专利名称：米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，更具体的是涉及米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂及其制备方法。
背景技术：
自上世纪70年代以来，我国癌症死亡率一直呈持续增长趋势，70年代、90年代和 21世纪初每年死于癌症的人数分别为70万、117万和150万，癌症已经成为严重威胁我国人民健康的头号杀手。因此预防及治疗癌症是我国乃至全球所要面临的一个重大问题。治疗癌症常用的化疗药物很多，其中米托蒽醌便是那一种有效地抗肿瘤药物，尤其对乳腺癌及恶性淋巴癌的治疗具有很好的疗效。然而化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时也会对人体的正常细胞造成极大的损害，从而引起其他的副作用，对人体造成伤害。MA为一种蒽醌抗肿瘤新药，其结构及抗癌作用与阿霉素相近，因其无氨基糖结构， 不产生自由基，且有抑制脂质过氧化作用，故对心脏毒性较低。其作用机制表明，可视MA为细胞周期非特异性药物，因它可杀灭任何细胞周期的癌细胞，增殖与非增殖细胞均受到抑制。分裂细胞比休止细胞对本品更敏感，S后期对米托蒽醌最敏感。它对恶性肿瘤细胞的作用是通过以下两种机制(I)嵌入作为嵌入剂，它能嵌入到DNA碱基之间从而阻断DNA合成与转录 (transcription),导致DNA链的胶连和链结构的破坏。(2)酶抑制可抑制II型拓扑异构酶(topoisomerase)的活性,从而导致基因组 DNA的崩解。纳米药剂的研制制有望解决化疗毒副作用这个长期困扰人们的问题。纳米药剂指利用三维空间中至少有一维处于纳米尺度范围(I-IOOnm)或由它们作为基本单元构成的纳米材料为基材，来承载药物而制备的新型药物制剂。这种新型的药物制剂能够利用实体瘤的高通透性和滞留效应(enhanced permeability and retention effect,EPR),有选择的渗透并滞留在肿瘤组织部位，从而可以增加药效并减少系统副作用。因而我们希望通过对米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂的研究，来以此能改善现有的纳米治疗技术。

发明内容
本发明的目的是设计并制备一种新型的米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂。本技术与现有的制备方法相比，制得的磷酸氢钙纳米粒子更加均匀，粒径也更小(100纳米以下)，因而可以在药物载体方面有更好的应用研究。米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂的制备方法，步骤如下I)分别配置100 900毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取一定量的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为5 : I I I)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到相应的有机相(氯化钙水溶液与有机相体积比为I : 50 I : 200)中，超声均匀，组成A乳液，备用。
3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到相应的有机相中，有机相的量与步骤2)取的有机相相同，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌O. 5 2小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。注其中有机相由己醇，表面活性剂triton X-100和环己烷按照体积比I : I : 2 组成。整个制备过程简单快捷，制备周期最长为三个小时，产率高。所制备的米托蒽醌纳米磷酸氢钙粒径在40到100纳米之间，粒径分布均匀。本发明同传统的乳化法制备纳米粒子的优势在于I、采用本工艺制备米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂，制备过程极其简单。通过将氯化钙和磷酸氢二钠分别同有机相形成乳液，然后将两种乳液混合均匀的方法，可以大大提高乳液中乳滴的稳定性，制备的粒子粒径较传统的乳化法更均匀，因而使用更为安全有效。2、所制备的磷酸氢钙具有优良的生物相容性和生物可降解性。磷酸氢钙可作补钙剂被人们服用，具有安全可靠的性能，并且在肿瘤组织的酸性条件下，磷酸氢钙能够迅速降解来释放出包埋的药物，从而提高治疗效果。因此，与现有的米托蒽醌药物制剂相比，本发明涉及的米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂具有制备工艺简单，载药率高等特点，制剂粒径在40到150纳米之间，载药率在20%到 40%。有望有效降低米托蒽醌的毒副作用，故对癌症的治疗具有极其重要的研究价值。


图I :按照以前方法制备的米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂的扫描电镜照片。图2 :按照实施例3制备的米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂的扫描电镜照片。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。实施例I :I)分别配置100毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. I毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 5 I)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到5毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到5毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌2小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。实施例2 I)分别配置200毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. 2毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 5 I)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到5毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。
3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到5毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌2小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。实施例3 I)分别配置300毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. 3毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 3 1)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到10毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到10毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌I小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。制备的样品如图2所示，与现有技术生产的图I相比，粒径更加均匀可控，均在100 纳米以下。实施例4 I)分别配置450毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. 3毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 3 1)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到10毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到10毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌I小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。实施例5 I)分别配置600毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. 5毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 3 1)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到10毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到10毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌O. 5小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。实施例6 I)分别配置750毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. 5毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 3 1)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到20毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到20毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌O. 5小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。实施例7:I)分别配置900毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用。2)取O. 5毫升的氯化钙加入相应的米托蒽醌(氯化钙与米托蒽醌摩尔比为 5 1)，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液加入到20毫升有机相中，超声均匀，组成A乳液，备用。3)取与含有米托蒽醌药物的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到20毫升有机相中，超声均匀，组成B乳液，备用。4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌O. 5小时。5)将步骤四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后离心，最后将样品自然烘干。实施例8 形态观察、粒径及其分布测定。取样品溶液经超速离心分离后，取出沉淀物，加蒸馏水少量使分散，滴于碳支持膜上制样，在透射电镜下观察其形貌状态并拍照，结果如图2所述取制备的微乳样品适量，稀释，然后用粒径测定仪测定微乳粒径及分布。透射电镜下观察到米托蒽醌纳米磷酸钙微乳液呈均匀规则的球形粒子。实验测得的米托蒽醌纳米磷酸钙微乳粒径在40_100nm范围内均匀分布。实施例9 载药量的测定取上清液，加入一定量的Hcl，使药物释放出来，测定阿霉素的吸光度A，由药物浓
度和吸光度的关系的出来药物的浓度从而求出盐酸米诺环素的含量，则
#7 里· ,。/、微乳种药物含量ιΛΛ()/
■里(%)= 題 Xl_本实验的载药量计算如下所示所取得纳米碳酸钙粒子的量0. 8-lmg,吸光值X为O. 272-0. 288，药物浓度计算公式为y = O. 2192X+0. 004 计算的药物浓度为 O. 06362-0. 06713mg/ml药物总质量0·1909-0. 2014。
权利要求
1.一种米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂的制备方法，步骤如下1)分别配置100 900毫摩尔每升的氯化钙和磷酸氢二钠水溶液，备用；2)取氯化钙水溶液加入米托蒽醌，氯化钙与米托蒽醌摩尔比为5: I I : 1，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌的氯化钙水溶液加入到有机相中，氯化钙水溶液与有机相体积比为I : 50 I : 200，超声均匀，组成A乳液，备用；3)取与含有米托蒽醌的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到有机相中，有机相的量与步骤2)取的有机相相同，超声均匀，组成B乳液，备用；4)在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌O.5 2小时；5)将步骤四中的混合溶液加入到乙醇中破乳，然后离心并用乙醇洗涤，最后将样品自然烘干；上述有机相由己醇，表面活性剂triton X-100和环己烷按照体积比I : I : 2。
2.权利要求I的米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂，其特征是制剂粒径在40到150纳米之间，载药率在20%到40%。
全文摘要
本发明涉及米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂及其制备方法。取氯化钙水溶液加入米托蒽醌，氯化钙与米托蒽醌摩尔比为5∶1～1∶1，超声分散均匀后，将含有米托蒽醌的氯化钙水溶液加入到有机相中，氯化钙水溶液与有机相体积比为1∶50～1∶200，超声均匀，组成A乳液；取与含有米托蒽醌的氯化钙水溶液相同体积的磷酸氢二钠水溶液，将其加入到有机相中、超声均匀，组成B乳液；在磁子搅拌的条件下，将B乳液缓慢加入A乳液中，加入后，搅拌0.5～2小时；混合溶液加入到乙醇中破乳，然后离心并用乙醇洗涤，最后将样品自然烘干；采用本发明制备米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂，制备工艺简单，制剂粒径在40到150纳米之间，载药率在20％到40％。
文档编号A61K9/14GK102579355SQ20121007379
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月19日 优先权日2012年3月19日
发明者常津, 王小敏, 王汉杰, 王生 申请人:天津大学