专利名称：Glp-1类似物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及糖尿病相关的药物领域，具体而言，本发明涉及一种具有延长的胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)类的体内半衰期的GLP-1类似物。本发明还涉及该GLP-1类似物的制备方法以及在制备糖尿病药物中的应用。
背景技术：
本发明涉及的GLP-1氨基酸(glucagon-likepeptide-Ι,以下简称GLP_1)是主要由小肠L细胞分泌的一种37个组成的多肽，其活性形式为GLP-1 (7-37) OH和GLP-1 (7-36)NH2 (Mojsov S，J Clin Invest. 1987 Feb; 79(2) : 616-9)。GLP-1 明显减低人用餐后的血糖，能刺激胰岛素的产生，同时还能起到一定减肥效应，并且不会引起低血糖症(DruckerD J, Diabetes. 1998 Feb; 47(2) : 159-69)。近期研究还表明GLP-1有胰腺再生作用(Drucker D J, 2003Dec; 144 (12) : 5145-8)。此外，因为GLP-1为完全人源化多肽，作为临床药物在安全上具有较大优势。然而，GLP-1 (7-37)的血清半衰期仅仅为3-5分钟，每天多次注射给药在临床使用中非常不方便。目前已经有不少研究 采用GLP-1类似物融合蛋白技术解决GLP-1类似物在体内的存留时间(CN90101167. 3、CN200710018734. 2、CN200410054397. 9、CN01820232. 2、CN200380110152. 7、CN200510039265. 3、CN200610127237.1、CN200910009642. 7)，然而，
现有的技术与临床理想的目标还有很大距离，普遍都还没有达到临床标准，最近NovoNorisk生产的利拉鲁肽为GLP-1类似物，其对GLP-1进行了棕榈酸的修饰，并于2009年于美国上市。但是利拉鲁肽也存在半衰期短的问题，其剂型仍需每日注射。因此，目前存在对解决GLP-1体内半衰期短的方法的需求。

发明内容
除非另外指出，本文所述的“Fmoc策略”是指以聚合物树脂作为固相反应基质，将氨基端Fmoc保护的氨基酸在偶联试剂的存在下依次缩合，从而合成多肽的合成方法。其具体方法参见 Fmoc solid phase peptide synthesis: a practical approach, 2000,Oxford University Press.
本发明的一个目的是针对临床上GLP-1类似物在体内存留时间较短，需要每天注射给药的缺限，提供一种半衰期较长的GLP-1的类似物。本发明的另一个目的是提供一种GLP-1类似物在制备治疗糖尿病的药物中的应用，以及该GLP-1类似物在制备治疗和/或预防肥胖症的药物中的应用。本发明的又一个目的是提供一种以GLP-1类似物作为有效成分的药用组合物，其包含上述GLP-1类似物。其中，所述的药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的辅料，并且所述药物组合物优选为注射剂，进一步优选为冻干粉针或溶液注射剂。用于实现上述目的的技术方案如下
一方面，本发明提供一种GLP-1类似物，所述GLP-1类似物具有下列通式A 7HAEX10T FTSDVS X18YLEX22QA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 n2X2通式A，
其中，X10为甘氨酸或半胱氨酸，X18为丝氨酸或半胱氨酸，X22为甘氨酸或者半胱氨酸，X25为丙氨酸或半胱氨酸，X30为丙氨酸或半胱氨酸，X33为缬氨酸或半胱氨酸，并且Χ1(ι、Χ 8>X25> X30和X33中有且只有两个为半胱氨酸W1X1表示有II1个X1, H1=O^O,且X1为精氨酸、丙氨酸、酪氨酸赖氨酸、异亮氨酸或甲硫氨酸；η2χ2表示有η2个Χ2，η2=(Γ30，且X2为精氨酸、丙氨酸、酪氨酸赖氨酸、异亮氨酸或甲硫氨酸；nl、n2不同时为0，以及通式A中含有的两个半胱氨酸均形成二硫键。优选地，所述GLP-1类似物具有下列通式1:
7HAEX10T FTSDVS X18YLEGQA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 η2Χ2通式I，其中Ii1=I 30, η2=1 30。所述具有通式I的GLP-1类似物如
权利要求
1.一种GLP-1类似物，所述GLP-1类似物具有下列通式A 7HAEX10T FTSDVS X18YLEX22QA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 n2X2通式A，其中，X10为甘氨酸或半胱氨酸，X15为天冬氨酸或半胱氨酸，X22为甘氨酸或半胱氨酸，X30为丙氨酸或半胱氨酸，X33为缬氨酸或半胱氨酸，并且Χ1(Ι、Χ15、Χ22、Χ3(Ι和X33中至少有一个为半胱氨酸；Ii1X1表示有Ii1个X1, ηι=Γ30,且X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；η2Χ2表示有η2个Χ2，η2=(Γ30，且X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；以及通式A中含有的两个半胱氨酸均形成二硫键。
2.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式7HAEX10T FTSX15V SSYLE X22QAAK EFIX30W LX33KGR G37H1X1C η2Χ2通式I,其中ηι=3 30，η2=3 30 ;优选地，所述GLP-1类似物为SEQ ID NO 82: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37 GGGGG GGGGG C GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 83: 7HAEGT FTSDV SSYLE CQMK EFIAff LVKGR G37 GGGGG C GGGGG GGGGG ；或SEQ ID NO 84: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37 GGG C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG。
3.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式II7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G3S1X1C η2Χ2通式II，Ii1=I 20，η2=0 25，并且其中X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸，X2为甘氨酸、丙氨酸或缴氨酸；优选地，1^=3 20, η2=3 25 ;进一步优选地,所述1^=5 15, η2=3 9。
4.如权利要求3所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物为SEQIDNO1:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGC GGG ；SEQIDNO2:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGGGGGGC GGG ；SEQIDNO3:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRGyGGGGGGGGGGGGGGGC GGG ；SEQIDNO4:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGC GGGGG G ；SEQIDNO5:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGC GGGGG GGGG ；SEQIDNO6:7HAEGTFTSCVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG37GGGGGGGGGGC GGGGG G ；SEQIDNO7:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGRG37GGGGG GGGGGC GGGGGGGGG ；SEQID NO 8: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGGGGSEQ ID NO 9: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGGGGGGGG ；SEQIDNO10:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA C AAA ；SEQIDNO11:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAA ；SEQIDNO12:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAAC AM ；SEQIDNO13:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA C AAAAA A ；SEQIDNO14:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA C AAAAA AAAA ；SEQIDNO15:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAAAA A ；SEQIDNO16:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAAAAAAAA ；SEQIDNO177HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAACAAAAA ASEQIDNO187HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAACAAAAA AAAA SEQIDNO19:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV C VVV ；SEQIDNO20:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVV ；SEQIDNO21:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVC VVV ；SEQIDNO22:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV C VVVVV V ；SEQIDNO23:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV C VVVVV VVVV ；SEQIDNO24:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVVVV V ；SEQIDNO25:7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVVVVVVVV ；SEQIDNO267HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVCVVVVV V-或SEQIDNO277HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVCVVVVV VVVVo
5.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式III7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37 Ii1X1 C n2X2通式III,其中，Ii1=I 10，n2=0 25，X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸，X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；优选地，1^=3 10, n2=3 25 ；或者，Ii1=I 5, n2=10 20 ;进一步优选地，1^=3 5, n2=10 20。
6.如权利要求5所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物为SEQ ID NO 28: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37G C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 29: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQMK EFICff LVKGR G37G C GGGGG GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 30: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37G C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 31: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 32: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQMK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 33: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG
7.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式IV7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LCKGR G37 Ii1X1 C n2X2通式IV其中，Ii1=I 10，n2=0 30，X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸，X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；优选地，1^=3 10, n2=3 30 ;或者，Ii1=I 5, n2=10 20 ;进一步优选地1^=3 5,n9=10 20。
8.如权利要求7所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物为
9.如权利要求1-8中任一项所述的GLP-1类似物的制备方法，所述制备方法包括Fmoc策略的固相多肽合成；制成的药物组合物包含如权利要求1-8中任一项所述的GLP-1类似物和一种或多种药学上可接受的辅料。
10.如权利要求1-8中任一项所述的GLP-1类似物在制备治疗糖尿病、肥胖症和/或糖尿病、肥胖症相关疾病的药物中的应用；特别是在制备预防肥胖症的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了GLP-1类似物及其制备方法与应用。所述GLP-1类似物具有下列通式A7HAEX10TFTSDVSX18YLEX22QAX25KEFIX30WLX33KGRG37n1X1n2X2。本发明的GLP-1类似物能够有效增加GLP-1的血液半衰期，克服其因为半衰期短而无法在临床上使用的现状，在糖尿病、肥胖症治疗药物领域较有应用前景。本发明还公开了所述GLP-1类似物的制备方法及其应用。
文档编号A61P3/04GK103059127SQ201310004538
公开日2013年4月24日 申请日期2013年1月7日 优先权日2013年1月7日
发明者李瑛 申请人:天津嘉宏科技有限公司