专利名称：一种从灵芝中分离出的新化合物及其制备方法和医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从灵芝中分离出的具有抗肿瘤作用并可抑制肿瘤细胞的多重耐药性(MDR)的新化合物。本发明还涉及该化合物的制备方法。本发明还涉及以该化合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
肿瘤的多重耐药性(Muti-drug Resistance, MDR)被临床上认为是引起化疗失败的最常见的原因，对肿瘤进行的时间较长的化疗常常导致癌细胞的选择性存活，这些存活的癌细胞对于结构上和功能上不相关的广谱的化疗药物具有交叉抗性。可能导致MDR的几种机理包括细胞由于适应化疗而未能进入程序性死亡(细胞凋亡)、或药物未能到达或作用于细胞内靶位。抗癌治疗，例如药物治疗、生物治疗或放射治疗都必须击中肿瘤的细胞内靶位，并且随后引起某种形式的细胞改变或破坏。与直接杀死肿瘤细胞不同，大多数情况下抗癌药物引发细胞程序性死亡，或细胞凋亡的放生。因此，对多种药物的抗性可能是由于细胞的防御机制引起，该细胞防御机制广泛地限制药物进入细胞靶位，或阻止该细胞进入细胞凋亡并被杀伤。多种机制参与肿瘤细胞耐药性的形成，其中ATP结合盒膜通道转运蛋白是产生MDR的主要原因，而ABCBl、ABCCl和ABCG2与肿瘤MDR关系最为密切。因此寻找高效低毒且对化疗药物药代动力学无影响的MDR逆转剂是有效克服MDR的方法之一。在治疗癌症方面植物药具有较长的使用历史。已将中药用于改善癌症病人的普通状况，但将中药用于MDR癌细胞的具体根除上还未广泛应用。自然界提供了许多植物来源的抗癌药物，例如长春花碱、紫杉醇、雷公藤内酯醇等。这些从植物中分离的有效成分表现出良好的抗肿瘤效应，且相对于人工合成的化学药物来说，其毒性较低的优点使这些植物来源的抗癌药物在肿瘤治疗中得到了大量的应用。中药灵芝是多孔菌科灵芝属真菌植物赤芝Wanoderma lucidum(Leys, ex Fr.) Karst]或紫芝[Ganoderma japonicum(Fr.) Lloyd]的干燥子实体。性温、味甘，具有补中益气、滋补强壮、扶正固本的功效，临床上常用于肿瘤的治疗或辅助治疗。对于灵芝抗肿瘤有效成分的研究，主要针对灵芝多糖和灵芝三萜类成分。抗肿瘤研究结果表明，灵芝三萜对多种肿瘤细胞的生长和转移都有抑制作用。对灵芝三萜类成分的研究在20世纪八十年代达到了高潮，目前已经有130多种灵芝三萜类成分被分离鉴定，我们在针对灵芝抗肿瘤作用的有效成分研究中，分离鉴定了一个新的三萜类化合物，命名为赤芝酸A乙酯(Ethyl Iucidenates Α)。药理学实验表明，该化合物具有抗肿瘤活性，并且可抑制肿瘤细胞的MDR。 针对该化合物经过试验，确定了合理的制备方法。

发明内容
本发明的目的是提供一种从灵芝中分离出的具有抗肿瘤作用的新化合物(赤芝酸 A乙酯)。
本发明的另一个目的在于提供制备该化合物方法。本发明的再一目的在于提供该化合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。根据本发明的一方面，提供具有下列化学结构式(I )的化合物
权利要求
1. 一种结构式(I )的化合物，其化学结构式如下
2.权利要求1的所述的化合物的制备方法，包括以下步骤A)将灵芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，过滤，收集滤液，再减压浓缩干燥，获得醇提取物；B)将醇提取物加水，以石油醚萃取脱脂后，再以乙酸乙酯萃取，获得的乙酸乙酯萃取液再以饱和NaHCOyK溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，获得粗品；C)将获得的粗品进行色谱分离纯化，得到纯的式(I)化合物。
3.根据权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于步骤C)的粗品进行色谱分离纯化的步骤包括如下1)将粗品在硅胶上进行柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱，获得氯仿-甲醇的体积比为99 1的洗脱物；2)取氯仿-甲醇的体积比为99 1的洗脱物再进行硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到石油醚-乙酸乙酯的体积比为4 1的洗脱部位；3)取此部位经制备型高效液相色谱分离，甲醇-水梯度洗脱，从甲醇-水的体积比为 75 25的洗脱部位得到纯的化合物(1)。
4.权利要求1所述的结构式(I)的化合物或其衍生物在制备治疗肿瘤药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述的肿瘤为人慢性粒细胞白血病细胞株 K562、人髓系白血病细胞株HL60、人Burkitt淋巴瘤细胞株CA46、人结肠癌细胞株SW1116、 人结肠癌细胞株SW480、人肝癌细胞株SMMC7221、人肝癌细胞株!fepG2。
6.权利要求1所述的结构式(I)的化合物或其衍生物在制备治疗抑制肿瘤细胞MDR 的药物中的作用。
7.含有治疗有效量的权利要求1所述的结构式(I)的化合物或其衍生物的药物组合物。
8.根据权利要求7所述的的药物组合物，其中结构式(I)的化合物和/或其衍生物的含量大于50%以上，尤其90%以上。
全文摘要
一种从灵芝中分离出的新化合物及其制备方法和医药用途。本发明公开了一种下式结构的化合物，其化学结构式如下其制备方法为将灵芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，过滤，收集滤液，再减压浓缩干燥，获得醇提取物；将醇提取物加水，以石油醚萃取脱脂后，再以乙酸乙酯萃取，获得的乙酸乙酯萃取液再以饱和NaHCO3水溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，获得粗品；将获得的粗品进行色谱分离纯化，得到上述化合物。本发明所述的化合物能作为治疗肿瘤的药物。
文档编号A61K31/575GK102311475SQ201110200649
公开日2012年1月11日 申请日期2011年7月18日 优先权日2011年7月18日
发明者张志强, 李鹏, 许建华 申请人:福建医科大学