专利名称：作为白三烯拮抗剂的含有二醇的喹啉衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及迄今未知的，用于人及兽类治疗的化合物，涉及其药用盐，其生物可转化的衍生物，制备上述新化合物的方法，含有新化合物的药物组合物，组合物的单位剂量，以及使用上述组合物及单位剂量治疗病人的方法。
花生四烯酸经脂氧合酶途径代谢而形成的的白三烯有多种病理生理功能，如支气管痉挛，浆液渗出，冠脉痉挛，白细胞趋化及中性粒细胞脱颗粒1。因此，开发可拮抗白三烯作用的化合物将是非常有意义的。
在国际专利申请号PCT/DK93/00254(公开No.WO94/03431)中叙述了一些具有拮抗白三烯活性的喹啉基取代的N-苯基取代的异丝氨酸类化合物。
目前我们已经出人意料发现通式I的含有二醇的新化合物是非常强的拮抗剂，尤其在人血清白蛋白存在下则拮抗作用更强，并且其在体内具有很高的生物利用度和持续较长时间的活性。
本发明化合物具有通式I为
R1为氢或者卤素，以氟或者氯较好，m为0，1或者2；
上述的化合物含有多个不对称中心，因此可产生立体异构体。本发明包括所有可能的立体异构体及它们的消旋和立体化学混合物。
本发明通式I化合物的盐是与药用的无机酸或者有机酸形成的，这些酸有盐酸，溴氢酸及氢碘酸，磷酸，硫酸，硝酸，对-甲苯磺酸，甲磺酸，甲酸，醋酸，丙酸，柠檬酸，酒石酸，以及马来酸。
对于哮喘，过敏，类风湿性关节炎，脊柱关节炎，痛风，动脉粥样硬化，增殖性及炎性皮肤疾患如牛皮癣及过敏性皮炎，慢性炎性肠疾患，以及其它炎性疾患，与心绞痛有关的血管痉挛，肺动脉高压，囊状纤维化，成人呼吸窘迫综合症，缺血及再灌注损伤，偏头痛等疾病的治疗2，5-脂氧合酶抑制剂及白三烯拮抗剂可能会有较好的疗效。因此5-脂氧合酶抑制剂及白三烯拮抗剂对于治疗各种临床疾患是一种新的尝试并可能会有广泛的用途。
将制备的豚鼠回肠片段悬浮于生理缓冲液中，然后通过向缓冲液中加入纯的白三烯D4(LTD4)引发其收缩来观察白三烯拮抗剂的作用3。当本发明的化合物在LTD4前加入悬浮回肠的制备液后，可观察到其对LTD4引发的收缩有明显的抑制作用。并且在0.1-1nM的低浓度下即表现出抑制作用。然而，对于10-7浓度组织胺引发的收缩即使该化合物在微摩尔水平也不产生抑制作用。
研究白三烯拮抗剂抑制平滑肌收缩与其受体结合性质的关系是很重要的。可采用肺膜通过白三烯拮抗剂及[3H]LTD4与LTD4受体结合的直接竞争分析实验来进行受体结合研究3，4。通过上述实验得到pIC50的数值，该数值为甲制50％[3H]LTD4结合时拮抗剂摩尔浓度的负对数。本发明化合物的pIC50的数值等于或者高于文献中的化合物SR3040(参见表I)。3 I.Ahnfelt-Ronne，D.Kirstein and C.Kargaard-Nielsen，EuropeanJ.Pharmacol.155(1988)117.4 S.Mong，H.-L.Wu，M.O.Scott，M.A.Lewis，M.A.Clarke，B.M.Weichman，C.M.Kinzig，J.G.Gleason and S.T.Crooke，J.Pharmacol.Exp.Ther.wer(1985)316.5国际专利申请号PCT/DK93/00254(公开.No.W094/03431)，实施例18.表1在0.1％人血清白蛋白存在或者不存在的情况下[3H]LTD4与豚鼠肺膜的结合(pIC50均值+SD(n)或者单个数值)化合物 无血清白蛋白存在 有血清白蛋白存在实施例 78.8+0.1(3) 9.1+0.1(3)实施例8 9.0+0.3(3) 9.3+0.2(3)实施例5 8.4+0.1(3) 8.6+0.1(3)实施例6 8.8+0.5(3) 8.8+0.4(3)实施例3 8.3-8.2 8.4-8.6实施例4 8.4-8.4 8.9-8.7SR3040 8.9+0.3(3) 8.8+0.1(3)在体内使用LTD4诱发麻醉的豚鼠支气管痉挛来检测白三烯拮抗作用3。在支气管痉挛前10分钟静脉注射化合物，在此前24，48及72小时口服该化合物。ED50数值代表抑制白三烯诱发的支气管痉挛50％时的剂量。ED50的数值是通过回归分析2-3个剂量后计算得来的。表II显示结果。表II化合物 ED50mg/kg ED50mg/kg ED50mg/kg ED50mg/kg ED50mg/kgi.v.10min p.o.4h p.o.24h p.o.48h p.o.72h实施例7 0.058 1.644.649.73＞30实施例80.18 nd 14.93＞30nd实施例30.30 0.956 20.32nd nd实施例40.35 3.638.66 ＞30ndSR304050.00818.07 ＞30 nd ndnd＝未测本发明化合物优于SR3040。
本发明还涉及制备该化合物的方法。
在一种具体实施方案中，通式II的胺
其中Rm具有上述定义，与式III化合物反应
其中X为能形成的“好的离去基团”，因此X为如卤素原子，如氯，溴或者碘，或者烷基或者芳基磺酰氧基基团，但也可使用其它的离去基团，如烷基硫酸盐基团，氯磺酰氧基基团，烷基亚硫酸盐基团，一或者二烷基磷酸盐基团或者硝酸盐基团，从而形成式I化合物。
该反应在合适的惰性有机溶剂中进行，如二甲酰胺，但也可使用其它溶剂。反应在室温下进行较好，但在某些情况下可将反应混合物冷却至室温下，或者将反应混合物加热至高于室温，直至所使用溶剂的沸点，这取决于所用式II和式III反应物的性质。式I的粗反应产物通过过虑来收集，或者在水稀释后，使用合适的溶剂如乙醚，乙酸乙酯，二氯甲烷或者氯仿来提取反应混合物。产物可使用诸如重结晶法或者色谱法来进行。
在另一个实施方案中，式II胺与式IV化合物反应
其中R2及n如上定义。
反应即可在合适的惰性有机溶剂中进行，如甲醇，乙醇，二甲酰胺或者六甲基磷酰三胺，也可在水中或者其混合物中进行。反应在室温下进行，或者在高于室温，直至所使用溶剂的沸点的条件下进行，但在某些情况下将反应混合物冷却至室温下进行，这要根据所用式IV反应物的性质而定。按照上述的方法分离并纯化产物。
该化合物用于药物组合物，该组合物可用来治疗上述疾病。
取得治疗效果所需的式I化合物(以后称为活性成分)的量当然要根据具体化合物，给药途径以及被治疗的哺乳类动物来确定。式I化合物系统给药的合适剂量为每公斤体重0.1到20mg，以0.2到10mg/kg哺乳类动物体重为较好，每天可以一次或者多次给药。
如果是用喷雾剂型，式I化合物抗哮喘的合适剂量为每公斤体重1μg到5mg，以1μg到1mg/kg哺乳类动物体重为较好，例如1μg到0.5mg/kg。
当然也可将为原始化学物质作为活性成分单独给病人服用，但还是将其作成药用剂型较好。活性成分可占剂型重量的0.1％到100％。通常剂型的单位剂量含0.07mg到1g活性成分。如果是局部使用，活性成分最好占剂型重量的1％到2％，但是活性成分也可占至10％w/w。局部用于鼻腔及面颊的剂型可含0.1到20％w/w活性成分，例如约为2％w/w。
术语“单位剂量”是指单元的，即可给病人服用的单个剂量，其即可含有活性成分也可为活性成份与固体或液体药用稀释剂或者载体的混合物，并且其保持物理及化学上的稳定性，易于包装和携带。
本发明用于动物和人的治疗剂型含有活性成分，及其药用载体以及有选择的其它治疗成分。载体应与剂型中其它的成分“相容”并且不破坏其它成分的活性。
剂型包括适于口服，眼部用药，直肠用药，非口服给药(包括皮下，肌内及静脉)，透皮，关节腔内用药，表面用药，鼻腔用药或者面颊用药。
剂型一般以单位剂量形式存在，并可按药物学中已知的方法进行制备。
所有的方法都包括这样一些步骤，即将活性成分加入由一种或者多种附加成分构成的载体中。总之剂型是通过下面的步骤来制备的，即向液体载体或者是精确分割好的固体载体或者两者中均一加入活性成分，如果需要再将其制成所需要的形状。
本发明用于口服的剂型可以是单个的单位形式，如胶囊，小胶囊，片剂或者锭剂，其每个里面都含有预定量的活性成分；也可以是粉剂或者粒剂的形式；水或者非水的溶液或者混悬液形式；油-水乳剂或者是水-油乳剂的形式。活性成分也可以大药丸，糖剂或者药膏的形式进行给药。
直肠给药的剂型可以是带有活性成分及载体的栓剂形式，或者是灌肠剂形式。
非口服途径给药的剂型为含有活性成分的无菌油或者水制剂，其最好与受用者血液等渗。
用于关节腔内或者眼部的剂型可以是含有活性成分的无菌液体形式，其可为微晶形式，例如水性微晶混悬液。本发明的活性成分用于关节腔内或者眼部时也可以使用脂质体剂型或者生物可降解的聚合物系统。
用于眼部或者表面的剂型包括液体或者半液体剂型，如油-水或者水-油乳剂，油膏或者软膏；或者溶液或者混悬液，如滴液。
用于鼻腔或者面颊的剂型包括粉剂，自动推进或者雾化剂，如气雾剂或者雾化剂。
其它用于鼻腔的剂型包括细粉末形式，其通过鼻腔吸入进行给药，即将装有粉末的容器靠近鼻子，之后通过鼻腔快速吸入。
除了上述的成分，本发明的剂型还可包括一种或者多种其它的成分。
组合物还可进一步包括用来治疗上述的病理疾患的其它有治疗活性的化合物，例如糖皮质激素，抗组织胺类药物，血小板激活因子(PAF)拮抗剂，抗胆碱能制剂，甲基黄嘌呤，β-肾上腺能制剂，水杨酸盐，消炎痛，氟灭酸盐，萘普生，替美加定，金盐，青霉胺，降低血浆胆固醇制剂，视黄醇，锌盐，水杨酰偶氮磺胺吡啶。
下面将对本发明通过下述的实施例做进一步的说明实例1(+)-2R，3R-E-3-N-[3-2-(喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇将E-3-[2-(喹啉-2-基)乙烯基]苯胺(0.5g，2mmol)(参看EP 0 206 751A Merck Frosat Canada Inc)与(2R，3R-(+)-3-苯基-缩水甘油(Aldrich)(0.3g，2mmol)在乙醇(10ml)中的混合物回流8天。冷却后，通过过滤收集所得沉淀物，并且以乙醇及乙醚进行冲洗。得到标题化合物，熔点为164-166℃及[a]D20＝+60.9°(C＝1，0，CH3OH)得到所需化合物。
实例2-8通过实施例1的步骤并且使用合适的起始物质，从而得到表III的化合物。
表III实施例号(R1)m熔点(℃)构型[a]D2H164-662S，3S-58.0° c＝1，MeOH37-Cl 185-862R，3R+59.5° c＝1，MeOH47-Cl 189-912S，3S-58.3° c＝1，MeOH57-F 172-742R，3R+57.5° c＝1，MeOH67-F 173-752S，3S-58.1° c＝1，MeOH76-F，7-F 162-642R，3R+64.2° c＝1，MeOH86-F，7-F 162-642S，3S-63.0° c＝1，MeOH实例9片剂(+)-2R，3R-E-3-N-[3-2-(6，7-二氟喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(活性物质) 100mg乳糖 75mg淀粉 12mg甲基纤维素 2mg羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 10mg硬脂酸镁 1mg将活性物质，乳糖和淀粉在合适混合机中混合至均匀的状态，并且用5％甲基纤维素15cps水溶液进行湿化。继续混匀直至颗粒形成。如果需要，将湿的颗粒通过合适的筛并且用合适的干燥仪器如液化床或者烘干炉进行干燥，使水分少于1％。将干燥的颗粒通过一个1mm筛并且与CMC-Na混合成均匀的状态。加入硬脂酸镁，并且继续混合一段时间。
使用适宜压片机将颗粒制成200mg重的片剂。
权利要求
1.通式I化合物及其药用无毒盐
其中R1为氢或者卤素，优选氟或者氯，m为0，1或者2。
2.权利要求1中所述的通式I的化合物，其中R1优选氟或者氯。
3.权利要求1-2中任一所述化合物的立体异构体，其为纯的形式；或者为立体异构体混合物。
4.权利要求1中所述的盐，其中该盐为与选自下述酸生成的盐，这些酸有盐酸，溴氢酸及氢碘酸，磷酸，硫酸，硝酸，对-甲苯磺酸，甲磺酸，甲酸，乙酸，丙酸，柠檬酸，酒石酸，以及马来酸。
5.权利要求1中所述的化合物选自(+)-2R，3R-E-3-N-[3-2-(6，7-二氟喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(+)-2R，3R-E-3-N-[3-2-(喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(-)-2S，3S-E-3-N-[3-(2-喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(+)-2R，3R-E-3-N-[3-2-(7-氯喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(-)-2S，3S-E-3-N-[3-2-(7-氯喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(+)-2R，3R-E-3-N-[3-2-(7-氟喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(-)-2S，3S-E-3-N-[3-2-(7-氟喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇(-)-2S，3S-E-3-N-[3-2-(6，7-二氟喹啉-2-基)乙烯基]-苯基氨基-3-苯基-1，2-丙二醇及它们的盐类和纯的对映体形式。
6.药物制剂，其含有权利要求1-5中任一要求的化合物，或还含有必要的辅剂。
7.治疗需治疗患者的方法，其特征在于将有效量的权利要求1-5中的一个或者多个化合物给药于上述患者，如果需要还可同时给予一种或者多种其它的有治疗活性的成分。
8.按照权利要求7所述的方法治疗并且预防一些疾病，这些疾病包括哮喘，过敏，类风湿性关节炎，脊柱关节炎，痛风，动脉粥样硬化，增殖性及炎性皮肤疾患如牛皮癣及过敏性皮炎，慢性炎性肠疾患，以及其它炎性疾患，与心绞痛有关的血管痉挛，肺动脉高压，囊状纤维化，成人呼吸窘迫综合症，缺血及再灌注损伤，偏头痛。
9.制备权利要求1的式I化合物的方法，其中a)式II胺
其中R1及m具有上述定义，与式III化合物反应
其中X是可形成的“好的离去基团”；或者b)式II胺与式IV化合物反应
其中R2及n具有上述定义。
10.使用权利要求1的化合物制备用于治疗并预防一些疾病的药物，这些疾病包括有哮喘，过敏，类风湿性关节炎，脊柱关节炎，痛风，动脉粥样硬化，增殖性及炎性皮肤疾患如牛皮癣及过敏性皮炎，慢性炎性肠疾患，以及其它炎性疾患，与心绞痛有关的血管痉挛，肺动脉高压，囊状纤维化，成人呼吸窘迫综合症，缺血及再灌注损伤，偏头痛。
全文摘要
本发明涉及迄今未知的为式Ⅰ化合物,其中R
文档编号A61P9/00GK1189156SQ96195085
公开日1998年7月29日 申请日期1996年11月13日 优先权日1995年11月27日
发明者S·拉克林, D·克里斯特恩 申请人:里奥药物制品有限公司