专利名称：一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种鱼种用中草药免疫增强剂。
背景技术：
鲟鱼是一种经济鱼类，目前国外鲟渔业是世界上利润最高的产业之一。我国境内的鲟鱼主要分布于长江、黑龙江及其支流，目前共有2科4属11种。但由于人口增长，需求增加导致的捕捞过度，加上江河污染已使黑龙江的鲟鱼资源量大减少。1998年4月1日起，联合国华盛顿公约(CITIS)将全世界野生鲟鱼认定为濒临绝种的保护动物。野生的史氏鲟被列为我国二级保护动物。为了增加资源量，在保护的同时，我们国家也采用了增殖放流以及人工养殖的措施。鲟鱼生长速度快，广温、广盐，对环境的适应性强，具有很好的养殖特性。早在1957我国即成功地进行了史氏鲟的人工繁殖，并获得少量鱼苗。80年代末90 年代初，有关单位还开展了池塘养殖、饵料生物学、以及鲟鳇杂交等方面的研究。近年来史氏鲟的人工养殖发展迅速，已成为较为常见的商品鱼，随着养殖业的发展，其病害也逐渐增加，经常会发生某些疾病，包括病毒、细菌和寄生虫感染等疾病，其中有常见病，也有不明原因的暴发性疾病；尤其在鲟科鱼类的鱼种阶段，病害频繁发生，鱼种免疫力低下，出现生长状况不良等问题。但由于鲟鱼开始规模化养殖的时间短，相关的基础研究包括病害研究相对薄弱，因此疾病的诊断和治疗都较为困难，如何有效预防就成了关键。 提高机体的非特异性免疫能力，可以有效抵抗疾病入侵，减少发病和死亡率，许多中草药就具有这样的功效。研究表明，中草药具有调节机体健康、增强机体免疫力的作用，作为一种天然的药物越来越受到人们的重视。中草药的品种众多，药性多样，价格低廉，资源丰富，采用中草药作为免疫添加剂不但有助于提高机体免疫力，而且由于它属于天然物质，污染少， 所以、更符合绿色渔业的要求，有利于人们对食品安全的要求。

发明内容
本发明目的是为了解决现有鲟科鱼类鱼种阶段病害频繁发生、免疫力低下及生长状况不良的问题，而提供一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂。鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由16 Mg的甘草、12 18g的金银花、12 18g 的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑叶混合制成。本发明中甘草具有增强免疫力、保肝、抗病毒、抗菌、抗溃疡和解毒的功效，甘草及其有效成分在国内外均有研究，常单独或配方使用，预防和治疗疾病；金银花则清热解毒， 也可抗菌抗病毒，增强免疫力，并且有对抗细菌内毒素保护机体的作用；紫草具有抗菌抗病毒、消炎、保肝的作用；葛根则能调节循环系统、改善肝脏功能并清热解毒；桑叶也可清热解毒、抗菌消炎，并且提高免疫力。本发明根据实验室试验及应用推广单位的试验证明它具有如下特点(1)能有效增强鱼体的免疫力、抗氧化能力，从而提高对疾病的抵抗力，降低发病率；
(2)能显著提高鱼的增重率，生长状况良好，缩短养成时间，提高养殖产量；(3)在热应激条件下，可以调节机体对外界的抵抗力；(4)长期添加投喂后鱼体没有出现毒副作用和不良反应；(5)弥补了鲟鱼鱼种生产中缺乏此类免疫添加剂的空白；因而，鲟方具有提高鲟鱼鱼种免疫抗病能力和促进鱼类健康生长的双重效果，对减少我国鲟鱼养殖过程中爆发性疾病频繁发生的几率有一定促进作用。
具体实施例方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式
，还包括各具体实施方式
间的任意组合。
具体实施方式
一本实施方式鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由16 Mg的甘草、 12 18g的金银花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑叶混合制成。本实施方式中鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂的制备一、称取16 Mg的甘草、 12 18g的金银花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑叶，粉碎后放入砂锅中，加水浸泡30min，第一次熬45min，将药汁倒出，再加水熬30min，过滤，将两次药汁合并浓缩成ImL药液相当于Ig鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂(干物质)的浓度的水煎剂，备用。本实施方式中鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂的制备称取16 24g的甘草、12 18g的金银花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑叶，混合后进行粉碎，粉碎目数为120目 160目，备用。
具体实施方式
二 本实施方式与具体实施方式
一不同的是鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由17 23g的甘草、13 17g的金银花、13 17g的紫草、9 Ilg的葛根和9 Ilg的桑叶混合制成。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一不同的是鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由18g的甘草、14g的金银花、14g的紫草、IOg的葛根和IOg的桑叶混合制成。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一不同的是鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由20g的甘草、15g的金银花、15g的紫草、Ilg的葛根和Ilg的桑叶混合制成。其它与具体实施方式
一相同。试验在试验站水族箱中进行了口灌和混饲试验，并于口灌试验中设立了常温和高温刺激组，用以研究药物在热应激情况下(主要针对运输等特殊情况造成的高温刺激) 对鱼机体的作用效果。后又在中国水产科学研究院鲟鱼繁育工程技术中心进行了应用推广试验。1. 口灌试验鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂的制备一、称取18g的甘草、15g的金银花、15g的紫草、IOg的葛根和12g的桑叶，粉碎后放入砂锅中，加水浸泡30min，第一次熬45min，将药汁倒出，再加水熬30min，过滤，将两次药汁合并浓缩成70mL，其中ImL药液相当于Ig鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂(干物质)的水煎剂，备用。将药液按给药剂量稀释，以达到每IOOg鱼体重口灌0. 3mL的药液浓度，按 70g/50kg的剂量经口灌服鲟方药液，对照组按照体重等比例灌服蒸馏水。
选取健康非免疫状态下的1龄鲟鱼，于室内水族箱(0.90mX0. 50mX0.45m)，在 22°C下预饲2周，保持各水族箱养殖条件均一，每天按鱼体质量的2. 0%投喂全价基础饲料。2周后对试验组鱼连续口灌给药7天，分别于试验第1和第7天给药前准确称量每尾鱼空腹体质量，记录数据。第8天，将试验组和对照组半数鱼放入30°C的控温水族箱中热刺激 2h，然后与在正常水温22°C下的试验鱼一同取样，用3g/L肝素钠润洗过的注射器自试验鱼尾动(静)脉采血，4°C下3500r/min离心20min，取上清血浆及底部红细胞，中间层白细胞备用；解剖取鱼鳃、肝、幽门毛囊、胃、肠等各组织样品，立即于-80°C下保存，待测。2.混饲试验鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂的制备称取20g的甘草、15g的金银花、15g的紫草、IOg的葛根和IOg的桑叶，混合后进行粉碎，粉碎目数为140目，备用；然后以4. 5%的比例加入到基础饲料当中混勻，制成药饵。随机选取健康费免疫状态下1龄施氏鲟于室内水族箱(0. 90mX0. 50mX0. 45m)水温22°C下预饲两周，每组两个重复各15尾鱼，保持各水族箱养殖条件均一，每天按鱼体重的2. 0 %投喂全价基础饲料。预饲结束后，每天按照鱼体重2. 5 %投喂药饵，连续给药30天， 停食一天后，自实验鱼尾动(静)脉采血，并解剖取鱼肝组织样品，立即于-80°C下保存，待测。3.养殖试验鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂的制备方法与口灌试验相同。按干药量含量为 5. 6 %的比例加入到基础饲料当中混勻，制成药饵。 养殖终试采用混饲方法，取健康、非免疫状态下的鲟鱼，于室外圆形水泥池(直径 2.5m)中，循环水养殖，试验期间水温15-19°C。试验设试验组及对照组，分别投喂加药饲料及基础饲料，每组300尾，设平行，每天按照体重的2.0%投喂。试验周期为30天。结束后，每组随机选取15尾试验鱼，于尾动/静脉处采集肝素抗凝血，4°C下以3500r/min离心 20min,取血浆。解剖，取肝脏等组织的样品，将血清及组织样品立即置于-70°C下保存备用。4.攻毒试验选取健康非免疫状态下的1龄鲟鱼(60_80g之间)，于室内水族箱 (0. 90mX0. 50mX0. 45m)，在22°C下预饲2周，每箱15尾，保持各水族箱养殖条件均一，每天按鱼体质量的2. 0%投喂全价基础饲料。采用黑龙江水产研究所鉴定保存的克里斯坦森耶尔森氏菌(Yersinia kristensenii)进行攻毒试验，先选取60尾鲟鱼，按照累积法亦称 Reed-Mueuch氏法计算，半致死浓度LD50 = 3. 6*107。试验组及对照组均按口灌试验的方法灌服鲟方水煎剂和蒸馏水，每组15尾，均设平行，一周后按半致死浓度进行攻毒。相关指标测定1. 口灌试验实验测定混饲鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂(简称鲟方)的施氏鲟增长及各种生理生化，免疫相关指标如下1. 1鲟方对施氏鲟生长的影响表1-1灌服鲟方后不同时间下施氏鲟的增重情况
权利要求
1.一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂，其特征在于鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由 16 Mg的甘草、12 18g的金银花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑叶混合制成。
2.根据权利要求1所述的一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂，其特征在于鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由17 23g的甘草、13 17g的金银花、13 17g的紫草、9 Ilg的葛根和9 Ilg的桑叶混合制成。
3.根据权利要求1所述的一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂，其特征在于鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由18g的甘草、14g的金银花、14g的紫草、IOg的葛根和IOg的桑叶混合制成。
4.根据权利要求1所述的一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂，其特征在于鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由20g的甘草、15g的金银花、15g的紫草、Ilg的葛根和Ilg的桑叶混合制成。
全文摘要
一种鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂，它涉及一种鱼种用中草药免疫增强剂。它解决了现有鲟科鱼类鱼种阶段病害频繁发生、免疫力低下及生长状况不良的问题。鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂由甘草、金银花、紫草、葛根和桑叶混合制成。本发明鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂，能有效增强鱼体的免疫力、抗氧化能力，从而提高对疾病的抵抗力，降低发病率；能显著提高鱼的增重率，生长状况良好，缩短养成时间，提高养殖产量；在热应激条件下，可以调节机体对外界的抵抗力；长期添加投喂后鱼体没有出现毒副作用和不良反应；弥补了鲟鱼鱼种生产中缺乏此类免疫添加剂的空白；因而，鲟鱼鱼种用中草药免疫增强剂具有提高鲟鱼免疫抗病能力和促进鱼类健康生长的双重效果。
文档编号A61P39/06GK102552411SQ20121006861
公开日2012年7月11日 申请日期2012年3月15日 优先权日2012年3月15日
发明者刘红柏, 卢彤岩, 徐黎明, 李绍戊, 王荻 申请人:中国水产科学研究院黑龙江水产研究所