专利名称：一种地龙注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种地龙注射制剂及其制备方法。
背景技术：
地龙，Lumbrricus，本品为矩蚓科动物参环毛蚓或缟蚯蚓的干燥体。前者产于广东、广西，称“广地龙”，后者产于河南、山东、江苏，称“土地龙”。别名，蚯蚓、蛐蟮、土龙，主要成分含蚯蚓解热碱(Lum-brofebrine)、蚯蚓素(Lumbrilin)、蚯蚓毒素(Terrestro-Lumbroly-sin)，氨基酸类、嘌呤类、胆碱、脂肪酸等，性咸，寒，归肝、脾、肺经，主要作用为清热，定惊，止喘，利尿，具有有解热、降压、舒张支气管、解除痉挛作用，临床用于高血压、支气管哮喘、高热抽搐、偏瘫、半身不遂、腮腺炎、丹毒、带状疱疹、风湿性关节炎、泌尿系感染、小儿百日咳等。
现代中药药理研究，地龙制剂在临床应用过程中，容易产生一系列的过敏反应，其主要原因是地龙的有效成分、致敏成分都是一些多肽类成分，性质相近，在制备过程中会被同时提取出来，在应用过程中遇到敏感体制的人群就很容易发生过敏反应，给医生和患者带来很多的麻烦，因此去除地龙中有毒成分是很多科研工作者的急需研究的课题。
地龙生长的环境为土壤，其主要的食原为土壤中的腐败有机物，而这些物质中含有大量的重金属，也会随之进入地龙的体内，这就需要在制备地龙制剂中一定要对重金属进行含量限定。
中国专利局2000年4月12日公告的《活性地龙干粉的制备方法》专利申请，该专利申请公开了一种制备地龙冻干粉的方法，该方法是通过将鲜活地龙冼净后冻成冰块，然后放在盐水溶液中溶解，并自溶搅拌成浆，得到的匀浆液至少进行一次离心处理后，将上清液进行预过滤灭菌和超过滤浓缩后得干粉，但该方法制成的地龙冻干粉的活性较低；申请号为02129969.2的专利《高活性蚓激酶干粉的制备方法》，该制备方法中加入聚丙烯酸钠溶液进行纯化，得到的有效部位没有进行活性检测，因此其有效成分的活性需要进行推敲；申请号为03146692的专利文献采用超滤、阴离子交换、凝胶过滤的方法制备蚓激酶，该方法操作复杂，实际生产中生产成本较大；申请号为02153848的专利文献采用的阴离子交换、疏水柱层析的方法得到地龙3个活性成分，该方法没有将地龙的活性部位提取完全，工业化具有一定困难；申请号为02129969的专利文献采用的是盐析和超滤的方法得到蚓激酶，该方法得到的蚓激酶纯度不高，从而导致活性不高；申请号为02116271的专利文献采用亲和色谱法得到蚓激酶，该方法不适合工业化生产；申请号03146692的专利文献通过盐析的方法得到蚓激酶，该方法得到的蚓激酶纯度不高、活性不好；申请号为99112806的专利文献采用的盐析和离心的方法得到蚓激酶，该方法得到蚓激酶纯度不高、活性不好。

发明内容
基于上述原因，本发明用6％-8％的氯化钠对地龙进行处理，除去地龙毒素，采用生理盐水浸泡、超滤、离子交换有机结合的方法，得到有效部位，制备成注射制剂，控制重金属含量低于5PPM。药理实验表明，本发明工艺操作简单可行，易于工业化生产，本发明地龙注射制剂具有很好的药理作用。
本发明通过以下技术方案实现的。
一.工艺制法(1)取地龙，加入6％-8％的氯化钠浸泡，清洗3-5次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；
(2)将上清液用截留分子量为8000-10000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.05-1.10的浓缩液；(3)将超滤液用缓冲液调pH值为5.0-7.0，分别将超滤液经过CM-sephadexC25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用缓冲液调pH至6.0-7.0进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用缓冲液调pH至7.0-8.0进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位25-35重量份，药用辅料65-75重量份水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂。
粉针剂将半成品加入药用辅料，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂。
本发明提供一种易于工业化生产的提取纯化地龙有效部位蚓激酶的工艺方法；本发明还在于提供一种毒副作用小、药理作用更好地龙的注射制剂；本发明提供一种地龙注射制剂在心脑血管疾病中的应用。
二、质量检测1.蛋白质含量实验药物本专利地龙有效部位(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)
实验方法采用BCA法，在562nm处进行测量实验结果O.D值0.667蛋白质含量555毫克/毫升2.纤维蛋白原-凝血酶结合物实验实验药物本专利地龙有效部位((广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)实验结果见表1表1 纤维蛋白原-凝血酶结合物实验

注+阳性，+-弱阳性，-阴性结论比活性1∶803.重金属检测按照《中华人民共和国药典》(2005年二部附录VIIIH重金属检查法)进行分析，测得本专利注射制剂的重金属含量为3.8PPM。
4.检测分析采用高效液相色谱法进行检测分析实验仪器waters600E型高效液相色谱仪，996PDA检测器；色谱柱日本TOSOH TSK2000SW 7.5×300；色谱条件工作站millennium chromatograph；波长280nm；流动相0.01mol/L、pH值6.68的磷酸缓冲溶液(配制方法按照中国生物制品主要原辅材料质控标准2000年版，中国生物制品标准委员会编，化学工业出版社，P13-14配制)。
2.实验药物地龙多肽样品为本发明工艺制备的地龙多肽(广州天之骄药物开发有限公司实验室)。
3.样品制备取样品，用多肽纯化离心管，进行离心分离，取离心液体即为样品。
4.上样取上述处理的样品用微量注射器吸取定量液体，注入进样器进行检测。
5.结果对五批样品进行测定，采用归一化法计算地龙蚓激酶占有效成分含量为91.8％。
三.药理实验实验1地龙有效部位活性检测实验材料5g/L纤维蛋白原的生理盐水溶液，注射用生理盐水(广州天之骄药物开发有限公司)冷冻干燥凝血酶(安徽桑原生物技术研究所购买，每瓶含量为500IU，用时用生理盐水稀释至每毫升含凝血酶0.5IU)3.待测样品地龙有效部位样品为本发明工艺制备(广州天之骄药物开发有限公司提供)检测方法取10×80mm试管8支，在每支试管中加入生理盐水0.2ml(第一管不加)，于第一管中加入待测样品0.2ml；第二管中加入0.2ml，充分混匀后吸取0.2ml加入第三管，以次例推，直至加到第7管，将多余的0.2ml混合液废弃，此时各试管都为0.2ml，但浓度依次为1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶80、1∶160，第7管因不含有效部位，作为试验对照，加样结束后，放到37℃水浴使样品与凝血酶作用5-10min，再于各试管中加入5g/l纤维蛋白原溶液0.2ml，再放入37℃水浴，观察记录1-24小时结果，并进行计算。计算方法为发生凝固或沉淀的试管为无抗凝血酶活性(阴性)，不凝固或无沉淀产生的试管为具有抗凝血酶活性。
实验结果经过计算本发明的地龙有效部位的比活性为1∶80。
实验2抑制血小板聚集的实验实验动物SD大鼠，体重200-250g，雌雄各半。
实验药物市售疏血通注射液(牡丹江友博药业有限责任公司)；本发明地龙注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；生理盐水实验方法取大鼠，分为本发明地龙水针剂剂组、输液组、粉针剂组、市售疏血通注射液组、生理盐水组，给药剂量30mg/kg，生理盐水等容不等量2次/日，次日给药1次后用1％戊巴比妥钠(剂量05ml/100g)腹腔注射麻醉。按文献(朱益栋主编弥散性血管内凝血北京人民卫生出版社，1982；279 293)的方法复制大鼠高凝血症模型。复制模型后即刻从颈动脉取血3ml，38％枸橼酸钠抗凝(1∶10)，制成富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)，计算血小板凝集率，血小板聚集率用SPA-4型血小板聚集仪测定，促聚剂用二磷酸腺苷，(ADP)，浓度10μmol/L。测定指标有一分钟聚集率(A1，)、最大聚集率(Amax)和最大聚集时间(Tmax)。见表2表2 不同制剂血小板凝集率的比较

注与生理盐水组比较**P＜0.01，与阳性对照组比较#P＜0.05实验3
利用血栓法测定对大白鼠血栓形成的影响。
实验药物市售疏血通注射液(牡丹江友博药业有限责任公司)；本发明地龙注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；生理盐水实验动物体重300-400克的大白鼠30只，雌雄不分。
实验方法将大鼠分组分为本发明地龙水针剂剂组、输液组、粉针剂组、市售疏血通注射液组、生理盐水组，分别给药，给药剂量30mg/kg，生理盐水等容不等量，给药后将大白鼠麻醉(戊巴比妥钠30-40mg/kg，ip)，仰卧位固定，分离气管，插入一塑料套管，并分离右颈总动脉及左颈外静脉，在聚乙烯管的中段放入一根长6厘米的丝线，以肝素生理盐水溶液，充满聚乙烯管，当聚乙烯管的一端插入左颈外静脉后，由聚乙烯管准确的注入肝素抗凝，然后再将聚乙烯管的另一端插入右颈总动脉，打开动脉夹，血液从右颈总动脉流至聚乙烯管，返回左颈外静脉，开放血流15分钟后断血流，迅速取出丝线称重，总重量减去丝线重量即得血栓重量。将空白组和另给药组的动物血栓湿重进行记录，进行计算，如表3所示表3 各给药组的血栓重量

注与生理盐水组比较**P＜0.01，与阳性对照组比较#P＜0.05实验4对小鼠ADP诱导的血栓性死亡的影响实验药物市售疏血通注射液(牡丹江友博药业有限责任公司)；本发明地龙注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；生理盐水实验方法取健康小鼠60只，雌雄各半，随机分组本发明地龙水针剂剂组、输液组、粉针剂组、市售疏血通注射液组、生理盐水组，每日尾静脉给药，给药量39mg/kg，连续7d，于末次给药后1h尾静脉注射ADP48.0ml/kg，记录动物死亡情况。
见表4表4 各组制剂对小鼠ADP诱导的血栓性死亡的影响比较

结论通过药理实验表明，本发明地龙注射制剂具有更好的药理作用。
四、制备实施例实施例1(1)取地龙，加入6％的氯化钠浸泡，清洗3次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为8000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.05的浓缩液；(3)将超滤浓缩液液用磷酸盐缓冲液调pH值为5.0，将超滤浓缩液经过CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化，CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至6.0进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至7.0进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；地龙蚓激酶占有效部位的含量85.0％(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位25克，药用辅料75克。
水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂1000平。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂1000瓶。
粉针剂将半成品加入药用辅料蔗糖，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂1000瓶。
实施例2(1)取地龙，加入8％的氯化钠浸泡，清洗5次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为10000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.10的浓缩液；(3)将超滤浓缩液用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调pH值为7.0，将超滤浓缩液经过CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调pH至7.0进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调pH至8.0进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；地龙蚓激酶占有效部位的含量95.0％(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位35克，药用辅料65克水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂1000瓶。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂1000瓶。
粉针剂将半成品加入药用辅料乳糖，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂1000瓶。
实施例3(1)取地龙，加入7％的氯化钠浸泡，清洗4次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为8000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.08的浓缩液；(3)将超滤浓缩液用磷酸盐缓冲液缓冲液调pH值为6.0，分分别将超滤浓缩液经过CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至6.5进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至7.5进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；地龙蚓激酶占有效部位的含量92.1％(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位28克，药用辅料72克水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂1000瓶。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂1000瓶。
粉针剂将半成品加入药用辅料甘露醇，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂1000瓶。
实施例4(1)取地龙，加入6％的氯化钠浸泡，清洗3次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为10000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.06的浓缩液；(3)将超滤浓缩液用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调pH值为5.5，分别将超滤浓缩液经过CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调pH至6.2进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调pH至7.3进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；地龙蚓激酶占有效部位的含量83.9％(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位30克，药用辅料70克水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂1000瓶。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂1000瓶。
粉针剂将半成品加入药用辅料蔗糖、乳糖，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂1000瓶。
实施例5(1)取地龙，加入8％的氯化钠浸泡，清洗5次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为10000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.09的浓缩液；(3)将超滤浓缩液用磷酸盐缓冲液调pH值为6.5，分别将超滤浓缩液经过CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至6.9进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至7.8进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；地龙蚓激酶占有效部位的含量92.0％(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位32克，药用辅料68克水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂1000瓶。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂1000瓶。
粉针剂将半成品加入药用辅料蔗糖、甘露醇，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂1000瓶。
实施例6(1)取地龙，加入7％的氯化钠浸泡，清洗4次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为10000的中空纤维柱进行超滤，留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.07的浓缩液；(3)将超滤浓缩液用磷酸盐缓冲液调pH值为6.0，分别将超滤浓缩液经过CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱和sephadex G50离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至6.3进行洗脱，sephadex G50离子交换凝胶色谱柱的流动相用磷酸盐缓冲液调pH至7.9进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙多肽半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；地龙蚓激酶占有效成分的含量91.7％(4)制剂的制备制剂处方为地龙有效部位34克，药用辅料66克水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂1000瓶。
输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂1000瓶。
粉针剂将半成品加入药用辅料甘露醇、乳糖、蔗糖，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂1000瓶。
权利要求
1.一种地龙注射制剂，其特征在于它是由从地龙提取纯化的有效部位25-35重量份，药用辅料65-75重量份制备成的；其特征还在于有效部位中地龙蚓激酶含量为80％-95％，重金属含量低于5PPM。其特征还在于注射制剂包括水针剂、输液剂、粉针剂。
2.一种地龙注射制剂的制备方法，其特征包括以下步骤(1)取地龙，加入6％-8％的氯化钠浸泡，清洗3-5次，去除黄色黏液物质，加入注射用水，洗去杂质，用电动绞肉机充分搅碎使成粗制匀浆，加入灭菌生理盐水，充分摇匀后，放置4℃冰箱过夜，经浸泡的生理盐水进行离心，在4℃以5000转/分离心30分钟，得到上清液；(2)将上清液用截留分子量为8000-10000的中空纤维柱进行超滤，保留循环液，浓缩到20℃时相对密度为1.05-1.10的浓缩液；(3)将超滤浓缩液用缓冲液调pH值为5.0-7.0，将超滤超滤液经过A离子交换凝胶色谱柱和B离子交换凝胶色谱柱进行分离纯化A离子交换凝胶色谱柱的流动相用缓冲液调pH至6.0-7.0进行洗脱，B离子交换凝胶色谱柱的流动相用缓冲液调pH至7.0-8.0进行梯度洗脱；收集单一组分，将各个单一组分分别进行抗凝血酶活性检测，将有活性的单一组分合并后除菌过滤，并留样检测，得到地龙有效部位半成品，仍冻存于-20℃冰柜中，得到提取物洗脱液浓缩脱盐，得到半成品；(4)制剂的制备水针剂将半成品，用注射用水调整浓度后，分装，检测，得到地龙水针剂。输液剂将半成品加入葡萄糖，用注射用水调整浓度，分装，检测。得到地龙输液剂。粉针剂将半成品加入药用辅料，用注射用水调整浓度，分装到西林瓶中，干燥，检测，得到地龙粉针剂。
3.根据权利要求2所述一种地龙注射制剂的制备方法中的缓冲液为磷酸盐缓冲液和三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(Tris-HCL)的一种。
4.根据权利要求2所述一种地龙注射制剂的制备方法中A离子交换凝胶色谱柱为CM-sephadex C25离子交换凝胶色谱柱。
5.根据权利要求2所述一种地龙注射制剂的制备方法中B离子交换凝胶色谱柱为sephadex G50离子交换凝胶色谱柱。
全文摘要
本发明公开了一种地龙注射制剂及其制备方法，其特征在于从地龙提取有效部位，纯化后加入药用辅料，制备成地龙注射制剂；其特征还在于本发明采用6％－8％氯化钠对地龙进行处理，除去地龙毒素，采用生理盐水浸泡、超滤、离子交换有机结合的方法，得到有效部位，制备成注射制剂，控制重金属含量低于5PPM，药理实验结果表明，本发明各组制剂具有很好的安全性，与同类品种比较具有更好的药理作用。
文档编号A61P9/12GK1891235SQ20051008031
公开日2007年1月10日 申请日期2005年7月1日 优先权日2005年7月1日
发明者张晴龙 申请人:张晴龙