专利名称：一种抗足癣作用的复方黄柏制剂的制作方法
一种抗足癣作用的复方黄柏制剂技术领域
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种抗足癣作用的复方黄柏制剂。
背景技术：
足癖(Tinea pedis)俗称脚气、香港脚，主要是由红色毛癖菌(Trichophyton rubrum)等皮肤浅部致病菌引起的传染性脚部皮肤病，容易反复发作，我国足癣发病率高达 45. 2%，而74. 5%的人却没有得到有效治疗，市场上很多抗真菌药物用来治疗皮肤癣菌的感染，大多都难以根治足癣，而且随着抗真菌药物的广泛应用、新的菌种的出现及患者个体情况的差异，抗真菌药物的耐药问题也越来越严重。
近年来，由于抗生素的不合理使用和药物的乱用，导致致病菌耐药性不断增强，临床耐药菌株不断增加。细菌的耐药性是全球关注的热点，中草药降低或抑制细菌的耐药性是防止细菌耐药性产生的措施之一。中草药作为我国的优势国药，其品种多，来源广泛，对人体的毒副作用小，易于代谢，抗菌作用明显，不易产生耐药性，因此其广阔前景凸显出来。 本课题组旨在探究大黄-黄柏药对提取物对红色毛癣菌等皮肤浅部致病菌的抑菌活性，为中草药在临床上治疗由红色毛癣菌等皮肤浅部致病菌引起的传染性皮肤病提供科学·依据。发明内容
1、一种抗足癣作用的复方黄柏制剂，其特征在于包括以下步骤
(I)复方黄柏制剂重量配比为黄柏10. 0-15. 0g、丁香10. 0-15. 0g、大黄6.0-10. 0g、龙胆草 6. 0-10. Og ；
(2)将(I)中黄柏 10. 0-15. 0g、大黄 6. 0-10. 0g、龙胆草 6. 0-10. Og,加入 350-450mL水浸泡3_4h，煎煮30_40min，用4层絹布过滤，得滤液，滤渣再加300_350mL水煎煮20-30min,用4层絹布过滤,得滤液；
(3)合并⑵中两次滤液，浓缩至相当于黄柏重量lg/mL，得到浓缩液；
(4)称取丁香10. 0-15. 0g，加200-300mL水浸泡3-4h，采用水蒸气蒸馏法获得挥发油；
(5)将(4)中丁香挥发油与(3)中浓缩液混匀，得到复方黄柏制剂，调pH值到7.4 7. 6之间，高压蒸汽灭菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2、复方黄柏制剂用于制备抗足癣作用的药物制剂。
具体实施方式
本发明所述的一种抗足癣作用的复方黄柏制剂包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1 :
1、一种抗足癣作用的复方黄柏制剂，其特征在于包括以下步骤
(I)复方黄柏制剂重量配比为黄柏10. 0g、丁香10. 0g、大黄6. 0g、龙胆草6. Og ；
(2)将(I)中黄柏lO.Og、大黄6.0g、龙胆草6.0g，加入350-450mL水浸泡3h，煎煮 30min,用4层絹布过滤,得滤液,滤洛再加300mL水煎煮20min,用4层絹布过滤,得滤液；
(3)合并⑵中两次滤液，浓缩至相当于黄柏重量lg/mL，得到浓缩液；
(4)称取丁香10. OgJP 200mL水浸泡3h，采用水蒸气蒸馏法获得挥发油；
(5)将(4)中丁香挥发油与(3)中浓缩液混匀，得到复方黄柏制剂，调pH值到 7. 4 7. 6之间，高压蒸汽灭菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2、复方黄柏制剂用于制备抗足癣作用的药物制剂。
实施例2
1、一种抗足癣作用的复方黄柏制剂，其特征在于包括以下步骤
(I)复方黄柏制剂重量配比为黄柏15. 0g、丁香15. 0g、大黄10. 0g、龙胆草10. Og ；
(2)将(I)中黄柏15.0g、大黄10.0g、龙胆草10.0g，加入450mL水浸泡4h，煎煮 40min,用4层絹布过滤,得滤液,滤洛再加350mL水煎煮30min,用4层絹布过滤,得滤液；
(3)合并⑵中两次滤液，浓缩至相当于黄柏重量lg/mL，得到浓缩液；
(4)称取丁香15. Og,加300mL水浸泡4h，采用水蒸气蒸馏法获得挥发油；
(5)将(4)中丁香挥发油与(3)中浓缩液混匀，得到复方黄柏制剂，调pH值到 7. 4 7. 6之间，高压蒸汽灭菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2、复方黄柏制剂用于制备抗足癣作用的药物制剂。
药理试验一种抗足癣作用的复方黄柏制剂
I材料及方法
1.1供试材料
1.1.1供试菌株
本实验所使用的三种具有代表性皮肤浅部致病菌均培养自山东大学(威海)微生物实验室，分别是HS (红色毛癣菌T. rubrum)，DC (大肠埃希氏菌E. coli), JH(金黄色葡萄球菌S. aureus)。金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别为革兰阳性和革兰阴性细菌，且金黄色葡萄球菌常引起疖、痈和毛囊炎等皮肤感染，大肠杆菌则是最常见的泌尿道感染病原菌；红色毛癣菌是人皮肤癣病最常见的病原菌，因此，选择上述细菌和真菌作为受试菌有较好的代表性。
1.1.2 培养基
实验菌株所需培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、牛肉膏蛋白胨培养基、沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂(SDA)。
(I)SDA :葡萄糖 40. 0g、蛋白胨 10. 0g、琼脂 15. 0g、蒸懼水 IOOOmL ；
(2) PDA :马铃薯 200. 0g、葡萄糖 20. 0g、琼脂 15. 0g、蒸馏水 IOOOmL ；
(3)牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏3. 0g、蛋白胨10. 0g、氯化钠5. 0g、琼脂15. 0g、 蒸馏水 IOOOmL ρΗ7· O 7. 2。
1.1. 3供试中草药
复方黄柏制剂重量配比为黄柏10. 0-15. 0g、丁香10. 0-15. 0g、大黄6. 0-10. 0g、龙胆草6. 0-10. 0g，购自威海市颐和堂医药连锁山大店。
1.1. 4试验仪器超净工作台、真菌培养箱、高压灭菌锅、电子天平、冷藏用冰箱、数码照相机、烘箱、离心机、旋转蒸发仪、电子游标卡尺等。
L 2实验方法
1. 2.1菌悬液的制备
细菌菌株经活化后，接种于固体平板于37°C过夜培养，挑取适量菌苔接种于液体培养基，置于振荡培养箱内37°C培养24h，浑浊后平板涂布计数，稀释至I X IO6Cfuzl备用。
红色毛癣菌于28°C用PDA活化7d,挑取适量菌苔接种于液体培养基制备菌悬液， 振荡15s，浑浊后涂布平板计数并调整至lX106cfu/L。
1. 2. 2复方黄柏制剂的制备
将黄柏15. 0g、大黄10. 0g、龙胆草10. Og,加入450mL水浸泡4h,煎煮40min,用4层絹布过滤，得滤液，滤渣再加350mL水煎煮30min，用4层絹布过滤，得滤液；合并两次滤液， 浓缩至相当于黄柏重量lg/mL，得到浓缩液；称取丁香15. 0g，加300mL水浸泡4h，采用水蒸气蒸馏法获得挥发油；将丁香挥发油与浓缩液混匀，得到复方黄柏制剂，调PH值到7. 4 7.6之间，高压蒸汽灭菌30min ;密封后O 4°C保存，待用。
1. 2. 3复方黄柏制剂对皮肤浅部致病菌抑菌活性试验
采用平板扩散法，制备直径为IOcm平板厚度4mm的PDA固体培养基和牛肉膏蛋白胨培养基平板，各菌悬液加100 μ I涂布均匀后放置20min，平板底部十字划线平分为四个区域，以每区域中心为打孔器打孔中心打孔，打孔器直径为5_ ;另外配制对照组空白对照组(培养基)、阴性对照组(培养基、菌悬液、无菌水)、阳性对照组(培养基、菌悬液、红霉素)，来观察细菌的生长情况、培养基和复方黄柏制剂对细菌生长的影响。每种菌做四个平行，于各个孔滴加提取液50 μ L，结束后放置50min。放置完毕后将培养有细菌的平板置于37°C培养箱内培养24h，，将培养有真菌的平板置于28°C培养箱内培养3d，游标卡尺测量抑菌圈直径。
抑菌效果的判定参照参考文献，抑菌圈直径> 20mm为极敏，以表示； 15-19mm为高敏，以“**”表示；10_14为中敏，以表示；10以下为低敏，以表示。
2结果与分析
复方黄柏制剂对皮肤浅部致病菌抑制作用
表I复方黄柏制剂对皮肤浅部致病菌的抑制活性(η = 4)
权利要求
1.一种抗足癣作用的复方黄柏制剂，其特征在于包括以下步骤(1)复方黄柏制剂重量配比为黄柏10.0-15. 0g、丁香10. 0-15. 0g、大黄6. 0-10. 0g、龙胆草 6. 0-10. Og ；(2)将(I)中黄柏10.0-15.(^、大黄6.0-10.(^、龙胆草6.0-10.(^，加入 350-4501^水浸泡3-4h，煎煮30-40min，用4层絹布过滤，得滤液，滤渣再加300_350mL水煎煮20_30min， 用4层絹布过滤，得滤液；(3)合并(2)中两次滤液，浓缩至相当于黄柏重量lg/mL，得到浓缩液；(4)称取丁香10.0-15. OgJP 200-300mL水浸泡3_4h，采用水蒸气蒸馏法获得挥发油；(5)将(4)中丁香挥发油与(3)中浓缩液混匀，得到复方黄柏制剂，调pH值到7.4 7.6之间，高压蒸汽灭菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2.如权利要求1所述制剂方法制备的复方黄柏制剂的用途，其特征在于用于制备抗足癣作用的药物制剂。
全文摘要
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种抗足癣作用的复方黄柏制剂。将黄柏、大黄、龙胆草，加入水浸泡，煎煮，过滤，滤渣再加水煎煮，过滤；合并两次滤液，浓缩，得到浓缩液；称取丁香，采用水蒸气蒸馏法获得挥发油；将丁香挥发油与浓缩液混匀，得到复方黄柏制剂。复方黄柏制剂用于制备抗足癣作用的药物制剂。
文档编号A61P31/10GK103041010SQ201310019580
公开日2013年4月17日 申请日期2013年1月4日 优先权日2013年1月4日
发明者张崇禧, 张成城, 王超, 侯欣池, 李永斌, 江长优, 戚婷, 刘朝辉, 张婷婷 申请人:山东大学(威海)