专利名称：去氧氟尿苷注射液的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的药物制剂，特别是涉及一种抗肿瘤药物去氧氟尿苷的注射用溶液制剂。
背景技术：
癌症是对人类生命威胁最大的疾病之一，其死亡率在全世界仅次于心血管疾病占第二位，其中消化道肿瘤发病率最高。近年来，5-氟尿嘧啶(5-FU)及其衍生物5-氟-2′-去氧尿嘧啶核苷(FUDR)和呋喃氟尿嘧啶(FT-207)等目前已被公认为有效的抗肿瘤药物。5′-去氧-5-氟尿苷(5′-DFUR)是继上述化合物之后合成的又一个新的具有很强抗肿瘤活性的氟尿嘧啶衍生物，其抗肿瘤效果明显比5-FU、FUDR和FT-207好，而毒副作用最小，特别对消化道肿瘤抑制作用最强。去氧氟尿苷的大鼠口服生物利用度平均为63.4±16.9％。人口服生物利用度在48.0～80.0％之间，平均为65.0％。而5-FU口服吸收不规则，个体间生物利用度差异大；起效快，最高血浓度达峰时间在1小时左右，具有较长的半衰期(T1/2为119min)，24h仍保持较高的血浓度，而5-FU的T1/2仅为10～20min；毒性低，对小鼠口服、静注、皮下注射的LD50分别为＞5000、＞1000和2000mg/kg；疗效好，Bollage W等报道，如将半致死量(LD50)与对肉瘤S180抑制作用达到67％所需剂量之比称为治疗比，其结果为

以往的氟尿嘧啶系列药物在服药后，主要由肝脏的药物代谢酶或自然分解转换成5-FU，而5′-DFUR是5-FU的前体药物，在细胞代谢研究中发现，在体内5′-DFUR能被嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)转化成游离的5-FU而显示抗肿瘤活性。PyNPase在肿瘤组织中的活性大大高于正常组织和血清，且专一性强，因而5′-DFUR被转化成有活性的5-FU的浓度在肿瘤组织中大大高于正常组织和血清。所以5′-DFUR的抑瘤作用比上述药物高，毒性小，具有其独特的优点。5’-DFUR对肿瘤细胞有选择性的抑制作用，特别对乳腺癌、胃癌、直肠癌和结肠癌等有特别高的作用；5′-DFUR通过PyNPase的作用，能抑制肿瘤恶病体质诱导因子，从而改善由于恶病体质所致的体重下降、血糖下降、运动能力下降和对化疗的反应降低等一系列症状，使癌症病人的生活质量得到提高；5′-DFUR与PyNPase一起对恶性肿瘤细胞的扩散有很强的抑制作用，因而能延长癌症患者的生存寿命。大鼠口服15、35、85mg/kg/天，连续13周，未显示明显的毒性。给大鼠口服连续5周明显出现造血系统、淋巴组织及生殖器官毒性的剂量5′-DFUR、FT-207及5-FU分别为400、200和20mg/kg/天。FUDR、FT-207及5-FU在对肿瘤细胞产生抑制作用的剂量时就会引起白细胞减少，而5′-DFUR在不引起白细胞减少的剂量时就产生较强的抑瘤作用。说明5′-DFUR的毒副作用小，尤其对免疫系统抑制轻微，因此本品特别适用于老年病人、免疫功能低下或晚期癌症病人及用5-FU等抗癌药不能耐受的病人。
临床方面国外专家分别做了如下研究注射用去氧氟尿苷4g/m2×5治疗头颈部鳞癌，12例病人1例达CR，2例达PR，有效率25％。注射用去氧氟尿苷4g/m2×5治疗晚期大肠癌，42例病人，27例可以评价，有效率达26％。注射用去氧氟尿苷3g/m2×5和口服去氧氟尿苷1.2g/m2×21治疗晚期大肠癌，静脉组有效率为29％，口服组有效率为12％。随机比较口服和注射去氧氟尿苷加四氢叶酸钙治疗初治晚期大肠癌，口服去氧氟尿苷750mg/m2每12天重复，注射用去氧氟尿苷3g/m2×5每21天重复。结果口服组有效率为15％，而注射组有效率为41％。口服组中位复发时间4个月，注射组中位复发时间为7个月。另外还有专家用注射用去氧氟尿苷持续静脉滴注，去氧氟尿苷0.75g/m2 iv 24h×90day。20例晚期大肠癌病人7例达PR，有效率35％，毒性可以耐受。
去氧氟尿苷的含水溶液通常不稳定，特别是对光照和热的环境下更加不稳定。去氧氟尿苷的含水溶液随时间的推移会降解产生一定的降解物质。由于药物制剂中存在的杂质量在许多情况下会影响制剂的毒理学特性，所以，期望开发稳定的去氧氟尿苷溶液制剂，使其产生的杂质量明显降低，有利于提高产品质量。
本发明的目的在于提供一种稳定的非冻干型的去氧氟尿苷注射液。
本发明的目的在于提供一种稳定的含有去氧氟尿苷、稳定剂和可药用载体的去氧氟尿苷溶液制剂，及其制备方法。

发明内容
本发明提供一种稳定的去氧氟尿苷注射液。
本发明的注射液含有药物活性成分和适合配制注射液的药物可接受的载体，载体可以起到助溶、稳定、防腐、增容、缓冲等作用。
本发明的注射液为使本发明的注射液稳定化，本发明使用了丙二酸和吐温-80结合作为本发明注射液的稳定化剂，起到了使去氧氟尿苷注射溶液稳定的作用。
本发明的去氧氟尿苷溶液制剂的pH值通常在4-7的范围内，优选为4-5，最优选的为4.5。
本发明的注射液其配方组成如下处方1、(100瓶)去氧氟尿苷500.0g丙二酸2g吐温-80 5g葡萄糖或氯化钠适量注射用水加至 25000ml或处方2、(100瓶)去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐温-80 5g葡萄糖或氯化钠适量注射用水 加至 25000ml制备工艺将葡萄糖或氯化钠、丙二酸、吐温-80和去氧氟尿苷溶解于适量注射用水(约为处方量的1/10)中，加针用活性炭适量(0.1％)，搅匀，煮沸15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，调pH值至4.5±0.5，测中间体(含量、pH值)，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，灌装(250ml/瓶)，115℃热压灭菌30分钟，即得。
其中，葡萄糖的量可以是1250g，氯化钠的量可以是225g。
本发明的配方是经过筛选得到的，本发明采用了不同的配方进行比较筛选，找出了最优选的配方即本发明的配方。以下稳定性实验可以证明本发明的优越性。
稳定性实验按实施例1的方法配制去氧氟尿苷的溶液，只是其中不含丙二酸，也不含吐温-80，制备工艺同实施例1，我们将使用该法制得产品为“不含稳定剂的产品”，见表1。将实施例1和“不含稳定剂的产品”的制剂在光照(4000lx)、高温(60℃)条件下进行稳定性比较试验，分别于5、10天取样，用HPLC法检查降解产物，表明本发明产品的稳定性加强。参见表2、表3。
表1 实施例1与“不含稳定剂的处方”的组成

表2 实施例1和不含稳定剂的产品在60℃条件下实验结果

表3 实施例1和不含稳定剂的处方在光照试验(4000Lx)条件下实验结果

我们还对实施例1的制剂，进行了刺激、过敏和溶血试验结果该制剂对家兔的血管、皮下组织无明显刺激反应，也不产生溶血和过敏现象，临床应用比较安全。
将本发明按实施例1制备产品，产品置于40℃、相对湿度为75％的条件下6个月，结果产品比较稳定。参见表4。
表4 实施例1产品的稳定性结果

为了进一步考察本品的稳定性，我们将按处方制得的样品经光照、高温(40℃、60℃、80℃)考察5天、10天，对溶液的色泽、澄明度、pH值、有关物质及含量进行考核。结果表明，除80℃高温条件下降解产物有增加(仍在合格范围内)外，其他条件下各项指标均没有明显变化，故本品是比较稳定的。本处方也是可行的。
经过小试样品的加速试验、室温留样考察24个月及中试样品的加速试验、室温留样考察24月试验，结果表明各项指标均符合规定。说明本品稳定性较好，本发明还提供本发明的注射剂的质量控制方法，该方法包括，对本发明的注射剂的性状、鉴别、检查、有关物质、重金属、不溶性微粒、无菌、热原及含量测定等内容进行控制和测定。
具体质量控制方法如下(以下所述本品为实施例1方法得到的产品)性状本品为无色澄明液体。
鉴别(1)取本品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的对照品溶液；另取供试品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的供试品溶液；照有关物质项下色谱条件测定，供试品主峰保留时间应与对照品主峰保留时间一致。
(2)取含量测定项下的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IVA)测定，在269nm的波长处有最大吸收，在234nm的波长处有最小吸收。
(3)取本品1ml，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。
检查pH值应为3.5～5.5(中国药典2000年版二部附录VI H)。
有关物质 取本品，用0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含0.50mg的供试品溶液和每1ml含0.005mg的对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(20∶80)为流动相；流量1ml/min；检测波长269nm。理论板数按去氧氟尿苷峰计算应不低于2000。重复进样，其相对标准差(RSD)应小于1.0％。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检查灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10～25％；再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分保留时间的2.5倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，除溶剂峰外，量取各杂质峰面积和不得大于对照溶液的主峰面积的2倍(2.0％)。
重金属 取本品50ml，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIII H第一法)，含重金属不得过千万分之三。
不溶性微粒 取本品1瓶，依法检查(中国药典2000年版二部附录IX C)，应符合规定。
无菌 取本品不少于2瓶，依法检查(中国药典2000年版二部附录XI H)，应符合规定。
热原 取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录XI D)，剂量按家兔体重每1kg注射1ml，应符合规定。
其他 应符合注射剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版二部附录IB)。
含量测定去氧氟尿苷 取本品，精密量取适量，用0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含12μg的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)，在269nm波长处测定吸收度。另取经105℃干燥至恒重的去氧氟尿苷对照品适量，精密称定，用0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含12μg的溶液，同法测定，计算，即得。
具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
实施例1处方1、(100瓶)去氧氟尿苷500.0g丙二酸2g吐温-80 5g葡萄糖或氯化钠适量注射用水加至 25000ml制备工艺将葡萄糖或氯化钠、丙二酸、吐温-80和去氧氟尿苷溶解于适量注射用水(约为处方量的1/10)中，加针用活性炭适量(0.1％)，搅匀，煮沸15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，调pH值至4.5±0.5，测中间体(含量、pH值)，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，灌装(250ml/瓶)，115℃热压灭菌30分钟，即得。
实施例2或处方2、(100瓶)去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐温-80 5g葡萄糖或氯化钠适量注射用水 加至 25000ml制备工艺将葡萄糖或氯化钠、丙二酸、吐温-80和去氧氟尿苷溶解于适量注射用水(约为处方量的1/10)中，加针用活性炭适量(0.1％)，搅匀，煮沸15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，调pH值至4.5±0.5，测中间体(含量、pH值)，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，灌装(250ml/瓶)，115℃热压灭菌30分钟，即得。
权利要求
1.一种去氧氟尿苷注射剂，是注射用溶液制剂，其特征在于，含有有效量的去氧氟尿苷，丙二酸和吐温-80，pH值在4-7的范围内。
2.权利要求1的注射剂，其特征在于，还含有葡萄糖或氯化钠。
3.权利要求2的注射剂，其特征在于，100瓶注射剂含有以下配比的成分去氧氟尿苷250-500g丙二酸1-3g吐温-80 3-7g葡萄糖或氯化钠适量注射用水加至 25000ml。
4.权利要求2的注射剂，其特征在于，100瓶注射剂含有以下配比的成分去氧氟尿苷500.0g丙二酸2g吐温-80 5g葡萄糖或氯化钠适量注射用水加至 25000ml。
5.权利要求2的注射剂，其特征在于，100瓶注射剂含有以下配比的成分去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐温-80 5g葡萄糖或氯化钠适量注射用水加至 25000ml。
6.权利要求1的注射剂，其特征在于，100瓶注射剂含有以下配比的成分去氧氟尿苷250.0g丙二酸2g吐温-80 5g注射用水加至 25000ml。
7.权利要1-6任何一项注射剂的制备方法，其特征在于，经过以下步骤将葡萄糖或氯化钠、丙二酸、吐温-80和去氧氟尿苷溶解于适量注射用水中，加针用活性炭适量，搅匀，煮沸15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，调pH值至4.5±0.5，测中间体含量、pH值，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，灌装成250ml/瓶，115℃热压灭菌30分钟，即得。
8.权利要求1-6任何一项注射剂的质量控制方法，其特征在于，经过以下步骤对所述注射剂进行性状、鉴别、检查、有关物质、重金属、不溶性微粒、无菌、热原及含量进行测定。
9.权利要求9的质量控制方法，其特征在于，经过以下步骤性状本品为无色澄明液体；鉴别(1)取本品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的对照品溶液；另取供试品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含去氧氟尿苷0.05mg的供试品溶液；照有关物质项下色谱条件测定，供试品主峰保留时间应与对照品主峰保留时间一致；(2)取含量测定项下的溶液，照分光光度法测定，在269nm的波长处有最大吸收，在234nm的波长处有最小吸收；(3)取本品1ml，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀；检查pH值应为3.5～5.5；有关物质取本品，用0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含0.50mg的供试品溶液和每1ml含0.005mg的对照溶液。照高效液相色谱法测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20∶80的甲醇∶水为流动相；流量1ml/min；检测波长269nm；理论板数按去氧氟尿苷峰计算应不低于2000；重复进样，其相对标准差应小于1.0％。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检查灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10～25％；再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分保留时间的2.5倍；供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，除溶剂峰外，量取各杂质峰面积和不得大于对照溶液的主峰面积的2倍；重金属取本品50ml，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液2ml与水适量使成25ml，依法检查，含重金属不得过千万分之三；不溶性微粒 取本品1瓶，依法检查，应符合规定；无菌 取本品不少于2瓶，依法检查，应符合规定；热原 取本品，依法检查，剂量按家兔体重每1kg注射1ml，应符合规定；其他 应符合注射剂项下有关的各项规定；含量测定去氧氟尿苷 取本品，精密量取适量，用0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含12μg的溶液，照分光光度法，在269nm波长处测定吸收度；另取经105℃干燥至恒重的去氧氟尿苷对照品适量，精密称定，用0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含12μg的溶液，同法测定，计算，即得。
全文摘要
本发明涉及一种去氧氟尿苷注射剂，是注射用溶液制剂，其特征在于，含有有效量的去氧氟尿苷，丙二酸和吐温－80，pH值在4－7的范围内。
文档编号A61K31/7042GK1712016SQ200510080060
公开日2005年12月28日 申请日期2005年6月28日 优先权日2005年6月28日
发明者董泽贤 申请人:董泽贤