专利名称：乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种具有抗肿瘤的活性化合物——乙酰氟苯水杨酰胺类 化合物，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。
(二)
背景技术：
恶性肿瘤是严重危害人类健康的常见病之一。据最新报道，全世界有
4000多万人患恶性肿瘤，其中每年新增患者卯O多万、死亡700多万，我国 每年恶性肿瘤发病人数约160万、死亡约130万。目前恶性肿瘤发生与死亡 还有日趋严重的趋势，有些地区已经成为人口死亡的首要原因。因此，开 发新颖的抗肿瘤药物具有重要的意义。
乙酰氟苯水杨酰胺类化合物是一种含氟原子的化合物。由于氟原子半 径小、又具有最大的电负性，所形成的C-F键能要比C-H键能大得多， 增加了含氟有机物的稳定性；且由于氟原子的体积小，因而常认为是H 原子的非经典的电子等排体，易产生拮抗作用，即不干扰含氟药物与相 应细胞受体间的相互作用，能在分子水平代替正常代谢药物，欺骗性地掺 入生物大分子，导致致死合成。当药物分子中引入氟原子时，其电效应和 模拟效应不仅改变了分子内部电子密度的分布，而且还能提高化合物的脂 溶性和渗透性，在生物膜上的溶解性得到增强，促进其在生物体内吸收与 传递速度，使生理作用发生变化。所以，含氟药物具有用量少、毒性低、 药效高、代谢能力强等特点。含氟药物的研究开发，主要集中在含氟芳香、杂环化合物的研究开发 上，如二氟尼柳(氟苯水杨酸)具有很好的抗炎活性。虽然二氟尼柳作为 非甾体抗炎药已经应用于临床中，但通过对二氟尼柳进行结构修饰，制备 具有抗肿瘤活性的含氟新药，具有非常重大的意义，也必将引起越来越多 的科学工作者的关注。
发明人前期研究中，制备了结构如式(I)所示的乙酰氟苯水杨酰胺 类化合物。
式(I )中
Ri为C1 C6的烷基或取代垸基、C3 C6的环烷基、C6 C10的芳 基或取代芳基，所述取代垸基的取代基为苯基、卤素、硝基或C1 C3 垸氧基，所述取代芳基的取代基为卤素、硝基、C1 C3垸氧基、Cl C3的烷基。
式(I)所示的化合物已在中国专利公开号CN101029010A中公开， 并公开了在制备抗炎药物中的应用。

发明内容
本发明公开了式(I)所示化合物的医药新用途，如式(1-1) ~式(1-7) 所示之一的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用<formula>formula see original document page 6</formula>
本发明所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物中的应 用，所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物优选为式(1-1 )、式(1-3)、式(1-4)、 式(1-5)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物，更优选为式(1-1)、式(1-3)、 式(1-4)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物，最优选为式(1-1)、式(1-6) 或式(1-7)所示的化合物。
较为具体的，经发明人实验证实，所述的肿瘤为A549细胞株导致的 肺癌时，式(1-1)、式(1-2)或式(1-7)所示的化合物具有一定的抗肿瘤活性。
所述的肿瘤为Ishikawa细胞导致的子宫内膜癌时，式(1-1)、式(1-6) 或式(1-7)所示的化合物具有非常显著的抗肿瘤活性，式(1-3)或(1-4) 所示的化合物具有显著的抗肿瘤活性，式(1-5)具有较好的抗肿瘤活性。
本发明所涉及的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物的制备方法及性质和特 性参数，已在中国专利公开号CN101029010A和Bioorg&MedChemLett, 2009, 19(2)， 516-519中所述。
本发明所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物应用的有益效果主要体现
在(l)提供了一种新的有显著抗肿瘤活性的抗肿瘤药物，为新药筛选提 供了研究基础；(2)式(1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物具有非 常显著的抗肿瘤作用，式(1-3)或式(1-4)所示的化合物具有显著的抗 肿瘤作用，式(1-5)所示的化合物具有较好的抗肿瘤作用，式(1-2) 所示的化合物具有一定的抗肿瘤作用。(3)所述的肿瘤为A549细胞株 导致的肺癌时，式(1-1)、式(1-2)或式(1-7)所示的化合物具有一定的 抗肿瘤活性。(4)所述的肿瘤为Ishikawa细胞导致的子宫内膜癌时，式 (1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物具有非常显著的抗肿瘤活性， 式(1-3)或(1-4)所示的化合物具有显著的抗肿瘤活性。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围 并不仅限于此
制备乙酰氟苯水杨酰胺类化合物
按照中国专利公开号CN101029010A所述的制备方法制备式(1-1) ~式(1-7)所示的化合物I-l I-7。
实施例1~7:抗肺癌活性测试 体外抗肿瘤活性测试方法
A. 原理细胞通过线粒体水解酶将噻唑兰(MTT)分解为不溶于水
的兰紫色结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜溶解，用酶联免疫
检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，间接反映细胞的增殖情况和数 量变化。
B. 细胞A549，肺癌细胞株。
C. 实验步骤
(1)样品的准备对于可溶样品，每lmg用20pLDMSO溶解， 取2pL用1000 培养液稀释，使浓度为100pg/mL，再用培养液连续 稀释至使用浓度。
(2) 细胞的培养
培养基的配制每1000 mL培养基中含80万单位青霉素、1.0 g链 霉素、10%灭活小牛血清。
细胞的培养将肿瘤细胞接种于培养基中，置37°C、 5% CCb培养 箱中培养，3 5d传代。
(3) 测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将细胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成lxl06/mL，加 到96孔细胞培养板中，每孔100(iL，置37'C、 5% C02培养箱中培养。 接种24h后，倾去培养基，加入用培养基稀释的样品，每孔200^iL，每 个浓度加3孔，置37'C、 5% C02培养箱中培养，72h后在细胞培养孔 中加入5 mg/mL的MTT，每孔10 ^L，置37'C孵育3h，加入DMSO，每孔150pL，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在490nm波长下 比色。以同样条件用不含样品、含同样浓度DMSO的培养基培养的细胞 作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度(IC50)。 对比例1
按照实施例1 7的体外抗肿瘤活性测试方法进行测试，所不同的是，
使用的样品是顺铂药 品。
抗肿瘤活性测试结果
将制备的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物I -1 I -7进行了抗八549活性
测试，试验结果如下
表h各化合物对A549的IC5Q (,d/L)
实施例化合物IC50 pmol/L评价
1I -120.49弱效
2I國242.64弱效
3I -386.21无效
4I -4111.12无效
5I -5124.71无效
61-6101.12无效
7I 730.70弱效
对比例l顺铂8.73显著
按照抗肿瘤活性的评价标准，化合物I -1、 I -2和I -7具有一定的抗 A549肺癌细胞活性。
实施例8 14:抗子宫内膜癌活性测试 测试方法体外抗肿瘤活性测试方法。
9A. 原理细胞通过线粒体水解酶将噻唑兰(MTT)分解为不溶于水 的兰紫色结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜溶解，用酶联免疫
检测仪在4卯nm波长处测定其光吸收值，间接反映细胞的增殖情况和数 量变化。
B. 细胞Ishikawa，子宫内膜癌细胞株。
C. 实验步骤
(1)样品的准备对于可溶样品，每lmg用20^LDMSO溶解， 取2pL用1000 |止培养液稀释，使浓度为100pg/mL，再用培养液连续 稀释至使用浓度。
(2) 细胞的培养
培养基的配制每1000 mL培养基中含80万单位青霉素、1.0 g链 霉素、10%灭活小牛血清。
细胞的培养将肿瘤细胞接种于培养基中，置37°C、 5% C02培养 箱中培养，3 5d传代。
(3) 测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将细胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成lxl06/mL，加 到96孔细胞培养板中，每孔100)aL，置37。C、 5% C02培养箱中培养。 接种24h后，倾去培养基，加入用培养基稀释的样品，每孔200pL，每 个浓度加3孔，置37"C、 5% C02培养箱中培养，72h后在细胞培养孔 中加入5 mg/mL的MTT，每孔10 ^L，置37'C孵育3h，加入DMSO，每 孔150pL，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在490nm波长下 比色。以同样条件用不含样品、含同样浓度DMSO的培养基培养的细胞 作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度(IC50)。对比例2
按照实施例8 14的体外抗肿瘤活性测试方法进行测试，所不同的是，
使用的样品是顺铂药 品。 抗肿瘤活性测试结果
将制备的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物I -1 I -7进行了抗Ishikawa活 性测试，试验结果如下
表2:化合物对Ishikawa的IC5Q (pmol/L)
实施例化合物IC50 萍ol/L评价
8I -10.94非常显著
91-281.18无效
101-34.74显著
11I -46.11显著
12I國512.54有效
13I -60.35非常显著
141-70.47非常显著
对比例2顺铂12.20有效
按照抗肿瘤活性的评价标准，化合物I-1、 I-6和I-7具有非常显著 的抗Ishikawa子宫内膜癌细胞活性，化合物I -3和I -4具有显著的抗 Ishikawa子宫内膜癌细胞活性，化合物I -5具有较好的抗151^&&*3子宫内
膜癌细胞活性。
ii
权利要求
1. 如式(I-1)～式(I-7)所示之一的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用；
2.如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于，所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为 式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)、式(1-6)或式(1-7) 所示的化合物。
3. 如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于，所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合 物。
4. 如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于，所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为 式(1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物。
5. 如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为式(1-1)、式(1-2)或式(1-7)所示的化合物，所述的肿瘤为A549细胞株导致的肺癌。
6. 如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)、式(1-6)或式(I隱7)所 示的化合物，所述的肿瘤为Ishikawa细胞导致的子宫内膜癌。
7. 如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物， 所述的肿瘤为Ishikawa细胞导致的子宫内膜癌。
8. 如权利要求1所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于所述的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物为式(1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物，所述的肿瘤为Ishikawa 细胞导致的子宫内膜癌。
全文摘要
本发明公开了如式(I-1)～式(I-7)所示之一的乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明提供了一种新的有显著抗肿瘤活性的抗肿瘤药物，为新药筛选提供了研究基础；其中，式(I-1)、式(I-6)或式(I-7)所示的化合物具有非常显著的抗肿瘤作用，式(I-3)或式(I-4)所示的化合物具有显著的抗肿瘤作用，式(I-5)所示的化合物具有较好的抗肿瘤作用，式(I-2)所示的化合物具有一定的抗肿瘤作用。
文档编号A61P35/00GK101502524SQ20091009668
公开日2009年8月12日 申请日期2009年3月13日 优先权日2009年3月13日
发明者胡红丹, 胡金清, 钟光祥 申请人:浙江工业大学