专利名称：用于稳定病毒颗粒、多肽或生物材料的赋形剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及病毒和多肽的储存稳定性配制品(制剂)。
背景技术：
一些生物分子足够稳定，可以分离、纯化它们，然后在室温下储存在溶液中。然而，这对于许多材料和涉及在低温下储存的技术是不可行的，已经试图加入稳定剂、冷冻干燥、真空形成和自然干燥以确保货架保存。尽管这些技术的可用性，但是一些生物材料在储存期间仍然显示出令人不满意的稳定性水平，并且一些技术导致增加的成本和不便。例如，冷冻运输和储存是昂贵的。而且，在发展中世界的国家中，对于运输诸如疫苗的药物，冷冻运输通常是不可用的。特别地，冷冻干燥或冻干作用的应力对一些生物材料可能是破坏性非常大的。生 物药品的冷冻干燥涉及冷冻热敏性生物材料的溶液或悬浮液，之后是一次和二次干燥。该技术是基于在没有溶液融化的情况下，在真空下和零度以下的温度下升华。冷冻干燥代表了生产固体蛋白质和疫苗药物的关键步骤。从冻结的生物材料中的水蒸汽扩散的速率非常低，因此该过程很费时。另外，冷冻和干燥阶段都引入了能够使蛋白质解折叠或变性的应力。蛋白质是具有定义的一级、二级、三级以及在某些情况下四级结构的分子。该结构在赋予蛋白质其特定生物功能中发挥重要作用。不幸的是，诸如蛋白质的生物药物的结构复杂性使得它们易受各种过程的影响，这些过程导致其结构的和功能的不稳定性。必须防止构象完整性和官能团的降解。各种共价和非共价反应或溶液中的改变(改性，修饰)可以导致不稳定性。通常，降解分为两种主要的类型首先物理降解或非共价途径降解，和其次共价降解途径。蛋白质可以经由诸如界面吸附和团聚的物理过程降解，其可以显著降低蛋白质药物的潜能和稳定性。第二个后果是，由在界面处的吸附介导的解折叠通常可以是溶液中的对于蛋白质不可避免的团聚的引发步骤。由于搅拌、温度或PH引发的应力，蛋白质的核心暴露在疏水表面可以导致吸附；其所有可以导致团聚。蛋白质可以经受化学修饰的影响，如氧化、异构化、水解、不规则二硫化(disulfide scrambling)、β -消除、脱酰胺以及加合物的形成。降解的主要水解机制包括肽键水解、天冬酰胺和谷氨酰胺的脱酰胺和天冬氨酸的异构化。水解降解途径的共同特点是对于反应速率，一个重要的配制品(制剂)变量是pH。因为蛋白质的稳定性可以显著地影响治疗的安全性和效能，生物药物配制品(制齐U)中各组分的组合可以影响蛋白质降解的程度。生物药物的配制方法也可以影响给药的容易性和频率。由于不稳定性和团聚的问题，目前蛋白质最稳定的配制品不是液体配制品。典型地，冷冻干燥(冻干)蛋白质以提供蛋白质的稳定配制品。填充剂通常存在于配制品中。以干燥的形式分配和储存冷冻干燥的配制品，典型地作为密封的小瓶、安瓿或注射器中的粉齐U。例如，WO 97/04801描述了抗-IgE抗体的稳定的冻干配制品，其必须在使用之前即时重建(重新溶解配成原来的溶度)。W0-A-2006/0850082报道了包含糖类、诸如组蛋白蛋白质的载质(chargedmaterial)以及干燥敏感性或热敏感性生物组分的经干燥的或经保存的产物。糖类形成非晶固体基体。然而，如果将保存的生物组分给予人或动物，组蛋白可以具有免疫学后果。WO 2008/114021描述了用于保存病毒颗粒的方法。该方法包括，干燥一种或多种糖类、聚乙烯亚胺和病毒颗粒的水性溶液以形成包含病毒颗粒的非晶固体基体。基于聚乙烯亚胺的数均摩尔质量(数均分子量，Mn)，水性溶液包含浓度为15μΜ以下的聚乙烯亚胺，并且糖类的浓度，或者如果存在多种糖类，总的糖类浓度大于O. 1Μ。WO 2010/035001描述了用于保存多肽的方法，其中，在一种或多种糖类和聚乙烯
亚胺(PEI)存在下，干燥多肽的水溶液，例如冷冻干燥。得到的干燥组合物典型地以密封小瓶、安瓿或注射器中的稳定干燥粉剂提供。由粉剂重建溶液以给予患者多肽，例如通过注射。然而，干燥，特别是冷冻干燥是昂贵和费时的过程。如果可以避免使用它们，将是有利的。生物活性材料在加热和干燥之后通常经受活性损失。另外，在使用多肽之前需要在溶剂中重建冷冻干燥的粉剂，这很不方便。实际上，进行重建步骤的患者或医疗专业人员如果没有正确的进行该步骤，可能带来风险。因此，提供不需要重建的液体病毒和蛋白质配制品以便使用是有利的。因此，对于稳定的液体可注射病毒和蛋白质配制品具有需要。对于高度浓缩的稳定的液体可注射抗体配制品具有需要。

发明内容
目前出乎意料地发现了，通过使用某些赋形剂和可选地一种、二种或多种糖类，可以提供病毒颗粒或多肽的稳定储存的即用水性溶液。这些配制品保持长期稳定性。它们可以在没有干燥或冷冻干燥步骤的情况下制备。它们避开了在使用之前由冷冻干燥的粉剂重建溶液的需要。还发现，这些赋形剂和可选地一种、二种或多种糖类在生产期间可以保存(防腐)病毒颗粒或多肽。而且，已经发现，这些赋形剂和可选地一种、二种或多种糖类可以保护取自人或动物的样品。因此，本发明提供了无菌的药用水性溶液，典型地适于非肠道(肠道外)给予，该溶液提供在密封容器中，并且包括-药用水性溶剂；-病毒颗粒或生理活性多肽；-选自以下的赋形剂聚乙烯亚胺；化学式(I)的化合物或其生理可接受的盐或酯；或化学式(II)的化合物或其生理可接受的盐或酯；
权利要求
1.一种无菌药用水性溶液，所述溶液是以密封的容器提供的，并且包括 -药用水性溶剂； -病毒颗粒或生理活性多肽； -选自以下的赋形剂聚乙烯亚胺；化学式(I)的化合物或其生理学可接受的盐或酯
2.根据权利要求I所述的溶液，其包含病毒颗粒。
3.根据权利要求2所述的溶液，其中，(a)所述病毒颗粒由活病毒或死病毒构成，或(b)所述病毒颗粒由活病毒或死病毒构成，并且所述活病毒是全病毒或减毒病毒。
4.根据权利要求2或3所述的溶液，其包括(a)选自腺病毒科(Adenoviridae)、正粘病毒科(Orthomyxoviridae )、副粘病毒科(Paramyxoviridae )、细小病毒科(Parvovir idae)、小核糖核酸病毒科(Picornoviridae)、痘病毒科(Poxviridae)的病毒,或(b)选自腺病毒科、正粘病毒科、副粘病毒科、细小病毒科、小核糖核酸病毒科、痘病毒科的病毒，所述病毒选自腺病毒、痘苗病毒、流感病毒或麻疫病毒。
5.根据权利要求I所述的溶液，其包括生理活性多肽。
6.根据权利要求5所述的溶液，其中，所述多肽是 Ca)激素、生长因子、肽或细胞因子； (b)抗体或其抗原-结合片段或其配体-结合片段； (C)氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶或连接酶；或(d)疫苗免疫原。
7.根据权利要求6所述的溶液，其中，所述多肽是 (i)速激肽、血管活性肠肽、胰多肽相关肽、阿片肽或降钙素肽； (ii)其单克隆抗体或片段； (iii)嵌合的、人化的或人抗体、或其片段； (iv)氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶或连接酶；或 (V)全长病毒或细菌蛋白、糖蛋白或脂蛋白；或其片段
8.根据前述权利要求中任一项所述的溶液，其中，所述赋形剂是具有数均摩尔质量(Mn)在20至1，OOOkDa或I至10，OOODa的聚乙烯亚胺。
9.根据权利要求I至7中任一项所述的溶液，其中，所述赋形剂是N，N-二(C^6烷基)-甘氨酸、N, N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸、或N-CV6烷基-甘氨酸或其生理可接受的盐或酯。
10.根据权利要求9所述的溶液，其中，所述赋形剂是(a)N，N-二甲基甘氨酸、N, N, N-三甲基甘氨酸、或N-甲基甘氨酸或其生理可接受的盐或酯，或(b) N-甲基甘氨酸、N, N- 二甲基甘氨酸或N，N, N-三甲基甘氨酸或其盐酸盐。
11.根据权利要求10所述的溶液，其中，所述赋形剂是N，N-二甲基甘氨酸或其生理可接受的盐或酯。
12.根据权利要求I至7中任一项所述的溶液，其中，所述赋形剂是 -化学式(IA)的化合物或其生理可接受的盐或酯
13.根据权利要求I至7中任一项所述的溶液，其中，所述赋形剂是二甲基砜、N-甲基-甘氨酸、N, N- 二甲基-甘氨酸、N, N, N-三甲基甘氨酸、椰油酰胺丙基甜菜碱、脯氨酸甜菜碱或S-甲基-L-甲硫氨酸。
14.根据前述权利要求中任一项所述的溶液，其中，(a)存在蔗糖，或(b)存在蔗糖并且还存在棉子糖。
15.根据前述权利要求中任一项所述的溶液，所述溶液适宜肠道外给予。
16.一种无菌药用水性溶液，所述溶液包括 -药用水性溶剂； -如在权利要求1、3或4中任一项定义的病毒颗粒； -如在权利要求9至11中任一项限定的N- (Cp6烷基)-甘氨酸、N，N- 二((V6烷基)-甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸或其生理可接受的盐或酯；以及-化学式(IIC)的砜化合物
17.根据权利要求16所述的溶液，其中，(a)所述N-(C^6烷基)-甘氨酸、N，N-二((^6烷基)-甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸或其盐或酯的浓度是从O. I至I. 5M，和/或(b)所述化学式(IIC)的砜化合物是甲磺酰基甲烷，和/或(c)所述化学式(I)的砜化合物的浓度是从O. I至I. 5M，和/或(d)所述水性溶液包括非还原糖类或糖醇；和/或(e)所述水性溶液包括蔗糖或甘露醇；和/或(f)所述水性溶液的所述糖类的浓度是从O. 05至1M，和/或(g)所述溶液是以密封的容器提供的。
18.根据前述权利要求中任一项所述的水溶液，所述溶液进一步包括 -佐剂； -生理可接受的缓冲剂；和/或 -渗透压调节剂；和/或 -防腐剂。
19.根据前述权利要求中任一项所述的溶液，所述溶液是(a)等渗的，和/或(b)是在氮气下以密封的容器提供的。
20.根据前述权利要求中任一项所述的溶液，其中(a)所述溶液是以密封的小瓶、安瓿、注射器、药筒、柔性袋或玻璃瓶提供的，和/或(b)存在病毒颗粒或多肽的单位剂量。
21.一种用于制备如权利要求I中的无菌药用溶液的方法，所述方法包括 (a)提供药用水性溶液中的所述病毒颗粒或生理活性多肽、赋形剂、以及可选地，一种或多种糖类的无菌溶液； (b)将所述溶液密封在容器中。
22.根据权利要求21所述的方法，其中，使所述药用水性溶剂中的所述病毒颗粒或多肽、赋形剂以及可选地，一种或多种糖类的所述溶液通过步骤(a)中的无菌过滤器。
23.一种用于制备如权利要求I中的无菌药用溶液的方法，所述方法包括 (a)将药用水性溶剂中的病毒颗粒或生理活性多肽、赋形剂以及可选地，一种或多种糖类的溶液密封在容器中；以及 (b)将所述容器中的所述溶液灭菌。
24.根据权利要求21至23中任一项所述的方法，其中，所述容器是小瓶、安瓿、注射器、药筒、柔性袋或玻璃瓶。
25.一种即用的、储存稳定的水性溶液，所述溶液是以密封的容器提供的，并且包括 -水性溶剂； -如权利要求1、3或4中任一项限定的病毒颗粒或如权利要求1、6或7中任一项限定的生理活性多肽； -如权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂；以及 -可选地，一种或多种糖类。
26.根据权利要求25所述的溶液，其中，所述溶液是以密封的小瓶、安瓿、注射器、药壳、弹性袋或玻璃瓶提供的。
27.根据权利要求25或26所述的溶液，其中，(a)存在蔗糖，或(b)存在蔗糖还存在棉子糖。
28.根据权利要求25至27中任一项所述的溶液，所述溶液进一步包括 -佐剂； -生理可接受的缓冲剂；和/或 -张力调节剂；和/或 -防腐剂。
29.根据权利要求25至28中任一项所述的溶液，所述溶液(a)是等渗的，和/或(b)是在氮气下以所述密封的容器提供的。
30.根据权利要求25至29中任一项所述的溶液，其中，存在单位剂量的病毒颗粒或多肽。
31.一种用于制备如权利要求25中所述的溶液的方法，所述方法包括 (a)提供水性溶剂中的所述病毒颗粒或多肽、赋形剂、以及可选地，一种或多种糖类的溶液； (b)将所述溶液密封在容器中。
32.根据权利要求31所述的方法，其中，使步骤(a)中的所述水性溶剂中的所述病毒颗粒、赋形剂以及可选地，一种或多种糖类的所述溶液通过无菌过滤器。
33.一种用于制备如在权利要求25中所述的无菌溶液的方法，所述方法包括(a)将水性溶剂中的所述病毒颗粒或多肽、赋形剂以及可选地，一种或多种糖类的溶液密封在容器中；以及 (b)将所述容器中的所述溶液灭菌。
34.一种用于制备如在权利要求16中限定的无菌药用溶液的方法，所述方法包括提供药用水性溶剂中的病毒颗粒--(Cm烷基)-甘氨酸、N，N-二((V6烷基)-甘氨酸或N, N, N-三((V6烷基)-甘氨酸或其生理可接受的盐或酯；如在权利要求16中限定的化学式(IIC)的砜化合物；以及可选地，一种或多种糖类的无菌溶液；
35.根据权利要求34所述的方法，其中，(a)在无菌条件下混合所述溶液的各组分，或混合所述溶液中的各组分并将所述溶液灭菌，或(b) 在无菌条件下混合所述溶液的各组分，或混合所述溶液中的各组分、 将所述溶液灭菌并且将所述无菌溶液密封在容器中。
36.根据权利要求34或35所述的方法，包括 Ca)提供药用水性溶剂中的所述病毒颗粒；所述Ν-((；_6烷基)-甘氨酸、N, N- 二((V6烷基)-甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)-甘氨酸或其盐或酯；所述化学式(I)的砜化合物；以及可选地，一种或多种糖类的溶液；以及 (b)使所述溶液通过灭菌过滤器；以及 (c)可选地，将所述溶液密封在容器中。
37.根据权利要求34或35所述的方法，包括 (a)将药用水性溶剂中的病毒颗粒烷基)_甘氨酸、N，N-二((V6烷基)_甘氨酸或N，N, N-三((V6烷基)-甘氨酸或其盐或酯；所述化学式(I)的砜化合物；以及可选地，一种或多种糖类的溶液密封在容器中；以及 (b)将在所述容器中的所述溶液灭菌。
38.根据权利要求31至37中任一项所述的方法，其中所述容器是小瓶、安瓿、注射器、药筒、柔性袋或玻璃瓶。
39.一种提供即用的、储存稳定的水溶液的密封容器，所述容器包括 -水性溶剂； -如权利要求1、3或4中任一项限定的病毒颗粒； -如权利要求9至11中限定的N-(Cu烷基)_甘氨酸、N，N- 二(Cu烷基)_甘氨酸或N, N, N-三((V6烷基)-甘氨酸或其生理可接受的盐或酯； -如权利要求16或17中限定的化学式(IIC)的砜化合物；以及 -可选地，一种或多种糖类。
40.根据权利要求39所述的密封容器，其中，(a)在所述溶液中所述(N-Ch烷基)-甘氨酸、N, N- 二(Cu烷基)_甘氨酸或N，N, N-三(Cu烷基)_甘氨酸或其盐或酯的浓度是从O. I至I. 5M，和/或(b)在所述溶液中所述化学式(IIC)的砜化合物的浓度是从O. I至I. 5M，和/或c)所述溶液包含非还原糖或糖醇，和/或(d)所述溶液包含蔗糖或甘露醇，和/或(e)所述溶液中的所述糖类的浓度是从O. 05至1M。
41.根据权利要求39或40所述的密封容器，其中，(a)所述溶液进一步包含佐剂；生理可接受的缓冲剂；和/或张力调节剂；和/或防腐剂，和/或(b)所述溶液是等渗的，和/或(d)所述密封容器是密封的小瓶、安瓿、注射器、药筒、柔性袋或玻璃瓶，和/或(e)所述溶液是在氮气下提供的，和/或(f)在所述溶液中存在单位剂量的病毒颗粒。
42.一种用于生产如权利要求39中限定的密封容器的方法，所述方法包括提供药用水性溶剂中的病毒颗粒；(N-C1^6烷基)-甘氨酸、N，N- 二(Cu烷基)-甘氨酸或N，N, N-三((^6烷基)_甘氨酸或其生理可接受的盐或酯；如在权利要求16中限定的化学式(IIC)的砜化合物；以及可选地，一种或多种糖类的溶液；以及将所述溶液密封在容器中。
43.根据权利要求42所述的方法，其中，(a)在无菌条件下混合所述溶液的各组分，或混合所述溶液中的各组分并将所述溶液灭菌，或(b)在无菌条件下混合所述溶液的各组分，或混合所述溶液中的各组分、将所述溶液灭菌并且在将所述溶液引入容器中之前通过使溶液通过无菌过滤器使所述溶液无菌，和/或(c)所述容器是小瓶、安瓿、注射器、药筒、柔性袋或玻璃瓶。
44.一种用于制备病毒颗粒或多肽的药用水性溶液的方法，所述方法包括 Ca)提供所述病毒颗粒或生理活性多肽、如在权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂、以及可选地，一种或多种糖类的溶液； (b)去除所述赋形剂。
45.根据权利要求44所述的方法，所述方法进一步包括 (c)将所述溶液密封在容器中。
46.如在权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂以及可选地一种或多种糖类在生产病毒或多肽的药用水性溶液期间保护所述病毒颗粒或多肽的应用。
47.一种用于保存取自人或动物的样品的方法，所述方法包括提供(i)所述样品，(ii)如在权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂，以及(iii)可选地一种或多种糖类的水溶液。
48.一种用于获得和保存来自人或动物的样品的方法，所述方法包括(a)获得来自所述人或动物的所述样品，以及(b)制备所述样品、如在权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂、和可选地一种或多种糖类的水溶液。
49.一种水性溶液，所述水性溶液包括(i)取自人或动物的样品，(ii)如在权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂，以及(iii)可选地一种或多种糖类。
50.根据权利要求49所述的水溶液，所述水溶液密封在容器中，并可选地储存在冰箱或冷冻器中。
51.如权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂和可选地一种或多种糖类用于保存取自人或动物的样品的应用。
52.如权利要求I或8至13中任一项限定的赋形剂和可选地一种或多种糖类在冷冻干燥包含病毒颗粒的溶液之前用于保存所述溶液的应用。
全文摘要
一种无菌药用水性溶液，该溶液是以密封的容器提供的，并且包括药用水性溶剂；病毒颗粒或生理活性多肽；选自聚乙烯亚胺、化学式(I)的化合物或其生理学可接受的盐或酯；或化学式(II)的化合物或其生理学可接受的盐或酯的赋形剂；以及可选地，一种或多种糖类。
文档编号A61K47/26GK102892427SQ201180018128
公开日2013年1月23日 申请日期2011年3月31日 优先权日2010年3月31日
发明者杰弗里·德鲁, 戴维·伍德华德, 约翰·班布里奇, 阿曼达·科尔泰恩 申请人:稳定性科技有限公司