专利名称：4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯固体分散体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药物组合物领域，具体涉及4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的固 体分散体及其制备方法。
背景技术：
恶性肿瘤严重威胁着人类的生命，“第六届中国肿瘤学术大会"最新资料显 示，中国每年新发现癌症患者有220多万人，死亡160多万人，近20年来肿瘤死亡率上 升了 29.42%。传统化疗药物和放疗等杀伤性治疗手段，会导致骨髓抑制、消化道反应、 脱发、肝肾损害等严重的不良反应，而肿瘤细胞的诱导分化治疗不杀伤正常细胞，患者 副反应小，日益受到广泛关注。目前诱导分化剂全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)已成为治疗白血病等恶性肿瘤的首选药物之一。但是，ATRA引起的皮肤、粘膜 损害、恶心、呕吐、维甲酸综合征等不良反应以及耐药性与高复发率，极大限制了其应 用。因此国内外对维甲酸类药物的结构展开大量的修饰工作，其中，美国强生公司开发 的化合物芬维A胺毒性远较其它维甲酸类化合物低，且耐药性发生率低，对多种实体瘤 均有直接的抑制作用，目前国外已进入了临床试验，但该药水溶性差，生物利用度低。本课题组以芬维A胺为出发点优化设计并合成了一系列含有吸电子基团-三 氟甲基或三氟甲氧基的维甲酸衍生物25个，随后考察其对白血病细胞株NB4细胞的抑 制增殖和诱导分化活性，筛选出了抑制增殖诱导分化活性最强的4-氨基-2-三氟甲基 苯基维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethy卜phenyl retinate，ATPR)。该化合物在生命体 内酯酶的催化下缓慢释放出维甲酸，可以大大降低维甲酸的新陈代谢速度，因此可减少 由于代谢速度过快所引起的副作用且具有较好的稳定性，经过进一步研究和开发将成为 治疗恶性肿瘤和白血病的创新性药物。目前我们已经申请了中国专利1项(申请号 CN200810110794.1)和国际专利申请1项(申请号PCT/CN2009/000605)。但本发明前 期研究发现，此药物水中溶解度较低，疏水性强，将其制成分散片等剂型亦不能明显提 高其溶出速度，口服生物利用度低，势必直接影响到其制剂开发和临床应用。

发明内容
本发明的目的是针对上述4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的水溶性低、溶出 度差等问题，提供以一种水溶性好、溶出速度快的固体分散体。本发明的另一个目的是提供上述固体分散体的制备方法。本发明在前期研究曾采用聚乙二醇6000(PEG6000)作为载体制备固体分散体， 发现只有将载体和药物的比例高于9 1时，才有明显的促进溶出作用，但是考虑到固体 分散体将被制成胶囊或片剂等剂型，届时再添加一定比例的辅料将会导致偏重过大的现 象，不利于患者吞咽。在后续的试验中，发明人发现在众多的固体分散体载体中，最适合用来制备4_氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯固体分散体的是聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物泊 洛沙姆188 (Poloxamer 188，Lutrol F68)，在较低的比例情况下就能够起到较好的增溶效果。本发明采用固体分散技术，利用聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物泊洛沙姆 188 (Lutrol F68)作为载体，制备4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的固体分散体，包 括4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯和聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物，质量比为 1 2-1 12 ；先将载体60°C水浴加热熔融，将4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯用适 量无水乙醇溶解，待载体完全熔融时加入4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯溶液，搅拌 均勻，加热挥发除去无水乙醇，待混合物呈粘稠状态时，加入适量比例的填充剂，搅拌 均勻，迅速冰浴冷却使其固化，-20°C冰箱冷冻过夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出， 粉碎。上述填充剂为乳糖或微晶纤维素。传统的固体分散体制备方法的干燥程序均采用直接加热挥干有机溶剂的方法， 干燥后期混合物较为粘稠，干燥效率低；干燥所得的产物粉碎时较粘，很大一部分产物 黏在粉碎容器上，导致实验收率较低；且产物粉末流动性差，不能满足后续制剂要求。 本发明采用的制备方法，因为加入填充剂可以加快干燥步骤，产物脆性增强，易于粉 碎，且粉末流动性增加，利于后续制剂工艺的完成。所得的固体分散体进行差示扫描量热分析，结果显示，4-氨基-2-三氟甲基苯 基维甲酸酯在55.52°C有一吸热峰，Lutrol F68在50.22°C有一吸热峰，固体分散体4-氨 基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯吸热峰消失，在48.52°C有一吸收峰，较Lutrol F68的吸热 峰前移，说明固体分散体中4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯与Lutrol F68形成低共熔 物。物理混合物DSC曲线4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯吸热峰消失，与固体分散 体的DSC曲线相似，48.89°C有一吸热峰，其原因是，在升温过程中，Lutrol F68逐渐熔 融，4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯熔于其中，在Lutrol F68熔点附近已经形成共熔 物。固体分散体中4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯以分子的形式存在，而不是结晶的 形式。对不同比例的固体分散体进行溶出实验，结果显示，ATPR-Lutrol F68固体分散 体中载体载体比例越大，药物溶出越快。其中，1 2比例的固体分散体虽然溶出速率高 于物理混合物和原料药，但是增加溶出的效果不明显；1 4比例以上的溶出效果较好， 其中1 12固体分散体10分钟累计溶出率接近90%，1 8与1 12固体分散体60min 累计溶出率均在95%以上，但是过高的载体比例可能会产生过饱和的现象，即为过饱和 溶液，极易重新聚集成大颗粒，导致溶出实验过程中会产生累计溶出速率稍有下降的现 象，因此优选比例范围为1 4-1 8，最优比例为1 8制备固体分散体，进行进一步 制剂研究。制得的固体分散体可与普通的药剂填充剂配合，制成适当的剂型，如针剂、输 液、片剂、粉针、颗粒剂、胶囊剂、片剂等。通常以口服制剂为主，当然也可以采用 其他给药方式。本发明制备的固体分散体在制备诱导分化抗肿瘤药物的制备中起重要作 用，为患者提供新一代的、副作用小、疗效好的抗肿瘤新药。本发明的有益效果本发明以Lutrol F68为载体，制备了 4_氨基_2_三氟甲基苯基维甲酸酯的固体分散体，显著提高了其溶出速度以及溶解度；当药物与载体的比例 达到1 8与1 12时，固体分散体60min累计溶出率均在95%以上，为提高其生物利 用度提供了新的手段。本发明采用溶剂熔融加填充剂的方法制备固体分散体，加快了干 燥步骤，使产物脆性增强，易于粉碎，且粉末流动性增加，解决了传统干燥方法存在的 产物粘性大、难粉碎、流动性差的缺点，利于后续制剂工艺的完成。


图1原料药、物理混合物、固体分散体的体外溶出曲线图；图2原料药、物理混合物、固体分散体的差示扫描量热图谱；其中图1中a为1 12固体分散体；b为1 8固体分散体；C为1 4固体 分散体；d为1 2固体分散体固体分散体；e为1 4物理混合物；f为ATPR原料 药。图2中a为ATPR原料药；b为Lutrol F68 ； c为ATPR-Lutrol F68物理混合物；d为 ATPR-Lutrol F68 固体分散体(1 4)
具体实施例方式实施例1固体分散体、物理混合物的制备及溶出速度实验1仪器与试药1.1 仪器ZRS-8G智能溶出仪(天津大学无线电厂)，高效液相色谱仪(CTO-IOAS柱温 箱，LC-20AT泵，SPD-20AV紫外检测器，日本岛津公司)，DZF-6050真空干燥箱(上 海新苗医疗器械制造有限公司)，RVlO旋转蒸发仪及HBlO水浴锅(IKA实验室技术有限 公司)，DSCQ2000差示扫描量热仪(美国TA仪器公司)。1.2 试药ATPR(本实验室提供，纯度98%以上)，Lutrol F68 (BASF)，十二烷基硫酸钠
(分析纯，天津博迪化工有限公司)，无水乙醇(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)， 异丙醇(分析纯，天津博迪化工有限公司)，甲醇(色谱纯，天津四友精细化学品有限公 司)。2方法与结果2.1 ATPR固体分散体的制备按照1 2、1 4、1 8、1 12称取4_氨基_2_三氟甲基苯基维甲酸酯与 Lutrol F68,先将载体60°C水浴加热熔融，将4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯用适量 无水乙醇溶解，待载体完全熔融时加入4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯溶液，搅拌均 勻，加热挥发除去无水乙醇，待混合物呈粘稠状态时，加入与固体分散体重量比0.5 1 的微晶纤维素，搅拌均勻，迅速冰浴冷却使其固化，-20°C冰箱冷冻过夜，置真空干燥箱 中干燥24h，取出，粉碎。2.2检测方法的建立与确证2.2.1检测波长的确定以甲醇为溶剂，配置10 μ g/ml浓度的ATPR溶液，进行紫外扫描，结果药物在 367nm有最大吸收。
2.2.2 HPLC 色谱条件色谱柱大连伊利特Hypersil ODS柱(250mmX 4.6mm，5 μ m)；流动相甲 醇-水(92 8)；流速1.000mL/min ；检测波长367nm ；柱温30°C ；进样量 20 μ L。2.2.3标准曲线的制备精密称取ATPR5.00mg于50mL量瓶中，甲醇释至刻度，得浓度为O.lOOmg/ ml的母液。精密量取ATPR母液适量，用蒸馏水稀释配成0.100、0.300、0.500、1.00、 3.00、5.00、10.00和20.00 μ g/mL的系列浓度标准液。分别进样测定，以峰面积A对浓 度C进行线性回归，得标准曲线方程为A= 112773C+2576.3，R= 1。2.2.4回收率试验用分别于载体材料的甲醇溶液中，按照药物与载体1 4比例，精密加入不同量 的ATPR，配制低、中、高3种浓度(1、5和lOmg/L)的供试品溶液，每种浓度平行配制 5份，各取20 μ L进行HPLC测定，考察回收率，分别为98.42%，100.20%, 101.86%。2.2.5精密度试验取低、中、高浓度(1、5和lOmg/L)的溶液各1份，进行HPLC测定，连续测 定 5 次，RSD 分别为 0.28%，0.093%, 0.071%。2.3溶出速率试验将相当于ATPR 5mg的固体分散体装入胶囊，按照《中国药典》2010年版二部 附录X C溶出度测定第二法(桨法)进行试验，溶出介质为25%异丙醇制成的0.5%十二 烷基硫酸钠溶液1000ml，转速为100r/min，温度(37士0.5) °C。分别在5、10、20、 30、45、60min取样5mL，0.45 μ m微孔滤膜滤过，同时补加5mL同温同体积溶出介质， 取续滤液，用HPLC仪器测定ATPR的含量。测定结果代入标准曲线计算浓度，并换算 成累计溶出百分率。将ATPR原料药5mg、比例为1 4的ATPR-Lutrol F68物理混合物(相当于 ATPR 5mg)分别装入胶囊，按照上述方法测定，与固体分散体的累计溶出百分率进行比 较。结果见图1。结果显示，ATPR-Lutrol F68固体分散体中载体载体比例越大，药物溶出越快。 其中，1 2比例的固体分散体虽然溶出速率高于物理混合物和原料药，但是增加溶出的 效果不明显；1 4比例以上的溶出效果较好，其中1 12固体分散体10分钟累计溶出 率接近90%，1 8与1 12固体分散体60min累计溶出率均在95%以上，但是过高的 载体比例可能会产生过饱和的现象，即为过饱和溶液，极易重新聚集成大颗粒，导致溶 出实验过程中会产生累计溶出速率稍有下降的现象，因此优选比例范围为1:4-1: 8， 最优比例为1 8制备固体分散体，进行进一步制剂研究。2.4差示扫描量热分析称取ATPR、Lutrol F68、ATPR-Lutrol F68 物理混合物、ATPR-Lutrol F68 固体
分散体(1 4)各2-3mg进行差示热扫描(DSC)，测试条件以空铝坩埚为参比，N2气 氛，升温速度10°C · mm1,扫描范围O 90°C，结果见图2。结果显示，ATPR在55.52°C有一吸热峰，Lutrol F68在50.22°C有一吸热峰，固体 分散体ATPR吸热峰消失，在48.52°C有一吸收峰，较Lutrol F68的吸热峰前移，说明固体分散体中ATPR与Lutrol F68形成低共熔物。物理混合物DSC曲线ATPR吸热峰消失， 与固体分散体的DSC曲线相似，48.89°C有一吸热峰，其原因是，在升温过程中，Lutrol F68逐渐熔融，ATPR熔于其中，在Lutrol F68熔点附近已经形成共熔物。实施例2不同方法制备固体分散体粉末流动性考察1.传统方法制备固体分散体处方 1-1(1 2)处方 2-1(1 4)处方 3-1 (1 8)处方 4-1 (1 12)ATPR5g 4g 2g IgLutrol F68 IOg16g 16g 12g_制成产物15g20g 1 8g 13g按照处方比例称取4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯与Lutrol F68，先将载体 60°C水浴加热熔融，将4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯用无水乙醇溶解，待载体完全 熔融时加入4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯溶液，搅拌均勻，加热挥发除去无水乙 醇，-20°C冰箱冷冻过夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出，粉碎。2.本发明所述制备方法制备含不同比例及种类填充剂的固体分散体2.1药物与载体材料重量比为1 2的处方处方1-2处方1-3处方1-4处方1_5处方1_6处方1_7处方1_8ATPR 5g 5g 5g 5g 5g 5g 5gLutrol F68 IOg IOg IOg IOg IOg IOg IOg微晶纤维素15g 7.5g 1.5g - - - 7.5g乳糖- - - 15g 7.5g 1.5g 7.5g_制得产物30g 22.5g 16.5g 30g 22.5g 16.5g 30g2.2药物与载体材料重量比为1 4的处方处方2-2处方2-3处方2_4处方2_5处方2_6处方2_7处方2_8ATPR 4g 4g 4g 4g 4g 4g 4gLutrol F68 16g 16g 16g 16g 16g 16g 16g微晶纤维素20g IOg 2g - - - IOg乳糖- - - 20g IOg 2g IOg_制得产物40g 30g 22g 40g 30g 22g 40g2.3药物与载体材料重量比为1 8的处方处方3-2处方3-3处方3-4处方3_5处方3_6处方3_7处方3_8ATPR 2g 2g 2g 2g 2g 2g 2gLutrol F68 16g 16g 16g 16g 16g 16g 16g微晶纤维素18g 9g 1.8g9g乳糖- - - 18g 9g 1.8g 9g_制得产物36g 27g 19.8g 36g 27g 19.8g 36g
2.4药物与载体材料重量比为1 12的处方处方4-2处方4-3处方4_4处方4_5处方4_6处方4_7处方4_8ATPR Ig Ig Ig Ig Ig Ig IgLutrol F68 12g 12g 12g 12g 12g 12g 12g微晶纤维素13g 6.5g 1.3gIOg乳糖-- - 13g 6.5g 1.3g 3g_制得产物26g 19.5g 14.3g 26g 19.5g 14.3g 26g按照处方称取4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯与Lutrol F68，先将载体60°C 水浴加热熔融，将4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯用无水乙醇溶解，待载体完全熔融 时加入4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯溶液，搅拌均勻，加热挥发除去无水乙醇，待 混合物呈粘稠状态时，加入处方比例的微晶纤维素或乳糖，搅拌均勻，迅速冰浴冷却使 其固化，-20°C冰箱冷冻过夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出，粉碎。3.粉末流动性考察3.1休止角测定采用固定圆锥底法。底盘为直径5cm的圆台，将两只玻璃漏斗上下交错重叠， 固定在铁架台上，下漏斗出口与底盘距离为3.5-6.0cm之间。分别取各处方粉末若干，从 上部漏斗慢慢加入，使粉末经过两只漏斗的缓冲逐渐堆积在底盘上，形成锥体，直至得 到最高的锥体为止。测定锥体的高H，每种样品各测定三次，取平均值，按下式计算休 止角α =arctg(H/R)其中，α为休止角，R为底盘半径。测定后将样品回收。3.2 结果3.2.1药物与载体材料重量比为1 2时各处方休止角测量结果见下表1。表1药物与载体材料重量比为1 2时各处方休止角测量结果
权利要求
1.一种4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的固体分散体，其特征在于含有4-氨 基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯和固体分散体载体材料，其重量比为1 2-1 12。
2.如权利要求1所述的固体分散体，其特征在于所述的固体分散体载体材料为泊洛沙 姆 188。
3.如权利要求1所述的固体分散体，其特征在于其中4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲 酸酯和固体分散体载体材料的重量比为1:4-1: 8。
4.如权利要求1所述的固体分散体，其特征在于其中4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲 酸酯及固体分散体载体材料的重量比为1 8。
5.如权利要求1、2、3或4所述的固体分散体的制备方法，其特征在于先将载体60°C 水浴加热熔融，将4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯用无水乙醇溶解，待载体完全熔融 时加入4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯溶液，搅拌均勻，加热挥发除去无水乙醇，待 混合物呈粘稠状态时，加入填充剂，搅拌均勻，迅速冰浴冷却使其固化，-20°C冰箱冷冻 过夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出，粉碎。
6.如权利要求5所述的固体分散体的制备方法，其特征在于所述填充剂为乳糖、微晶 纤维素或其混合物。
7.如权利要求5所述的固体分散体的制备方法，其特征在于所述填充剂重量与固体分 散体重量的比例为1-0.1 1。
8.如权利要求7所述的固体分散体的制备方法，其特征在于所述填充剂重量与固体分 散体重量的比例为0.5 1。
全文摘要
本发明涉及药物组合物领域，具体涉及含有4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的固体分散体及其制备方法。本发明利用泊洛沙姆188作为载体，制备4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的固体分散体，显著提高了其溶出速度以及溶解度。当药物与载体的比例达到1∶8以上时，固体分散体60min累计溶出率均在95％以上。本发明采用溶剂熔融加填充剂的方法制备固体分散体，加快了干燥步骤，使产物脆性增强，易于粉碎，且粉末流动性增加，解决了传统干燥方法存在的产物粘性大、难粉碎、流动性差的缺点，利于后续制剂工艺的完成。本发明的固体分散体可用于制备诱导分化抗肿瘤的药物。
文档编号A61K31/232GK102008443SQ20101054789
公开日2011年4月13日 申请日期2010年11月17日 优先权日2010年11月17日
发明者汤继辉, 王祺, 石静波, 臧洪梅, 邓倩, 陈飞虎 申请人:安徽医科大学