专利名称：(十)北美黄连碱的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及(+)北美黄连碱在制备预防和治疗痴呆、促进智力、提高耐缺氧能力的药物中的应用。经动物实验证实，(+)北美黄连碱能够提高东莨菪碱、戊巴比妥钠致痴呆模型小鼠的学习记忆能力，提高正常小鼠、老龄小鼠的学习记忆能力，提高缺氧小鼠的生存时间。(+)北美黄连碱具有活性高、治疗剂量毒性小的优点。
背景技术：
目前我国人口的平均寿命已超过70岁。国外一项科学研究预测到2025年时65岁及65岁以上的老年人将达到18.8％，这个数字表明，再过20余年，每5个人中就有1个老年人。早老性痴呆症(Alzheimer’sDisease)多发生在50余岁。因脑血管病变引发的多发性栓塞性痴呆或老年性痴呆多发生在60岁以后。可见，由于人口的老龄化，早老性痴呆症和老年性痴呆症的发病率也必将增加。老年人及其特有的神经退化性疾病——各种痴呆症要经历两种死亡，首先是精神上的死亡，后是肉体上的死亡，苦不堪言，更给社会和家庭带来沉重负担。人口老龄化被认为是仅次于战争，瘟疫，饥荒，资源能源短缺而影响社会发展和安定的不利因素。
痴呆(dementia)是由于脑功能障碍而产生的获得性和持续性智能障碍综合症，智能障碍包括不同程度的记忆、语言、视空间功能、人格异常及认知能力降低，痴呆主要包括Alzheimer病、血管性痴呆等。防治衰老和治疗老年痴呆的药物种类繁多。目前临床上主要应用胆碱能药物或胆碱酯酶抑制剂来治疗，辅以改善脑血管循环、脑保护剂等，效果往往不甚理想。增强胆碱系统功能的药物中，Ach前体仅有微弱的治疗作用，Ach受体激动剂和胆碱脂酶抑制剂虽有一定效果，但作用较短暂，毒副作用较大。脑血管扩张药，通过改善脑血流量有助于提供能量和改善智能，但真正有价值的脑血管扩张药必须具有高度选择性，不影响脑代谢，无“窃血”现象，有抗血小板聚集和抗血栓作用。钙拮抗剂尼莫地平虽符合上述某些条件，但它仅作用于电压依赖性钙通道中的L-通道，对N型和T型钙通道无影响。多种神经肽和神经生长因子曾被认为有治疗痴呆症的希望，但临床效果不佳，可能主要归因于这类物质难以通过血脑屏障进入脑内发挥作用。2-吡咯烷酮乙酰胺(商品名脑复康)问世后，在早期文献中属没有争论的一类新型促智药，近几年来国内外报道，该药对各类型的记忆障碍和老年痴呆作用轻微或尚无定论，其为水溶性化合物，血脑屏障通过率低，不易集中到靶点发挥作用。
(+)北美黄连碱是从一种生长在我国西北地区的植物—直茎紫堇(Corydalis stricta Steph.)中提取出来的生物碱单体，易溶于酸性溶剂，用碱性溶液调整pH值不超过4时，生物活性稳定，长期保存不出现沉淀。(+)北美黄连碱已经公知(见方起程，林茂，翁庆梅，朱朝德，刘欣.紫堇属植物生物碱的化学——青海高原四种紫堇属植物生物碱的化学研究.药学学报，1981，16(10)798-800.)，但是其生物活性方面的研究迄今未见报道。

发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种如通式(I)所示的(+)北美黄连碱在制备预防和治疗痴呆、促进智力、提高耐缺氧能力的药物中的应用。
本发明的另一个目的是提供药物组合物，其中包括作为有效成分的如通式(I)所示的(+)北美黄连碱，和制药领域中常用的载体。
本发明所述的化合物包括其衍生物、立体异构体和药效学上可接受的盐。
具体讲，本发明一方面涉及如通式(I)所示的化合物 (+)北美黄连碱能改善多种原因引起的学习记忆障碍。腹腔给药0.15mg/kg(约为半数致死量的1/20)和口服给药0.625mg/kg(约为半数致死量的1/40)，可使动物进入暗室触电区的潜伏期明显延长，出现的错误次数明显减少。药理实验结果显示在预先腹腔给于(+)北美黄连碱0.15mg/kg后再腹腔注射东莨菪碱1.0mg/kg，错误的次数为0％。潜伏期完全恢复到正常组的水平，说明完全逆转了东莨菪碱对小鼠记忆获得的损害作用。说明(+)北美黄连碱能够有效改善抗胆碱药东莨菪碱导致的学习和记忆障碍。
同样，对戊巴比妥钠(Pentobarbital)引起的学习记忆障碍也有明显的翻转作用。在暗室试验中，小鼠腹腔注射(+)北美黄连碱0.15mg/kg潜伏期增长，错误的次数减少，与模型组比较差异显著。说明(+)北美黄连碱能够有效改善戊巴比妥钠导致的学习和记忆障碍，并明显的强于国外上市的胆碱酯酶抑制剂他克林(Tacrine)和钙拮抗剂尼莫地平(Nimodipine)。
在水迷宫试验中，口服0.625mg/kg(+)北美黄连碱的小鼠组游至平台时间比模型组缩短，并且比正常对照组还少，错误次数也比正常对照组还少。与模型组比，差异非常显著。说明(+)北美黄连碱能够有效改善戊巴比妥钠导致的学习和记忆障碍，并优于尼莫地平。
对于正常动物，在水迷宫的动物模型上也显示了很好的增强学习记忆的作用。给了(+)北美黄连碱的动物比未给药的正常对照组学习记忆能力明显增强，不但抵达安全平台所需时间短，而且在水迷宫中走错路线的次数也少。经多次重复均显示这种结果。试验结果表明无论是错误次数较正常组少，游泳时间较正常组短，显示出明显的促智作用。效果优于尼莫地平和脑复康。
本发明的进一步研究表明(+)北美黄连碱能明显地改善和增强老龄动物的学习记忆能力。老龄雄性小鼠确实比青年小鼠的学习记忆能力差，其错误次数和游达安全平台所需的时间均较青年正常小鼠多和长。但口服0.625mg/kg(+)北美黄连碱后，无论是雄性动物，还是雌性动物，无论是抵达安全平台的时间，还是发生错误的次数，均显示了改善和增强学习记忆的作用。不仅与未给药的正常老龄动物相比差异显著，抵达安全平台的时间和发生错误的次数甚至比正常的青年对照组都短和少。
除了上述的提高动物的学习和记忆的能力外，本发明还发现，(+)北美黄连碱有明显的抗缺氧作用。无论是一次口服给药，还是连续给药30天，均能延长缺氧缺血动物头部的生存时间，而且显示出较好的量效关系。
另外，(+)北美黄连碱毒性低，治疗剂量安全性高。
本发明因此还涉及含有作为活性成份的本发明的化合物和常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1-95重量％的本发明化合物。
本发明化合物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明的化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。
本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等，优选口服。
本发明化合物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药。注射包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射和皮内注射等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂等。
本发明化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
例如为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。
例如为了将给药单元制成胶囊，将有效成分本发明化合物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
例如，将本发明化合物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液剂、乳剂、冻干粉针剂，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体、稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。这些辅料是本领域常用的。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。
为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
本发明化合物、药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数、治疗目的，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。一般来讲，本发明中药学成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明化合物组合物中最后的制剂中所含有的实际药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防或治疗目的。本发明化合物的每天的合适剂量范围本发明的化合物的用量为0.001-150mg/kg体重，优选为0.01-100mg/kg体重，更优选为0.01-60mg/kg体重，最优选为0.1-10mg/kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药这受限于给药医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。
每一种治疗所需总剂量可分成多次或按一次剂量给药。本发明的化合物、组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用并调整剂量。
具体实施例方式
下面的实施例用来进一步说明本发明，但是这并不意味着对本发明的任何限制。
避暗法属于一次性训练被动回避实验，此法利用小鼠嗜暗习性设计。实验装置分为明暗两室，有一洞口连接，明室为安全区，无电；暗室为电击区，底部为铜栅，通以40伏交流电。动物钻进暗室即受到电击，逃回明室可躲避伤害性刺激。实验共分两天进行，第一天是训练，24小时后测验。此即记忆的获得和保持测试，记录小鼠受电击的次数作为错误次数并计算错误的百分率(即出现错误的小鼠的只数占该组小鼠只数的百分率)。小鼠从计数开始到第一次进入暗室的时间为潜伏期。错误少、潜伏期长表明记忆好，错误多、潜伏期短表明记忆差。
迷宫学习，是一种空间位置的辨别学习。水迷宫内水深10cm，水温控制在25℃左右，在目标区有一爬梯，动物可爬出水面而获得休息。实验分三个阶段进行。第一阶段，将挡板挡在A处，使动物从A处开始训练，A处只作为训练用，第1-2次，时间和错误次数未作统计。逐渐延长动物起步区至目标区的游泳路径，同时增加盲端区。第二阶段，将挡板挡在B处，使动物从B处开始训练，第3-6次。第三阶段，将挡板挡在C处，使动物从C处开始训练，第7-9次。见示意图，图中1，2，3，4为盲端，动物游入盲端表示错误。从各训练处到达阶梯安全平台的时间为游泳所需要的时间。进入盲端的次数少，游泳所需的时间短表示学习记忆好。反之则差，或称之为学习记忆障碍。该方法可检测动物空间定向和学习记忆的能力。
老年性痴呆以基底前脑胆碱能神经元丢失最为严重，造成乙酰胆碱分泌不足。东莨菪碱为M胆碱受体阻断剂，能抑制乙酰胆碱对M受体的激动作用，因此可模仿胆碱能功能不足的结果，是研究老年性痴呆的动物模型之一。
HDST是(+)北美黄连碱的缩写。
SCOP表示东莨菪碱的缩写。
NMDP尼莫地平的缩写。
Tac他克林的缩写。
PTB戊巴比妥钠的缩写。
所有的剂量的单位是mg/kg。
实施例1 (+)北美黄连碱对东莨菪碱造成记忆获得障碍的作用(避暗法)昆明小鼠50只，随机分为5组正常对照组，东莨菪碱破坏记忆模型组，(+)北美黄连碱0.075mg/kg、0.15mg/kg、0.30mg/kg三个剂量组。与正常对照组相比，腹腔注射东莨菪碱1.0mg/kg后，使错误的百分率达到60％，潜伏期缩短了90秒，与对照组比较差异显著，提示东莨菪碱能显著破坏动物的学习和记忆获得。预先腹腔给于(+)北美黄连碱后，进行训练，24小时后重做测试，结果见表1表1组别 剂量 错误次数潜伏期(秒) 错误％正常对照组 0.0±0.0299.0±0.0 0SCOP 1.00.6±0.5++210.0±84.4++60++HDST+SCOP 0.075+1.0 0.4±0.5231.2±93.040HDST+SCOP 0.15+1.0 0.0±0.0299±0.0**0**HDST+SCOP 0.30+1.0 0.4±0.7262.7±62.430n＝10，X±SD，++P＜0.01 vs 对照组，**P＜0.01 vs SCOP实验结果显示在预先腹腔给于(+)北美黄连碱0.15mg/kg后再腹腔注射东莨菪碱1.0mg/kg，错误的次数为0％。潜伏期和正常对照组相同，完全恢复到正常组的水平，说明完全逆转了东莨菪碱对小鼠记忆获得的损害作用。说明(+)北美黄连碱能够有效改善抗胆碱药东莨菪碱导致的学习和记忆障碍。
实施例2 (+)北美黄连碱对戊巴比妥钠造成记忆获得障碍的作用(避暗法)昆明小鼠60只，随机分为6组正常对照组，戊巴比妥钠破坏记忆模型组，他克林组，(+)北美黄连碱0.075mg/kg、0.15mg/kg、0.30mg/kg三个剂量组。皮下注射戊巴比妥钠25mg/kg可以明显地破坏动物的学习记忆能力，潜伏期从275.8秒缩短到65.9秒，错误的百分率从10％增加到90％。结果见表2表2组别剂量 错误次数潜伏期(秒) 错误％对照组 0.1±0.3275.8±69.6 10PTB 25 1.4±1.0++65.9±84.8++90++Tac+PTB 1.5+25 1.3±0.757.5±52.9 100HDST+PTB0.075+25 1.1±0.889.2±113.5 70HDST+PTB0.15+25 0.4±0.5* 220.8±103.8** 40*HDST+PTB0.30+25 0.6±0.5* 178.0±108.0* 60n＝10，X±SD，++P＜0.01 vs对照组，*P＜0.05 vs PTB，**P＜0.01 vsPTB。
腹腔注射(+)北美黄连碱0.15mg/kg潜伏期为220.8秒，错误的次数为40％，与模型组比较P＜0.01与＜0.05，差异显著。他克林1.5mg/kg没有显示任何作用，潜伏期为57.5秒，错误的百分率为100％。说明(+)北美黄连碱能够有效改善戊巴比妥钠导致的学习和记忆障碍，并且优于他克林。
实施例3 (+)北美黄连碱对戊巴比妥钠造成的学习记忆障碍的影响(水迷宫测试)昆明小鼠60只，随机分为6组正常对照组，戊巴比妥钠腹腔注射15mg/kg破坏记忆模型组，尼莫地平(Nimodipine，NMDP)组，(+)北美黄连碱口服2.5mg/kg、1.25mg/kg、0.625mg/kg三个剂量组(分别为半数致死量的1/10，1/20，1/40)。实验结果显示，戊巴比妥钠15mg/kg破环了小鼠学习记忆能力，游至安全平台的时间同对照组的12.2秒相比延长了1/3，为18.0秒，差异显著(P＜0.05)。错误的次数为2.4，较对照组(1.7次)相比有所增加，但统计差异不显著。结果见表3表3
组别剂量(mg/kg) 错误次数时间(秒)对照组 1.7±0.612.2±4.3PTB 15 2.4±1.018.0±8.0+NMDP+PTB1.0+15 2.1±1.315.2±6.7HDST+PTB0.625+15 1.0±0.5** 8.7±2.4**HDST+PTB1.25+15 2.0±1.413.4±7.2HDST+PTB2.50+15 1.8±1.413.6±9.2n＝10，X±SD，+P＜0.05 vs 对照组，**P＜0.01vs PTB。
口服0.625mg/kg(+)北美黄连碱组游至平台时间只花了8.7秒，不但比模型组缩短了近10秒，而且比正常对照组少花了3.5秒。错误次数1.0比正常对照组还少0.7次。与模型组比，差异非常显著，P值均＜0.01。而口服1mg/kg尼莫地平组游至平台时间没有缩短，错误次数虽有减少，统计处理均不显著。说明(+)北美黄连碱能够有效改善戊巴比妥钠导致的学习和记忆障碍，并优于尼莫地平。
实施例4 (+)北美黄连碱对正常小鼠学习记忆的影响(水迷宫测试)昆明小鼠50只，随机分为5组，每组10只正常对照组，口服尼莫地平1mg/kg组，口服(+)北美黄连碱0.625mg/kg、1.25mg/kg、2.5mg/kg三个剂量组。第1和第2次只是让动物熟悉条件训练，不作记录。结果见下表4表4 (+)北美黄连碱对正常小鼠学习记忆的影响剂量 B处测试的错误次数组别 (mg/kg) 3 4 5 6对照组 3.9±1.92.6±1.42.3±1.61.6±0.8NMDP 1 3.2±1.11.5±0.7** 1.6±1.50.8±0.7*HDST 0.625 2.4±1.31.2±0.5** 0.8±6.4** 0.3±0.4**HDST 1.25 2.2±0.8** 1.6±0.6** 1.2±0.8* 0.8±0.7*HDST 2.50 2.5±0.8** 1.8±0.7* 1.0±0.6** 0.8±0.5**n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs对照组。
剂量 B处测试的游泳时间(秒)组别(mg/kg) 3456对照组24.3±12.1 16.5±13.1 13.1±8.79.2±3.9NMDP1 20.0±7.413.0±5.711.4±9.28.0±2.5HDST0.625 15.9±5.7* 9.5±1.6*8.4±3.1*6.9±2.1HDST1.25 12.6±3.2** 9.9±3.0*9.6±2.7 8.2±2.0HDST2.50 20.0±11.4 13.6±7.4* 9.5±23.68.2±2.9
n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs对照组。
从表4的结果可以看出(+)北美黄连碱在第3次测试时即显示改善作用。无论是错误次数较正常组少，游泳时间也较正常组短，显示出明显的促智作用。1mg/kg的尼莫地平也有一定的促智作用，但不如0.625mg/kg(+)北美黄连碱强。
实施例5 (+)北美黄连碱与尼莫地平、脑复康对正常小鼠学习记忆的作用的比较(水迷宫测试)昆明小鼠40只，随机分为4组，每组10只正常对照组，口服尼莫地平1mg/kg组，口服脑复康400mg/kg组，口服(+)北美黄连碱0.625mg/kg组。第1和第2次只是让动物熟悉条件训练，不作记录。结果见下表表5 (+)北美黄连碱与尼莫地平、脑复康对正常小鼠学习记忆的作用的比较剂量 错误次数组别 mg/kg 3 456 7 8对照组 5.56±2.314.2±2.631.9±1.631.65±1.18 1.58±0.1 1.06±0.5HDST 0.625 3.24±1.09** 2.05±1.16* 1.79±0.89 0.6±0.39* 0.8±0.5* 0.61±0.46NMDP 1 4.45±3.152.7±2.852.5±2.761.1±0.59 1.06±0.7 1.17±0.77脑复康4003.71±2.492.12±2.28 1.87±1.08 1.06±0.26 1.23±0.6 1.37±0.73n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs对照组。
剂量 游泳时间(秒)组别 mg/kg 3 4 5 67 8对照组 37.6±14.8638.4±24.9 16.7±10.9 15.27±9.53 17.33±8.610.5±3.47HDST 0.625 23.01±6.19** 14.9±4.04*17.1±8.5 8±1.56* 8.73±2.01** 8.8±2.37NMDP 1 28.9±17.6718.49±14.85* 15.9±12.2 11.3±4.5* 10.37±3.95* 12.19±4.41脑复康40025.24±12.31 17.76±13.52* 15.6±5.6 10.3±2.38 11.54±2.46 13.7±4.35n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs对照组。
从表5的结果中可以看出口服0.625mg/kg(+)北美黄连碱仍然显示极好的促智作用。其错误的次数和到达安全平台的时间几乎只有正常青年对照组的一半。尼莫地平也有一定的作用，但远不如(+)北美黄连碱明显。口服400mg/kg的脑复康有增强学习记忆能力的趋势，但统计处理差异无显著性。说明(+)北美黄连碱对正常小鼠学习记忆的作用优于尼莫地平、脑复康。
实施例6 (+)北美黄连碱对雄性老龄小鼠学习记忆的影响(水迷宫测试)雄性老龄小鼠为繁育已衰老淘汰种鼠，并由本发明人继续喂养4-6个月。雄性老龄昆明小鼠40只，正常青年小鼠10只，用水迷宫测试。实验结果见表6
表6 (+)北美黄连碱对雄性老龄小鼠学习记忆的影响剂量 B处测试的错误次数组别 mg/kg3 456 7 8老龄对照组4.40±2.062.50±1.56 3.33±2.67 2.60±2.43 1.73±1.40 0.89±1.15HDST 0.6252.51±1.09* 1.07±0.59* 1.26±0.87* 0.56±0.33 0.92±0.82 0.56±0.44HDST 1.25 2.10±0.73** 1.50±0.84 1.78±1.14 1.66±1.09 1.30±0.48 0.88±0.60HDST 2.50 2.23±1.431.23±1.29 1.30±1.08 0.80±1.13 0.92±0.82 0.80±0.24青年对照组 2.65±0.991.85±0.66 2.80±1.40 1.30±1.02 1.51±1.05 0.89±0.74n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs 01d(老龄对照组)。
B处测试的游泳时间(秒)组别 剂量3 4 5 6 7 8老龄对照组 30.93±14.29 23.70±13.45 31.23±20.58 23.04±15.40 18.66±14.72 15.56±10.50HDST 0.625 21.40±7.8414.26±4.3514.36±5.31* 11.03±2.18* 12.20±3.4012.72±4.27HDST 1.2522.29±8.4915.43±6.3617.14±8.2018.78±9.3316.21±7.0414.13±5.85HDST 2.5017.22±9.4914.23±7.2412.05±7.4310.74±6.5712.54±3.9911.20±3.96青年对照组 18.93±6.13* 18.00±7.9819.34±8.4413.31±4.9917.14±8.4512.06±5.04n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs 01d(老龄对照组)。
从表中结果可以看出，老龄雄性小鼠确实比青年小鼠的学习记忆能力差，其错误次数和游达安全平台所需的时间均较青年正常小鼠多和长。但老龄鼠在服用(+)北美黄连碱0.625mg/kg后其错误的次数几乎只有老龄鼠的一半。第6次，其错误次数只是老龄鼠的1/5(0.56次比2.60次)，而且再次显示比青年正常对照组短和少。
实施例7 (+)北美黄连碱对雌性老龄小鼠学习记忆的影响(水迷宫测试)雌性老龄小鼠为繁育已衰老淘汰种鼠，并由本发明人继续喂养4-6个月。雌性老龄昆明小鼠40只，正常青年小鼠10只，用水迷宫测试。实验结果见表7
表7 (+)北美黄连碱对雌性老龄小鼠学习记忆的影响B处测试的错误次数组别 剂量 3 4 5 6 7 8 9老龄对照组 3.41±1.43 2.83±1.291.97±0.960.99±0.871.43±0.731.21±0.810.75±0.68HDST 0.625 2.73±1.29 1.26±1.06** 1.12±0.71* 0.90±0.490.81±0.671.11±0.840.65±0.87HDST 1.25 2.05±0.68 1.74±1.001.28±0.441.24±0.671.56±1.011.23±0.731.05±0.96HDST 2.50 1.88±0.82 2.16±1.001.16±0.761.63±1.071.38±1.051.18±0.700.69±0.66青年对照组2.20±0.87 1.97±0.812.19±0.991.23±0.731.38±1.071.52±0.680.85±0.45n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs老龄对照组。
B处测试的游泳时间(秒)组别剂量 3 4 5 67 89老龄对照组 29.36±10.9524.95±12.38 19.53±10.14 14.07±7.51 16.20±6.6212.98±3.95 11.65±2.92HDST0.625 21.13±10.4513.70±7.51* 11.63±3.63* 10.60±3.62 10.63±3.05* 11.07±4.60 10.65±5.39HDST1.25 16.58±3.50** 19.34±6.5014.09±5.3014.26±4.39 14.37±5.5512.11±2.79 12.25±4.53HDST2.50 18.89±7.00*23.13±6.8417.34±8.5618.39±8.18 14.96±4.8313.45±3.08 12.00±4.49青年对照 16.71±6.31** 17.53±5.3716.27±6.0312.16±5.99 13.56±5.9113.94±3.68 10.95±3.34组n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs老龄对照组。
表7实验结果显示与老龄雄鼠基本相似，只是作用略弱。综合表6和表7的结果，可以肯定(+)北美黄连碱有改善老龄动物学习记忆障碍的作用。
实施例8 (+)北美黄连碱口服给药对小鼠耐缺氧能力的影响昆明小鼠40只，随机分为4组，每组10只正常对照组，口服(+)北美黄连碱0.625mg/kg、1.25mg/kg、2.5mg/kg三个剂量组。使用380ml磨口透明试剂瓶，将小鼠放入瓶中，盖紧瓶塞并用凡士林封口，观察小鼠在瓶中存活时间。各给药组分别与正常对照组进行t检验。
表8a (+)北美黄连碱一次口服给药对小鼠耐氧能力的影响。
组别 剂量 体重(克) 存活时间(分钟)对照组 23.0±0.9 45.0±6.4北美黄连碱0.625 23.0±0.8 47.8±10.6北美黄连碱1.25 22.3±1.2 50.5±5.3*北美黄连碱2.50 22.5±0.8 54.0±6.7**n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs对照组。
表8b (+)北美黄连碱连续三十天口服给药对小鼠耐氧能力的影响。
组别 剂量存活时间(分钟)对照组24.0±3.4北美黄连碱0.625 26.6±1.7北美黄连碱1.2531.4±3.1**北美黄连碱2.5031.0±3.9**n＝10，X±SD，*P＜0.05，**P＜0.01 vs对照组。
试验说明(+)北美黄连碱有明显的抗缺氧作用。无论是一次口服给药，还是连续口服给药30天，均能延长缺氧缺血动物头部的生存时间，而且显示出较好的量效关系。
实施例9 (+)北美黄连碱的毒性(LD50)iv 静脉注射0.27(0.25-0.29)mg/kgip 腹腔注射2.85±0.39mg/kgpo 口服给药25.8±1.0mg/kg
权利要求
1.如通式(I)所示的(+)北美黄连碱在制备预防或治疗痴呆的药物中的应用
2.如通式(I)所示的(+)北美黄连碱在制备促智药物中的应用
3.如通式(I)所示的(+)北美黄连碱在制备抗缺氧药物中的应用
4.根据权利要求1或2或3的应用，其特征在于，所述的化合物包括立体异构体和药效学上可接受的盐。
5.一种药物组合物，其特征在于，含有药物有效剂量的如权利要求1-3所述的任一化合物，及药用载体。
6.根据权利要求5的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物可以是片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。
全文摘要
本发明涉及(+)北美黄连碱在制备预防和治疗痴呆、促进智力、提高耐缺氧能力的药物中的应用。经动物实验证实，(+)北美黄连碱能够提高东莨菪碱、戊巴比妥钠致痴呆模型小鼠的学习记忆能力，提高正常小鼠、老龄小鼠的学习记忆能力，提高缺氧小鼠的生存时间。(+)北美黄连碱具有活性高、毒性小的优点。
文档编号A61K31/4353GK1511525SQ02159170
公开日2004年7月14日 申请日期2002年12月30日 优先权日2002年12月30日
发明者黄俊华 申请人:黄俊华