97 0.82 1.07 0.53789 120 2.46 2.66 2.46 2.50 2.52 0.10770 120 0.55 2.71 1.83 2.71 1.95 1.021.85 0.73
表4乳房组织提米考新浓度(微克/克)停药时间 取样乳房动物编号(小时) RF RR LF LR 平均值 标准差727 24 4.38 3.99 3.87 4.66 4.23 0.36400 24 2.58 2.69 4.12 3.61 3.25 0.74754 24 3.75 2.75 3.10 3.27 3.22 0.423.57 0.57407 72 3.55 2.90 3.71 1.99 3.04 0.78760 72 0.51 4.26 6.12 1.67 3.14 2.53390 72 4.80 3.26 3.68 3.68 3.85 0.663.34 0.44386 120 3.15 5.47 3.94 3.77 4.08 0.99789 120 10.50 6.50 11.20 5.79 8.50 2.75770 120 2.63 5.34 7.37 6.03 5.34 2.005.97 2.28实施例5对患乳腺炎的停乳期乳牛给予提米考新以正进入停乳期的若干乳牛来进一步评定本发明，这些乳牛被诊断为由于金黄色葡萄球菌感染而在一只或多只乳房中患有乳腺炎。将经过诊断的动物分成不同的五组。一组动物不做处理，作为对照;另一组动物用常规疗法治疗，即乳头注入Cefa-Dri 300毫克头孢吡硫(Ayerst);其余三组按本发明进行治疗，即皮下给予按实施例1制备的提米考新制剂，这样给予提米考新的剂量在三组中各不相同，分别为2毫克/千克、4毫克/千克、或8毫克/千克。然后使所有动物都保持在典型的干母牛条件下直至分娩后，此时再评定所有动物由金黄色葡萄球菌所致的乳腺炎。结果如下
治疗方法 感染乳房数 治愈乳房数无(对照) 1 0Cefa-Dri300毫克头孢吡硫 5 3提米考新2毫克/千克 1 04毫克/千克 7 48毫克/千克 5 3这样，在被金黄色葡萄球菌感染的总共13只乳房中，按本发明进行治疗治愈了7只乳房。
权利要求
1.一种治疗或预防乳腺炎的方法，该方法包括在不晚于妊娠雌性反刍动物分娩前25天，皮下给予该动物式Ⅰ化合物或其酸加成盐，其前提是如果该妊娠雌性反刍动物一直在泌乳，则在给药后直到分娩前保持不再进一步泌乳；
其中R为下式的饱和或不饱和仲氨基
其中氮原子是另一个碳环体系的一部分，该碳环体系选自含有5-16个环原子的单环或含有8-20个环原子的二环或三环体系，或者这样一种基团，该基团中有一个或多个碳原子被以下基团取代C1-C4烷基、C2-C4链烯基、C2-C4炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧羰基、羟基、C1-C4链烷酰氧基、卤素、卤-C1-C4烷基、-N(C1-C4烷基)2、-N(CH2)m、
(C1-C4烷基)2、
、氰基、亚乙二氧基、苄基、苯基、或被1-3个选自下列基团的取代基取代的苯基硝基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、氨基、或一或二(C1-C4烷基)氨基；m是4-7的整数；R1是
R2是氢；C1-C5链烷酰基或带有1-3个卤素取代基的C1-C5链烷酰基；苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙酰基；或带有1-5个卤素或甲基或1-2个甲氧基、硝基或羟基取代基的苯甲酰基、苯乙酰基或苯丙酰基；R3是羟基；C1-C5链烷酰氧基；带有1-3个卤素取代基的C1-C5链烷酰氧基；苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基；或带有1-5个卤素或甲基或1-2个甲氧基、硝基或羟基取代基的苯甲酰氧基、苯乙酰氧基或苯氧乙酰氧基；或
2.根据权利要求1的方法，其中妊娠雌性反刍动物一直在泌乳。
3.根据权利要求1或2的方法，其中式Ⅰ化合物为提米考新。
4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中式Ⅰ化合物作为一次治疗给予。
5.根据权利要求1至4中任一项的方法，其中反刍动物为乳牛。
6.根据权利要求1的方法，其中妊娠雌性反刍动物并未一直在泌乳。
7.根据权利要求6的方法，其中式Ⅰ化合物为提米考新。
8.根据权利要求6或7的方法，其中式Ⅰ化合物作为一次治疗给予。
9.根据权利要求6或7的方法，其中反刍动物为青年母牛。
全文摘要
本发明涉及美国专利4,820,695中的提米考新和其他化合物在治疗非泌乳反刍动物如乳牛的乳腺炎中的应用。
文档编号A61K31/365GK1066269SQ9210313
公开日1992年11月18日 申请日期1992年4月30日 优先权日1991年5月2日
发明者T·松冈, D·G·麦克拉里, E·E·奥泽, T·D·汤姆森 申请人:伊莱利利公司