专利名称：吖啶衍生物及其应用的制作方法
发明的所属领域本发明总地涉及吖啶衍生物，特别是涉及9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的可药用盐，其制备方法及其在生产用于治疗老年性痴呆的药物中的应用。
背景技术：
1907年，Alois Alzheimer首先描述了一个患有进行性痴呆的51岁妇女，最后在四年半时间内不治死亡的病例。尸检发现病人的脑组织萎缩，并可见神经纤维的弥散性退行性改变和老年斑。目前有几个名称描述这种疾病，包括Alzheimer’s病、Alzheimer’s型老年性痴呆(SDAT)、早老性痴呆和原发性退行性痴呆。在中国，以北京市为例，据统计65岁以上老人的患病率为7.5％，并且每隔5年发病率增长约一倍。在世界范围内，这种疾病已影响到大约10％的65岁以上人群，并且其发病率也在以每年1％的速度增加。因此，随着危险人群的不断增加，老年性痴呆已成为当今社会的一个主要健康问题，并且成为老年人最常见的死亡原因之一。
老年性痴呆是一种主要影响老年人的神经退化性疾病，特征在于进行性智力和人格降低，以及记忆力、理解力、推理、定向和判断能力丧失。虽然老年性痴呆的发病原因尚不完全明确，但已从神经化学的角度对老年性痴呆的发病机理作了部分地限定(Davies et al.，“Selective Loss of Central Cholinergic Neurons inAlzheimer’s”，Lancet，1980)。许多研究者都已证明，病人尸检材料中与年龄相适应的胆碱乙酰基转移酶水平降低。事实上，该疾病的一个重要特征就是胆碱系统功能降低，特别是胆碱能神经元(即释放乙酰胆碱的神经元，据信其为参与学习和记忆机制的神经递质)的严重减损(Jones，at，al.，Intern.J.Neurosci.，Vol.50p.147，1990；Becker et al.，Drug Development Research，12，163-195，1988)。已知脑组织退化引起乙酰胆碱的部分丢失，而这种物质的存在又是记忆功能的发挥所必需的。因此，某些引起乙酰胆碱保留的药物将会对老年性痴呆的治疗发挥作用。已知乙酰胆碱在大脑中是被所谓的乙酰胆碱酯酶分解破坏的。可抑制乙酰胆碱酯酶作用的这类药物将使乙酰胆碱得以保留并有可能使丧失的记忆力得以恢复。
已知乙酰胆碱酯酶抑制剂可有效地提高胆碱能活性并用于改善老年性痴呆病人的记忆。通过抑制乙酰胆碱酯酶，这些抑制剂能够提高脑中神经递质乙酰胆碱的水平，进而改善记忆。Becker等人(Drug Development Research，12，163-195，1988)曾报道，胆碱酯酶抑制后的行为改变似乎是与脑中乙酰胆碱水平相一致的。
在目前已知的诸多药物中，通过对乙酰胆碱酯酶的突触抑制来改善胆碱能系统功能的药物，可能是一类最有希望的老年性痴呆治疗药物。例如，Summers等人首先静脉内使用1，2，3，4-四氢-5-氨基吖啶治疗老年性痴呆病人(Summers，et al.，.，Biological Psychiatry，Vol.16，PP.145-153，1981 and Summers，et al.，The EnglandJournal of Medicine，315，1241-1245，1986)。继后，美国专利4,816,456号(Summersand William)公开了口服使用1，2，3，4-四氢-5-氨基吖啶及其衍生物治疗中枢或外周神经系统胆碱能缺乏状态特别是老年性痴呆的方法。进而，美国专利5,202,440号(Desai and Manoj))描述了具有脑乙酰胆碱酯酶抑制活性，并用于治疗老年性痴呆的9-氨基-4-氧-1，2，3，4-四氢吖啶、9-氨基-2-氧-1，2，3，4-四氢吖啶、9-氨基-9-氟-4-氧1，2，3，4-四氢吖啶，和9-氨基4-氧-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶。另外，美国专利5,767,126号(Marchbanks and Roger)描述了用于治疗老年性痴呆的，没有肝脏毒性的9-氨基-1，2，3，4-四氢吖啶(Tactine，他克林)的多氢化和脱氢衍生物。美国专利4,942,237号公开了称为ISOXAZOLO(5，4，3-KL)ACRIDINE的吖啶衍生物及其在治疗疼痛和各种记忆功能障碍中的应用。
在本发明之前，市场上很早就出现了基于9-氨基-1，2，3，4-四氢吖啶的老年性痴呆治疗药物，但这种通用名为Tacrine(他克林)的药物对肝、肾组织有很大的毒付作用(P.Hammell et al.，J.Clin.Gastroenterol 12329-331，1990)，因此大大限制了它的使用。而本发明的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶则是虽与9-氨基-1，2，3，4-四氢吖啶结构相似但确又不同的一种全新的化合物，迄今为止尚未见使用9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶，特别是显著降低了毒性并提高了水溶性的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的可药用盐作为治疗老年性痴呆的药物的报道。
发明的目的本发明的一个目的是提供具有下列结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶衍生物及它们的可药用酸加成盐， 根据本发明的一个优选实施方案，其中结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的衍生物包括1，2，3，4，5，6，7，或8位上的碳原子被选自氢、卤素、羟基、酰基、直链或分支链低级烷基、烷氧基、卤代烷基、或烷酰基，或酮基的基团取代的化合物。
根据本发明的一个优选实施方案，其中结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的可药用酸加成盐包括选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、高氯酸盐的无机酸盐，和选自甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、草酸盐、富马酸盐、顺乌头酸盐、己二酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐、烟酸盐、水杨酸盐、磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、棕榈酸盐和硬脂酸盐的有机酸盐。
本发明的另一个目的是提供用于治疗老年性痴呆症的药物组合物，其包括作为活性成分的治疗有效量的具有上述结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶，或其衍生物或它们的可药用酸加成盐，以及一种或多种医药上可接受的载体和/或赋形剂。
根据本发明的一个优选实施方案，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶衍生物包括1，2，3，4，5，6，7，或8位环碳原子被选自氢、卤素、羟基、酰基、直链或分支链低级烷基、烷氧基、卤代烷基、或烷酰基，或酮基的基团取代的化合物。
根据本发明的一个优选实施方案，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、高氯酸盐的无机酸盐，和选自甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、琥酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、草酸盐、富马酸盐、顺乌头酸盐、己二酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐、烟酸盐、水杨酸盐、磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、棕榈酸盐和硬脂酸盐的有机酸盐。其中优选的是硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、高氯酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、己二酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐和烟酸盐，并且其中特别优选的琥珀酸盐。
根据本发明的一个更优选的实施方案，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是选自硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、高氯酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、己二酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐和烟酸盐和的可药用酸加成盐。
根据本发明的一个特别优选的实施方案，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是琥珀酸盐。
根据本发明的一个优选实施方案，所说的药物组合物除含有作为基本活性成分的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物，或它们的可药用酸加成盐外，还可含有一种或多种具有相似或协同活性的其他天然的，或化学合成的或重组产生的化合物。所说的具有相似或协同活性的其他成分包括但不只限于具有乙酰胆碱酯酶抑制活性、改善中枢神经系统中胆碱能传递活性、毒蝇碱受体刺激活性以及外周血管特别是脑血管扩张活性的成分。
根据本发明的一个优选实施方案，其中所说的老年性痴呆包括神经退化性痴呆和血管性痴呆。
根据本发明的一个优选实施方案，所说的药物组合物可以是经胃肠道外或非胃肠道外途径给药的，其中包括但不只限于口服、局部、鼻内、气管内、皮内、皮下、黏膜、静脉内、肌肉内、颅内、腹腔内和脑脊髓腔内等途径。
发明的详细描述本发明涉及上述结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶及其衍生物或它们的可药用酸加成盐。本发明进一步涉及含有治疗有效量的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其可药用酸加成盐，以及一种或多种医药上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。本发明的药物组合物具有显著的胆碱酯酶抑制活性并可用于改善与胆碱能功能减低(例如老年性痴呆)有关的记忆功能障碍。与已知的吖啶类老年性痴呆治疗药物相比，本发明的药物组合物不仅进一步提高了胆碱酯酶抑制效果，而且显著地降低了有害副作用。
本说明书中使用术语“9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的衍生物”是指结构式(1)吖啶环的1，2，3，4，5，6，7，或8位上的碳原子被选自氢、卤素、羟基、酰基、直链或分支链低级烷基、烷氧基、卤代烷基、或烷酰基，或酮基的基团取代的化合物。
本说明书中使用术语“9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的酸加成盐”是指结构式(1)吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐，其中包括但不只限于选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、高氯酸盐的无机酸盐，和选自甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、草酸盐、富马酸盐、顺乌头酸盐、己二酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐、烟酸盐、水杨酸盐、磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、棕榈酸盐和硬脂酸盐的有机酸盐。
本说明书中使用术语“低级烷基”是指具有1-6个碳原子的直链或分支链烷基基团。所说的低级烷基的例子包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基，以及直链和分支链戊基和己基。相似的定义也适用于低级烷氧基、卤代烷基和烷酰基。
可使用本领域技术人员已知的化学合成方法(例如参见Moore andKornreich，Tetrahedron Letters，pp.1277，1963)，由氨基苯酰胺或尿素与环己烷衍生物(例如环己酮)，在适当的溶剂如二恶烷中缩合(脱氢并重排)，然后用碱处理缩合反应混合物，再用有机溶剂提取，即以高收率(约60％)得到预期的结构式(1)的吖啶。
为了改善基础化合物9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的水溶性质，提高其抑制乙酰胆碱酯酶、改善学习和记忆能力的生物学活性，并进一步降低其毒付作用，我们特别制备了包括该吖啶碱的硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、高氯酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、己二酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐和烟酸盐和在内的多种有机酸和无机酸盐。其中，为制备本发明的药物组合物，特别优选的盐是琥珀酸盐。
可以使用已知的常规方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶碱的酸加成盐。例如可以在选自乙醇、丙酮、二恶烷、乙酸乙酯等的有机溶剂内，使9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶与等摩尔量相应的酸反应，用乙醚或乙醚与丙酮的混合物沉淀后，再用醇和丙酮重结晶，或用乙醚和醇再沉淀即得到所需要的酸加成盐。可使用红外吸收光谱法和元素分析方法确定所得到的盐的结构及其纯度(参见实施例1-3)。
作为本发明药物组合物的基本活性成分，9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物或它们的可药用酸加成盐具有极好的乙酰胆碱酯酶抑制活性，特别适用于治疗老年性痴呆病人，改善或缓解病人因脑内神经递质乙酰胆碱降低导致的记忆功能障碍。我们的实验室研究结果特别是比较实验结果表明，与基于9-氨基-1，2，3，4-四氢吖啶的已知药物他克林相比，本发明的基于9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶盐的药物组合物对动物模型具有更为明显的记忆和学习能力改善作用(参见实施例4)。另一方面，本发明的药物组合物不仅有很好的水溶性质，而且还显著地降低了毒付作用(例如其半致死剂量约为临床日用药剂量的600-800倍)，因此可以长期使用而不至于对肝、肾等器官造成明显损害。我们的研究还表明，本发明的药物组合物对脑血管阻塞动物模型的学习和记忆障碍具有明显的功能改善作用(参见实施例5)。而且，本发明的药物组合物对大鼠实验性脑缺血也表现有很好保护作用(参见实施例6)。
本发明涉及的吖啶化合物可以单独使用，也可以以各种不同剂型的药物组合物的形式使用。可以将作为活性成分的有效量9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其可药用盐与医药上可接受的载体或赋形剂均匀地混合，以制备本发明的药物组合物。例如，可以制成溶液或悬浮液形式的适于胃肠道外途径给药的组合物，或者制成片剂、胶囊剂、粉末剂、颗粒剂等固体形式的，以及口服液、糖浆、口服悬浮液等液体形式的适于经胃肠道途径给药的组合物。
可以使用制药工业领域已知的任何方法(例如参见Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Pub.Co.，Easton，Pa.，1980)，以适于口服或非口服给药的单位计量形式制备本发明的药物组合物。适于胃肠道外给药的制剂可含有无菌水或盐水、聚乙二醇、油和氢化萘等常用的赋形剂。特别是，可以使用生物相容的、生物可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物、聚氧乙烯/聚氧丙烯共聚物作为赋形剂，以控制活性成分的释放。可用于本发明药物组合物的其他释放系统包括乙烯-乙烯乙酸酯共聚物颗粒、渗透泵、可植入的输注系统或质脂体等。吸入给药的制剂可含有乳酸、脱氧胆酸等赋形剂。其他胃肠道外给药的制剂中，例如直肠给药的制剂可含有水杨酸，含服给药的制剂可含有甘胆酸盐。
具体地洗，可以使用乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇和甲基纤维素等赋形剂，淀粉、海藻酸钠、羧甲基纤维素钙和结晶纤维素等崩解剂，硬脂酸镁和滑石等润滑剂，明胶、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素和羟丙基纤维素等黏结剂，和蔗糖脂肪酸酯、山梨醇脂肪酸酯等表面活性剂，以及着色剂、矫味剂、香料、分散剂等辅助成分，以常规方法制备片剂。
可以使用乳糖和甘露醇等赋形剂，淀粉等崩解剂，明胶等黏结剂，以常规方法制备颗粒剂。或者，可以使用乳糖和蔗糖等赋形剂，以常规方法制备粉末剂。使用明胶、水、蔗糖、阿拉伯胶、山梨醇、甘油、结晶纤维素、硬脂酸镁和滑石等，以常规方法制备胶囊剂。
可以使用水、生理盐水、植物油(如橄榄油和花生油)、油酸乙酯和丙二醇等溶剂，苯甲酸钠，水杨酸钠和氨基甲酸乙酯等增溶剂，氯化钠和葡萄糖等等渗剂，青霉素和链霉素及其他抗真菌剂等抗生素，苯酚、甲酚、对位羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、度米酚和山梨酸等防腐剂，抗坏血酸和焦磷酸钠等抗氧化剂，以常规方法制备可注射剂。在任何情况下，所说的可注射制剂均应是无菌和可流动并适于通过注射器注射给药的。另外，在生产、运输和储存条件下，所说的制剂还必须是稳定的，并能够对抗细菌和真菌等微生物的污染。
为了制备适于局部给药的制剂，例如可以将有效量的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其可药用盐溶解于水或其他适当的载体或介质中，并与适当的透皮吸收剂如二甲基亚砜或月桂氮卓酮混合，制成喷雾剂或气雾剂。另外，也可以使用甘油、硬脂酸镁、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、胆固醇、卵磷脂、甲基纤维素或羧甲基纤维素、滑石粉、乳糖、葡聚糖、淀粉等赋形剂，将本发明的药物组合物制成适于局部或通过皮肤或粘膜吸收给药的乳剂、霜剂、软膏、凝胶剂或栓剂(如阴道栓剂或直肠栓剂)。
另外，也可使用制药工业中已知的方法和辅助成份，将本发明的药物组合物制成微胶囊剂或脂质体包裹剂。
在本发明的药物组合物中，除了含有作为基本活性成分的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物或它们的可药用酸加成盐外，还可含有一种或多种合成的、天然的或重组产生的其他活性成分。例如，这些活性成分包括但不只限于同样具有乙酰胆碱酯酶抑制活性、改善中枢神经系统中胆碱能传递活性、毒蝇碱受体刺激活性以及脑血管扩张活性的成分。
一般说来，本发明药物组合物的口服给药剂量一般为0.1-100mg/kg/天，较好为1-80mg/kg/天，最好为5-50mg/kg/天；腹腔内或肌肉内注射给药剂量一般为0.05-100mg/kg/天，较好为0.1-80m/kg/天，最好为0.5-50mg/kg/天；静脉内注射给药剂量一般为0.01-100mg/kg/天，较好为0.05-80mg/kg/天，最好为0.1-50mg/kg/天。当然，本领域技术人员可以理解到，为有效地治疗病人所需的确切的给药剂量应根据待治疗的病症或病理状态的性质、严重程度、病人的年龄、体重和一般健康状态，所用药物的剂型、病人对所用药物的敏感性和耐受性，以及所使用的给药途径等因素，按照个体化的原则由临床医生确定。
我们的基础研究表明，与已知具有改善记忆功能和学习能力的其他吖啶类化合物相比，作为本发明药物组合物之基本活性成分的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的酸加成盐，具有更大的解离常数(pKa＝11.0)和完全不同的光谱特征(参见Belavsky，Collect.Czech Chem.Commun.42(9)28002-8，1977)。另外，用于本发明药物组合物的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的酸加成盐，在微生物体内的转化途径似乎也不同于已知具有同样生物学功能的其他吖啶类化合物。例如，前者在微生物的作用下转化为氮氧化物，而后者则代谢产生羟基化合物。9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的酸加成盐的所有这些特性不可避免地影响其生物学活性。因此，本领域技术人员很难根据结构相似性推测出这些盐的生物学活性。我们的药理学和毒理学研究进一步证实，用于本发明药物组合物的盐类化合物对模型动物具有显著的学习和记忆能力改善作用，可有效地预防实验动物因注射东莨菪碱或颈动脉血管结扎所致的学习获得和学习记忆能力丧失。而且这些盐的毒性和付作用很小。
下列实施例旨在进一步举例说明，而不是限制本发明。本领域技术人员可以理解到，在不背离本发明的精神和原则的前提下，对本发明的任何平行改变和改动都将落入本发明的待批权利要求范围内。
实施例实施例19-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶琥珀酸盐的制备将1.01g(0.005mol)吖啶碱基溶解于甲醇中，并向所得溶液内加入0.65g(0.0055mol)琥珀酸的甲醇溶液。混合均匀后向所得混合物中加入少量乙醚，并将所形成的白色沉淀4℃下放置20分钟。过滤后收集沉淀物并用乙醚洗涤3次，于100℃下干燥后得到熔点为198.8-203.1℃的题目化合物。
元素分析C13H13N2C1H6O4.HBr计算值C63.68；7.47；N8.74实测值C63.23；H7.70；N8.70红外(吸收)光谱分析890，1179，1287，1406，1423，1487，1549，1623，1651，1681，1720，2705，2834，2867，2926，3300，3190，3363。
实施例29-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶乙酸盐的制备将1.01g(0.005mol)吖啶碱基溶解于小量乙醇中，并向所得的溶液内加入乙酸数滴以将pH调至大约5.5，然后向其中加入丙酮和乙醚的混合物。如果没有形成沉淀，则加热蒸发除去溶剂得到透明的白色油状物。将此白色油状物与丙酮和乙酸乙酯混合后，得到约1.34g(78％)白色沉淀物。溶于异丙醇后，用丙酮+乙酸乙酯重结晶得到熔点为221-223℃的题目化合物。
元素分析C13H18N2CH3COOH.O.5H2O计算值C66.42；H8.48；N10.33实测值C66.24；H8.72；N10.29红外(吸收)光谱分析650，700，730，895，910，1010，1325，1382，1460，1568，1618，1648，1665，2660，2855，2935，3090，3205，3355。
实施例39-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶己二酸盐的制备加热下，将1.01g(0.005mol)吖啶碱基溶解于最小量异丙醇中。过滤所得溶液并向其中加入己二酸(0.73g)的异丙醇溶液，得到约1.65g(85％)白色沉淀物。过滤并用丙酮和乙醚再沉淀此白色沉淀物后即得到所需的题目化合物。熔点164-165℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C65.36；H8.02；N8.02实测值C65.32；H8.04；N7.85红外(吸收)光谱分析710，1080，1220，1280，1332，1410，1440，1470，1630，1670，2675，2855，2912，2940，3100，3195，3360。
实施例49-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶水杨酸盐的制备将1.01g吖啶碱基溶解于乙醇中，然后向所得溶液内加入水杨酸0.69g。反应后，如果没有出现沉淀，则继续加热蒸发此反应混合物，并向残留的油状物与颗粒的混合物内加入乙醚直到成为固体状态。将所得到的固体物重新溶解在丙酮和异丙醇的混合物中，再用乙醚沉淀。过滤并烘干颗粒状沉淀物后即得到约1.23g(69％)所需的题目化合物。熔点186-188℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C67.01；H7.31；N7.82实测值C66.77；H7.30；N7.64红外(吸收)光谱分析668，693，763，860，1250，1302，1335，1380，1453，1480，1568，1582，1620，1635，2850，2930，3100，3210，3355。
实施例59-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶马来酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的马来酸盐。熔点187-189℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C60.71；H7.14；N8.33实测值C60.86；H7.21；N8.21红外(吸收)光谱分析560，650，668，860，705，860，1060，1170，1190，1355，1461.1575，1634，2700，2850，2925，3100，3210，
3340，3410。
实施例69-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶苯甲酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的苯甲酸盐。熔点204-205℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C73.99；H7.34；N8.63实测值C73.91；H7.51；N8.56红外(吸收)光谱分析668，693，828，1368，1455，1463，1538，1553，1574，1612，1650，2670，2850，2930，3170，3200，3320，3330。
实施例79-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶对羟基苯甲酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的对羟基苯甲酸盐。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C67.01；H7.31；N7.82实测值C66.9；H7.4；N7.92红外(吸收)光谱分析800，860，870，962，1140，1165，1260，1275，1375，1477，1505，1538，1593，2680，2870，2940，3180，3405。
实施例89-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶烟酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的烟酸盐。熔点204-205℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C70.39；H6.77；N12.96实测值C70.26；H6.90；N12.78红外(吸收)光谱分析700，710，753，835，1030，1378，1460，1560，1603，1640，1685，2700，2850，2910，2930，3070，3200，3305，3370。
实施例99-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶氢溴酸盐的制备加热下，将1.01g(0.005mol)吖啶碱基溶解于小量乙醇中。向所得溶液内加入氢溴酸数滴以将pH调至2并形成沉淀。过滤收集白色颗粒状沉淀物，用乙醇和丙酮的混合物重结晶后，得到1.12g溶点为246-248℃的题目化合物，收率79％。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C55.16；H6.71；N9.78实测值C55.07；H6.78；N9.78红外(吸收)光谱分析570，705，835，985，1060，1175，1225，1430，1460，1615，1638，1648，2680，2840，2930，3060，3180，3318，3370。
实施例109-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶硫酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的硫酸盐。熔点251-252℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C51.93；H6.66；N9.32实测值C51.89；H6.50；N9.45红外(吸收)光谱分析590，836，870，990，1020，1055，1180，1225，1430，1460，1640，1670，2700，2852，2930，3070，3200，3300，3360。
实施例119-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶磷酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的磷酸盐。熔点269-271℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C51.95；H6.99；N9.32实测值C51.89；H6.92；N9.15红外(吸收)光谱分析512，955，1043，1130，1260，1460，1480，1623，1640，1675，2840，2925，3070，3190，3285，3350。
实施例129-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶过氯酸盐的制备基本上按照实施例4的方法制备9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的过氯酸盐。熔点192-194℃。
元素分析C13H18N2.HBr计算值C51.56；H6.27；N9.25
实测值C51.39；H6.05；N9.32红外(吸收)光谱分析1098，1120，1145，1432，1468，1620，1650，2705，2740，2878，2959，3115，3212，3260，3325，3370，3455。
实施例13本发明药物组合物对东莨菪碱诱发模型动物学习和记忆障碍的影响(1)跳台法将60只小鼠随机分为6组正常对照组、模型组、阳性对照组，以及小、中、大三个不同剂量的用药组(每组10只)。跳台实验前60分钟，正常对照组和模型组动物灌胃投用生理盐水(0.2ml/10g)；阳性对照组动物灌胃投用对照药物安理申(为他克林的低毒性替代产品)(10mg/kg)；各用药组分别投用0.5mg/kg、1mg/kg和2mg/kg本发明的以琥珀酸盐为基本活性成分的药物组合物。实验前15分钟，各组动物腹腔内注射东莨菪碱2mg/kg。
跳台实验装置为长方形的反射箱，用黑色板分成五个间隔。底面铺有彼此间隔0.5cm的铜栅。每间隔放置一个高和直径均约4.5cm的平台。将动物放入箱内适应3分钟后，通以36V交流电。动物受电击后的正常反应是跳到平台上以躲避伤害。多数动物可能再次回到铜栅上，并在受电击又迅速跳回平台。如此训练5分钟，记录每只动物受电击的次数和5分钟内躲跳错误的次数，以及第一次跳下平台的潜伏期，作为动物的学习成绩。24小时后重复同样实验，记录各参数以评价动物的记忆保持能力。结果如下列表1所示。
表1本发明的药物组合物对东莨菪碱诱发的大鼠学习和记忆功能障碍的缓解作用(跳台法)
与模型组比较*p＜0.05；**＜0.01；***＜0.001.
由表1所示的结果可以看出，预先投用本发明的药物组合物后，动物因腹腔内注射东莨菪碱诱发的学习和记忆功能障碍得到明显缓解和改善。而且，与已知同类药物安理申相比，本发明的药物组合物显然具有更好的预防效果。
(2)水迷宫法将60只大鼠随机分为6组正常对照组、模型组、阳性对照组，以及小、中、大三个不同剂量的用药组(每组10只)。水迷宫实验前60分钟，正常对照组和模型组动物灌胃投用生理盐水(1ml/100g)；阳性对照组动物灌胃投用对照药物安理申(为他克林的低毒性替代产品)(3.5mg/kg)；各用药组分别投用0.45mg/kg、0.8mg/kg和1.6mg/kg本发明的以琥珀酸盐为基本活性成分的药物组合物。实验前20分钟，各组的每只动物腹腔内注射东莨菪碱1mg/kg。
给药后，连续重复水迷宫实验3天，观察预先投服本发明的药物组合物对动物因注射东莨菪碱所致的学习和记忆功能障碍的影响。水迷宫实验装置包括一个1004225cm大小的茶色玻璃槽，槽内被隔出多条通道，其中只有一条通道通向左上角的安全台，其余通道均为盲端。右下角为起点。实验时，槽内充入201cm深的水(水温约26℃)。先将动物放在终点区使之适应爬上安全台的环境后，再将动物放到起点处并观察其游动路线，从起点直接游到并爬上安全台为正确，游入通道盲端为错误。
动物每次爬上安全台后休息30秒钟。每次训练耗时定为120秒。以连续4次正确爬上安全台作为学会标准。以学会水迷宫所需时间和4次游至终点所需的时间作为估价动物的学习和记忆能力的标准。结果如下列表2所示。
表2本发明的药物组合物对东莨菪碱诱发的大鼠学习和记忆功能障碍的缓解作用(水迷宫法)
与模型组比较*p＜0.05；**＜0.01；***＜0.001.
由表1所示的结果同样可以看出，预先投用本发明的药物组合物后，动物因腹腔内注射东莨菪碱诱发的学习和记忆功能障碍得到明显缓解和改善。而且，与已知同类药物安理申相比，本发明的药物组合物对学习和记忆功能障碍显然具有更好的预防效果。
实施例14本发明药物组合物对血管性痴呆模型动物学习和记忆能力的影响动物模型的制备采用常规四血管闭塞法(4-VO)制备血管性痴呆大鼠(Wistar大鼠50只)模型。分别以0.5％Ketamini hydrochloridi(0.3ml/100g)腹腔内注射麻醉后，暴露翼小孔，烧灼椎动脉并分离两侧颈动脉，穿针备用。第2天，阻断颈动脉后再灌注，缺血情况下用无损伤血管夹夹闭双侧颈总动脉3次(每次5分钟)，1小时后将动物放回笼中。假手术组(10只)不烧灼椎动脉也不结扎颈总动脉。
4-VO手术后，按体重将动物分为五组模型组(阴性对照组)、阳性对照组，以及小、中、大三个不同剂量的三个用药组(每组10只)。假手术组和模型组动物灌胃投用生理盐水，阳性对照组投用已知的同类药物阿米利金(3.0mg/kg)，各用药组分别投用小(0.75mg/kg)、中(1.5mg/kg)和大(3mg/kg)剂量本发明的以琥珀酸盐为基本活性成分的药物组合物。每天一次，连续用药6天。第7天开始水迷宫和跳台试验.
(1)水迷宫试验每天训练一次(每次共游泳10次)，连续训练5天。记录大鼠从起点游到终点区所需时间及这段时间内动物进入盲端的次数(错误次数)和正确次数。
(2)跳台试验首先将动物放在反应葙内适应3分钟，然后通以36伏电流训练5分钟，记录每只动物受电击的次数。24小时后重复试验并记录第一次跳下平台的潜伏期和试验中的错误次数。
水迷宫和跳台试验的结果分别如下列表3-5(水迷宫试验)和表6(跳台试验)所示。从表3-5所示的结果可以看出，与假手术组动物相比，模型组动物在水迷宫试验中的错误次数和学会次数增加，达到平台所需时间明显延长。特别是与模型组相比，投用本发明(基于主题化合物的琥珀酸盐)药物组合物(大和中剂量用药组)和投用对照药物阿米利金的两组动物均明显改善了学习和记忆能力。表明本发明的药物组合物与已知药物阿米利金相似，对血管性痴呆动物模型的记忆和学习能力同样具有明显的恢复和改善作用。另外，从表6所示结果可以看出，动物在跳台试验中表现出第二天首次跳下的潜伏期明显缩短等实验参数的改善。
表3本发明的药物组合物对脑血管结扎大鼠迷宫游泳路径错误次数的影响(水迷宫法)
与模型组比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001.
表4本发明的药物组合物对脑血管结扎大鼠到达终点所需时间的影响(水迷宫法)
与模型组比较*p＜0.05；**p＜0.01.
5 本发明的药物组合物对脑血管结扎大鼠学习迷宫路径所需次数的影响(水迷宫法)
与模型组比较*p＜0.05；**p＜0.01.
表6本发明的药物组合物对脑血管结扎大鼠学习和记忆能力的影响(跳台法)
与模型组比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001.
实施例15本发明的药物组合物对大鼠实验性脑缺血的保护作用(1)对脑含水量的影响Wistar大鼠50只随机分为五组正常对照组、脑缺血模型组和分别投用本发明药物组合物(基于主题化合物的琥珀酸盐)的小(0.75mg/kg)、中(1.5mg/kg)和大(3mg/kg)剂量给药组，每组10只。给药组每天灌胃一次投用不同剂量的本发明药物组合物。正常对照组和脑缺血模型组动物每天一次投用生理盐水。连续三天。末次给药后1小时结扎模型组和给药组动物的两侧颈动脉，造成急性实验性不完全脑缺血。3小时后处死动物并取脑组织称重。在110℃烤葙中烤至恒重后计算脑组织百分含水量(％)。结果可见，大、中剂量用药组动物的脑组织含水量明显低于脑缺血模型组动物。表明服用本发明的药物组合物后，动物因脑组织缺血导致的脑水肿明显减轻，即本发明的药物组合物可缓解动物因脑缺血所致的损伤。结果如下列表7所示。
表7本发明的药物组合物对实验性脑缺血大鼠脑组织含水量的影响
与脑缺血模型组比较*p＜0.05；**p＜0.01.
(2)对脑血管通透性的影响Wistar大鼠50只随机分为五组正常对照组、脑缺血模型组和分别投用本发明药物组合物(基于主题化合物的琥珀酸盐)的小(0.75mg/kg)、中(1.5mg/kg)和大(3mg/kg)剂量给药组，每组10只。给药组每天灌胃一次投用不同剂量的本发明药物组合物。正常对照组和脑缺血模型组动物每天一次投用生理盐水。末次给药后1小时麻醉动物，舌下静脉注射染料伊文思兰(50ml/kg)并于5分钟后结扎模型组和给药组动物的两侧颈动脉，造成急性实验性不完全脑缺血。3小时后处死动物并取脑组织浸于甲酰胺溶液中。在45℃温葙中保温72小时后取浸泡液进行分光光度(722-2型分光光度仪)检测，并根据标准曲线计算出脑组织内的染料含量(μg/g脑组织湿重)。结果可见，大、中剂量用药组动物脑组织中的染料含量明显低于脑缺血模型组。表明服用本发明的药物组合物后，动物脑血管通透性明显减小。结果如下列表8所示。
表8本发明的药物组合物对实验性脑缺血大鼠脑血管通透性的影响
与脑缺血模型组比较*p＜0.05；**p＜0.01.
(3)脑组织形态学观察Wistar大鼠50只随机分为五组正常对照组、脑缺血模型组和分别投用本发明药物组合物(基于主题化合物的琥珀酸盐)的小(0.75mg/kg)、中(1.5mg/kg)和大(3mg/kg)剂量给药组，每组10只。给药组每天灌胃一次投用不同剂量的本发明药物组合物。正常对照组和脑缺血模型组动物每天一次投用生理盐水。连续三天。末次给药后1小时结扎模型组和给药组动物的两侧颈动脉，造成急性实验性不完全脑缺血。3小时后处死动物取部分脑组织固定(10％甲醛溶液)并常规制备组织切片。切片经H-E染色后在光学显微镜下进行病理检查。
光学显微镜下可见，与正常对照组动物相比，脑缺血模型组动物的脑组织神经细胞胞浆和胞核浓缩、轴突和树突均呈弯曲状、毛细血管和小血管周围间隙增宽、室管膜周围神经胶质细胞明显肿胀。可见三个剂量的给药组动物脑组织神经细胞浓缩、染色较深，但神经胶质细胞肿胀和间质疏松程度明显好于脑缺血模型组。用药组动物的总体脑组织细胞结构与正常对照组动物无显著差异。
权利要求
1，具有结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶衍生物及它们的可药用酸加成盐， 其中结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的衍生物包括吖啶环1，2，3，4，5，6，7，或8位上的碳原子被选自氢、卤素、羟基、酰基、直链或分支链低级烷基、烷氧基、卤代烷基、或烷酰基，或酮基的基团取代的化合物。
2，根据权利要求1的化合物，其中结构式(1)的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶的可药用酸加成盐包括选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐的无机酸盐，以及选自甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、草酸盐、富马酸盐、己二酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐、烟酸盐、水杨酸盐、磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、棕榈酸盐和硬脂酸盐的有机酸盐。
3，根据权利要求1的化合物，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是选自硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、高氯酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、己二酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐和烟酸盐的可药用酸加成盐。
4，根据权利要求1的化合物，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是琥珀酸盐。
5，用于治疗老年性痴呆症的药物组合物，所说的药物组合物包括作为活性成分的如权利要求1中限定的吖啶衍生物或它们的可药用酸加成盐，以及一种或多种医药上可接受的载体和/或赋形剂。
6，根据权利要求5的药物组合物，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶衍生物包括1，2，3，4，5，6，7，或8位环碳原子被选自氢、卤素、羟基、酰基、直链或分支链低级烷基、烷氧基、卤代烷基、或烷酰基，或酮基的基团取代的化合物。
7，根据权利要求5的药物组合物，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是选自是选自硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、高氯酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、己二酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、对羟基苯甲酸盐和烟酸盐的可药用酸加成盐。
8，根据权利要求4的药物组合物，其中所说的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物的可药用酸加成盐是琥珀酸盐。
9，根据权利要求5的药物组合物，所说的药物组合物除含有作为基本活性成分的9-氨基-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢吖啶或其衍生物，或它们的可药用酸加成盐外，还可含有一种或多种具有相似或协同活性的其他天然的，或化学合成的或重组产生的化合物。
10，根据权利要求9的药物组合物，其中所说的具有相似或协同活性的其他成分包括具有乙酰胆碱酯酶抑制活性、中枢神经系统胆碱能传递活性、毒蝇碱受体刺激活性，以及脑血管扩张活性的成分。
11，根据权利要求5的药物组合物，其中所说的老年性痴呆包括神经退化性痴呆和血管性痴呆。
12，根据权利要求5的药物组合物，所说的药物组合物可以是经胃肠道外或非胃肠道外途径给药的。
全文摘要
本发明涉及9－氨基－1，2，3，4，5，6，7，8－八氢吖啶及其衍生物或它们的可药用酸加成盐。本发明进一步涉及含有治疗有效量的9－氨基－1，2，3，4，5，6，7，8－八氢吖啶或其可药用酸加成盐，以及一种或多种医药上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。本发明的药物组合物具有显著的胆碱酯酶抑制活性并可用于改善与胆碱能功能减低(例如老年性痴呆)有关的记忆功能障碍。与已知的吖啶类老年性痴呆治疗药物相比，本发明的药物组合物不仅进一步提高了胆碱酯酶抑制效果，而且显著地降低了有害副作用。
文档编号A61K31/435GK1523016SQ0310454
公开日2004年8月25日 申请日期2003年2月18日 优先权日2003年2月18日
发明者阿·弗·乌巴德舍娃, 睢大员, 龚毅华, 阿 弗 乌巴德舍娃 申请人:长春华洋高科技有限公司