专利名称：人胚胎皮肤复合类脂的提取及在化妆品上的应用的制作方法
技术领域：
本发明是一种从人胚胎皮肤细胞中提取的复合类脂——皮肤自然润泽因子和皮肤自然营养因子应用在化妆品上的一种营养添加剂，以此制备成美容霜。
化妆品领域目前采用的添加剂一般采用蛋白质、肽、氨基酸等类型，对表皮细胞起营养作用，由于表皮细胞暴露在外，这些营养物质往往较难保持皮肤稳定的水合作用，保水、保湿性能相对有限。
本发明的目的在于避免上述现有技术中的不足之处，提供一种与人同源同胚层的人胚胎皮肤细胞中提取的复合类脂(二类主要成分分别定名为皮肤自然润泽因子naturalmoisturizingfactors，NMF和皮肤自然营养因子naturaltrophicfactors，NTF)作为添加剂应用于化妆品中。
本发明的目的可以通过以下措施来达到本发明的化妆品营养添加剂NMF和NTF通过生物化学技术提取，其具体方法如下1、取人胚胎皮肤的表皮层、真皮层和皮下组织，破碎细胞，制成细胞匀浆。
2、用2倍体积的无水乙醇搅匀，在40℃-50℃条件下水浴搅拌4-5小时，趁热过滤，滤渣再用等体积的无水乙醇搅匀，在40℃-50℃条件下水浴搅拌1-2小时，趁热过滤，合并二次滤液作NTF提取，滤渣作NMF提取。
3、将第2步所得滤液0℃-4℃静置48-60小时，真空浓缩，加等量丙酮沉淀，真空干燥沉淀物得NTF。
4、将第2步中的滤渣加2倍体积的无水乙醚，在58℃-62℃条件下水浴搅拌1-2小时，趁热过滤，滤渣再用等体积的无水乙醚搅匀，在58℃-62℃条件下水浴搅拌1-2小时，趁热过滤，合并二次滤液，-18℃静置48-60小时，0℃～4℃过滤，真空浓缩干燥沉淀物得NMF。
5、第4步所剩滤渣还可综合利用，用5%Nacl和1%NaHCO3清洗，再溶于10倍量的pH2.5蒸馏水中，加入10mg%胃蛋白酶和5mg%金霉素，20℃以下搅拌5天，所得粘稠溶解物用纱布过滤，用NaOH调滤液pH为10.0，4℃下放置4小时使胃蛋白酶失活，再用HCl调pH至7.5，离心收集沉淀物，冷冻干燥后加入至NTF中，可增强NTF的营养作用。
本发明下面将结合实施例作进一步叙述取5千克人胚胎皮肤(4～6月胎龄)，手术剪破碎组织细胞，组织粉碎机破碎细胞，制成细胞匀浆。加入10升无水乙醇(分析纯)搅匀，45℃恒温水浴中连续搅拌4小时，趁热用滤纸过滤，滤渣再用5升无水乙醇搅匀，45℃搅拌2小时，趁热过滤，合并2次滤液作NTF提取，滤渣作NMF提取。
上述滤液4℃静置48小时，取沉淀部分，上清部分用等体积丙酮沉淀，丙酮边加边搅拌，4℃静置48小时，过滤后，沉淀加入上述沉淀中一起真空干燥为NTF。
将上述作NMF提取的滤渣加入8升无水乙醚(分析纯)搅匀，在60℃恒温水浴中连续搅拌1小时，保持微沸状态，趁热过滤，滤渣用4升无水乙醚搅匀，60℃恒温水浴中连续搅拌1小时，趁热过滤，合并二次滤液，冷后在-18℃静置48小时，4℃冷藏柜中用滤纸过滤，或用真空浓缩，沉淀用真空干燥得NMF。
10g甘油在90℃预处理10分钟，在70～80℃加入NTF或NMF8mg，加入按基础化妆品配制的膏体中。基础化妆品配制膏体的方法较多，不同剂型有不同的配法。例如“护肤神”营养霜底膏可用白凡士林5g，羊毛脂2g，硬脂酸3g，十六醇5g，单硬脂酸甘油酯4g，十二烷基硫酸钠3g，再加入适量香精和防腐剂。这样配制成的膏体约可制备成200g化妆品，则每100g化妆品中含4mgNMF或NTF。也可加在洗面奶膏体中，按每100g洗面奶基质含4mgNMF或NTF配制。
本发明与现有技术相比具有如下优点用NTF或NMF制备的化妆品，由于采用与人皮肤同源同胚层组份，亲合作用强，更易为皮肤所吸收。NTF所形成的水脂乳化物可在正常皮肤表层形成保护膜，起良好的保护作用，可保持皮肤角质层的柔润和防止皮肤干裂。NMF可使皮肤角质层的含水量相对衡定，使皮肤保持稳定的水合作用，防止皮肤处于干燥状态。NTF和NMF均为复合类脂成份，可补充皮肤细胞的类脂成份的缺乏，维护皮肤细胞正常的功效，促进皮肤的复层扁平上皮细胞的新陈代谢，延长细胞的寿命，因此用NTF和NMF配制的美容霜，可使皮肤变嫩，具有抗皱、防衰老、防晒和增白作用，使皮肤保持柔软细腻、光泽洁白和富有弹性。本发明的另一特点是工艺设计相对简单，人胚胎皮肤细胞材料可充分利用，利于该发明在一般实验条件的实验室、化妆品厂推广应用。
权利要求
1.一种人胚胎皮肤复合类脂(主要成分分别定名为皮肤自然润泽因子NMF和皮肤自然营养因子NTF)的提取及在化妆品上的应用，其特征在于复合类脂NTF和NMF的提取方法如下a、取人胚胎皮肤制成细胞匀浆；b、用2倍体积的无水乙醇在40℃～50℃条件下水浴搅拌4-5小时，趁热过滤，滤液用等体积丙酮沉淀，真空干燥沉淀物得NTF；c、将b步中的滤渣用2倍体积的无水乙醚在58℃～62℃条件下水浴搅拌1-2小时，趁热过滤，滤液在-18℃静置48-60小时，过滤，真空干燥沉淀物得NMF。
2.一种人胚胎皮肤复合类脂的提取及在化妆品上的应用，其特征在于在70℃～80℃条件下用甘油溶解NMF或NTF，加入至化妆品基质(膏体)中制备成美容霜化妆品。
3.根据权利要求2所述的人胚胎皮肤复合类脂的提取及在化妆品上的应用，其特征在于按200克化妆品基质中添加8mgNMF或NTF配比加入。
全文摘要
一种人胚胎皮肤复合类脂(主要成分分别定名为皮肤自然润泽因子NMF和皮肤自然营养因子NTF)的提取及在化妆品上的应用，其特征在于复合类脂NTF和NMF的提取方法如下a、取人胚胎皮肤制成细胞匀浆；b、用2倍体积的无水乙醇在40℃～50℃条件下水浴搅拌4—5小时，趁热过滤，滤液用等体积丙酮沉淀，真空干燥沉淀物得NTF；c、将b步中的滤渣用2倍体积的无水乙醚在58℃～62℃条件下水浴搅拌1—2小时，趁热过滤，滤液在-18℃静置48—60小时，过滤，真空干燥沉淀物得NMF。
文档编号A61K35/54GK1099269SQ9311172
公开日1995年3月1日 申请日期1993年8月26日 优先权日1993年8月26日
发明者徐根兴, 张云鹏, 汤先忻 申请人:徐根兴