专利名称：一种具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂的制作方法
技术领域：
本发明属于药物制剂领域，涉及鼻用原位凝胶剂，具体涉及一种具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂；该鼻用原位凝胶剂是一种含环境敏感型高分子的三七总皂苷水溶液，在常态下呈液体状态，以鼻腔给药方式使用后迅速在鼻黏膜表面形成凝胶，从而延缓药物消除，提高生物利用度。
背景技术：
三七[Panax notoginseng (Burk) F. H. Chen]为五加科人参的干燥根及根茎，盛产于我国云南和广西，是我国的名贵中药，性味甘，微苦，温，入肝、胃经，具有“散瘀止血、 消肿止痛”的功效。三七总皂苷(Saponins of Panax Notoginseng, PNS)是三七的主要有效部位，在三七粉中的百分含量为8. 2%19.4%，为白色或类白色无定型粉末。人参皂苷 RbURgl是三七总皂苷中含量最高的两个活性单体，各占总皂苷约30%。随着生活水平的提高、生活方式的改变以及人口老龄化加剧，心血管疾病已成为人类健康的最大、最严重威胁，是日益严重的公共卫生问题。PNS在抑制血栓形成，扩张外周血管，降低血压，治疗心脑血管疾病疗效显著。目前，PNS在临床上的主要剂型为注射剂和口服片剂、胶囊、颗粒剂等，用于心、脑血管疾病及外科的治疗。实践显示，以PNS为原料的血塞通注射剂疗效确切，但成本高、需要专业人士完成、不能自主给药、患者顺应性差，容易导致过敏等不良反应，而且近年来中药注射剂多次发生严重不良反应事件，显示其存在严重安全隐患。现有技术中的以PNS为原料的口服制剂常用于脑路瘀阻、中风偏瘫、胸闷心痛、脑血管后遗证及冠心病、心绞痛等的治疗。但口服给药疗效并不理想，有实验显示，SD雄性大鼠灌胃给药的人参皂苷Rbl绝对生物利用度为0. 71%，人参皂苷Rgl为3.四％ ；胃液的酸性环境、大肠菌丛产生的水解酶类如β-葡萄糖苷酶等及肝脏的首过作用均对其口服吸收有影响，肠道黏膜低透过性直接影响其口服吸收，生物利用度低，导致疗效缓慢而不确切，临床应用也受到一定限制。PNS 口服外的其他非注射给药途径的剂型逐渐受到关注。相关的专利有一种含三七总皂苷的中药制剂及其制备方法[专利号CN02137^1. 8]及三七总皂苷脂质体及其制备方法[专利号 CN200310108690. 4]。现代医学研究发现，黏膜给药系统具有其独特的优势。鼻黏膜作为药物吸收部位具有许多优点(1)鼻腔总容积约15 mL，鼻黏膜上纤毛众多，吸收面积比较大，约为150 cm2 ； (2)内皮细胞间存在亲水性孔道，水溶性药物膜透过性高；C3)内皮细胞下有丰富的毛细血管和淋巴网，使体液迅速通过血管壁，便于吸收；(4)与消化道比较，鼻腔中的代谢酶较少，活性较低，环境PH值为5. 5-6. 5，接近中性，药物稳定性提高；(5)可避开胃肠道的降解和首过效应等。因此，鼻腔给药制剂具有吸收迅速完全、生物利用度高、给药方便、易于被患者接受等优点。但由于鼻粘膜表明含有大量鼻纤毛和鼻黏液，它们的运动导致药物在鼻黏膜表面滞留时间短仅为约15-30 min，药物尚未被完全吸收就被清除，使其生物利用度收到一定影响。一些生物黏附制剂如鼻用凝胶剂虽然能延长药物在鼻黏膜的滞留时间，但其黏度较高， 制备存在一定困难，而且其黏稠性一定程度上影响给药剂量的准确性，并导致使用不便。将药物制备成鼻用原位凝胶制剂可充分利用溶液与凝胶制剂上的特点，以液体形式给药，喷入或滴入鼻腔后转变为具有适宜生物黏附性的凝胶黏附于鼻黏膜上，可以延长药物在鼻腔内的滞留时间，降低纤毛对药物的清除率，减少药液流失和对咽部的刺激，因而具有生物利用度高、给药剂量准确、病人依从性良好等优点。因此，充分利用鼻腔给药的优点，并克服其缺点，进行制剂处方改良的研究，具有广阔的市场前景，对皂苷类药物的研究具有重要的学术价值，对中药现代化的发展也具有重要的参考意义。

发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂。本发明提供的凝胶剂质地均勻细腻、粘稠度合适、能较长时间滞留于鼻腔表面且无鼻纤毛毒性。本发明的鼻用原位凝胶剂含有三七总皂苷和亲水凝胶，以三七总皂苷中含量最高的两种活性单体人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl作为指标性活性成分，并加入其他药剂学上必要的辅料，如渗透压调节剂、增稠剂、PH调节剂和/或防腐剂，所选辅料用量为药剂学上所规定的常规用量。本发明的鼻用原位凝胶剂中，三七总皂苷的含量为10-500 mg/mL或10-500 mg/g ，优选含量为 50-300 mg/mL 或 50-300 mg/g。本发明的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂通过下述方法制备将三七总皂苷以微粉或分子形式均勻分散于亲水凝胶基质中，制得具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂；所述的亲水凝胶为离子敏感型的鼻用原位凝胶、温度敏感型的鼻用原位凝胶或PH敏感型的鼻用原位凝胶。本发明中，所述的亲水凝胶基质采用去乙酰结冷胶、海藻酸钠、泊洛沙姆或卡波普制成。本发明中，离子敏感型的鼻用原位凝胶，在冷藏或室温下是自由流动的液体，在鼻腔的离子环境下即可形成澄明的凝胶，其中的亲水凝胶基质由下述一种或几种材料制成去乙酰结冷胶、海藻酸钠、黄原胶、卡拉胶(carrageenan gum)和/或文莱胶(Welan gum)，其中，去乙酰结冷胶的浓度为0. l-l%(w/w)，优选0. 2-0. 75%(w/w)，海藻酸钠的浓度为0. 2-7% (w/w)，黄原胶的浓度为0. 2-6% (w/w)，卡拉胶的浓度为0. 3-8% (w/w)，文莱胶的浓度为 0. 1-10% (w/w)。本发明中，温度敏感型的鼻用原位凝胶，为在冷藏或室温下是自由流动的液体， 而在32-37°C体温时可逆的形成澄明的凝胶，其中的亲水凝胶基质由下述一种或几种材料制成泊洛沙姆407 (Pluronic F127)、泊洛沙姆188 (Pluronic F68)、N-异丙基丙烯酰胺 (NiPAAM)共聚物、聚乙二醇-PLGA共聚物(PEG/PLGA)和/或乙基羟乙基纤维素(EHEC)， 其中，泊洛沙姆407的浓度为15-40%(w/w)，泊洛沙姆188的浓度为5-30%(w/w)，NiPAAM 共聚物的浓度为20-40%(w/w)，PEG-PLGA共聚物中的浓度为15-40%(w/w)，EHEC的浓度为
50. 1-2%(w/w)。本发明中，pH敏感型的鼻用原位凝胶，为在pH值低于4时是自由流动的液体，而在鼻腔PH环境下即可形成一定稠度的凝胶，其中的亲水凝胶是pH敏感型的原位凝胶，亲水凝胶基质由下述一种或几种材料制成醋酸纤维素酞酸酯(CAP)、丙烯酸聚合物卡波普 (Carbopol)或聚乙烯缩醛二乙氨醋酸盐(AEA)，其中，CAP的浓度为10-40%(w/w)，卡波普的浓度为0. 02-2%(w/w)，AEA的浓度为l-10%(w/w)；所述的卡波普的选自卡波普934P、卡波普 940、卡波普941、卡波普971P或卡波普974P。本发明中，所述的药剂学上必要的辅料选自渗透压调节剂、增稠剂、pH调节剂和/ 或防腐剂。所述的渗透压调节剂选自甘露醇、山梨醇、枸橼酸钠和/或氯化钠中的一种或数种，其用量为5-30%(w/w)。所述的增稠剂是纤维素类衍生物，选自甲基纤维素(MC)、羧甲基纤维素钠 (CMC-Na)或羟丙基甲基纤维素(HPMC)，其中，MC的浓度为0. 5-10%(w/w), CMC-Na的浓度为 0. 5-10%(w/w)，HPMC的浓度为0. 1-10%(w/w)；由于纤维素类衍生物存在多种黏度，本发明根据需要选择所需规格制备凝胶。所述的pH调节剂选自三乙醇胺、氢氧化钠或氢氧化钾，其中，调节离子敏感型和温度敏感型鼻用原位凝胶制剂的PH至5. 0-8. 0，pH敏感型鼻用原位凝胶制剂的pH用 0. lmol/L盐酸调节至4.0。所述的防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎氯铵、苯扎溴铵或硫柳汞及季铵化合物类阳离子表面活性剂。本发明中，所述的防腐剂不影响制剂的理化性质，在抑菌浓度范围内不产生或仅产生较小的鼻黏膜刺激性和纤毛毒性。本发明制得的鼻用原位凝胶剂为一种含环境敏感型高分子的三七总皂苷水溶液， 在常态下呈液体状态，在一定生理条件下具有相转变性质，以鼻腔给药方式使用后迅速在鼻黏膜表面形成凝胶，可延长药物与鼻黏膜的接触时间，从而延缓药物消除，有利于提高药物的生物利用度，同时又可避免高黏度的凝胶剂制备及患者使用的不便。本发明所述的鼻用凝胶制剂可以喷雾或滴鼻形式通过鼻腔给药。本发明以PNS溶液为对照，进行黏度测定、体外释放实验，以及动物吸收和黏膜刺激性实验，结果表明，本发明的鼻用凝胶制剂给药方便，能在生理条件下形成具有生物黏附性的凝胶，药物释放理想，生物利用度高，对给药部位无刺激性。本发明的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂具有如下的特点 1.凝胶制剂黏度测定结果显示
离子敏感鼻用凝胶制剂的黏度随着剪切力的增加呈现下降趋势，有利于其在鼻黏膜表面均勻分布，而且在鼻纤毛的运动下药物可以较易释放；
PH敏感凝胶制剂在不同的pH值条件，以pH值4为临界值，黏度发生显著变化，存在明显的相转变过程；
温度敏感凝胶制剂在32-37°C体温范围，制剂黏度发生显著变化，存在明显的相转变过程。2.药物释放实验结果显示本发明的不同鼻用凝胶制剂与模拟鼻液反应，各凝胶制剂MOmin溶出百分比均低于药物溶液。
3.黏膜毒性实验结果显示
离子敏感型0. 5%去乙酰结冷胶与pH敏感型0. 1%卡波普940制剂给药4h后，蟾蜍上颚纤毛运动持续时间均为生理盐水对照组的8496，光学显微镜观察显示黏膜面完整，纤毛数量多，绝大多数运动活跃，偶尔可观察到静止的纤毛。4.药动学实验结果显示本发明原位凝胶能减缓药物的消除，增加药物的鼻腔吸收，本发明能增加药物的生物利用度。5、本发明充分利用溶液与凝胶制剂的特点，以液体形式给药，喷入或滴入鼻腔后转变为具有适宜生物黏附性的凝胶黏附于鼻黏膜上，可延长药物在鼻腔内的滞留时间，降低纤毛对药物的清除率，减少药液流失和对咽部的刺激，具有生物利用度高、给药剂量准确、病人依从性良好等优点。


图1是0. 5%去乙酰结冷胶原位凝胶、0.洲卡波普940原位凝胶与溶液制剂的人参皂苷Rgl体外释放曲线图，其中《 = 3。图2是三七总皂苷静脉注射、溶液制剂、0. 5%去乙酰结冷胶原位凝胶制剂与0. 1% 卡波普940原位凝胶制剂的家兔药动学实验人参皂苷Rgl血药浓度-时间曲线图，其中= 4。图3是三七总皂苷静脉注射、溶液制剂、0. 5%去乙酰结冷胶原位凝胶制剂与0. 1% 卡波普940原位凝胶制剂的家兔药动学实验人参皂苷Rbl血药浓度-时间曲线图，其中= 4。
具体实施例方式通过下列描述和实施例进行说明，但本发明的保护范围，不局限于此。实施例1
分别按表2所示的配比制备离子敏感型三七总皂苷鼻用原位凝胶剂。表2离子敏感型三七总皂苷鼻用原位凝胶剂的处方(w/w%)
权利要求
1.一种具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，由三七总皂苷、 亲水凝胶以及药剂学上必要的辅料制成，其中以三七总皂苷中的活性单体人参皂苷Rbl和人参皂苷Rgl作为指标性活性成分，所述的三七总皂苷的含量为10-500 mg/mL或10-500 mg/g ；所述的亲水凝胶选自离子敏感型、温度敏感型或pH敏感型亲水凝胶。
2.根据权利要求1所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的三七总皂苷的含量为50-300 mg/mL或50-300 mg/g。
3.根据权利要求1所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的药剂学上必要的辅料选自渗透压调节剂、增稠剂、PH调节剂和/或防腐剂。
4.根据权利要求1所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的离子敏感型亲水凝胶选自去乙酰结冷胶、海藻酸钠、黄原胶、卡拉胶和/或文莱胶中的一种或数种，其中，去乙酰结冷胶的浓度为0. 1-1% w/w，海藻酸钠的浓度为0. 2-7% w/w，黄原胶的浓度为0. 2-6% w/w，卡拉胶的浓度为0. 3-8% w/w，文莱胶的浓度为0. 1-10% w/wo
5.根据权利要求4所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的去乙酰结冷胶的浓度为0. 2-0. 75% w/w。
6.根据权利要求1所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的温度敏感型亲水凝胶选自泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、N-异丙基丙烯酰胺共聚物聚乙二醇-PLGA共聚物和/或乙基羟乙基纤维素(EHEC)中的一种或数种；其中，泊洛沙姆407的浓度为15-40% w/w，泊洛沙姆188的浓度为5-30% w/w, N-异丙基丙烯酰胺共聚物的浓度为20-40% w/w，聚乙二醇-PLGA共聚物中的浓度为15-40% w/w, EHEC的浓度为 0.1-2% w/w。
7.根据权利要求1所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的PH敏感型亲水凝胶选自醋酸纤维素酞酸酯、丙烯酸聚合物卡波普或聚乙烯缩醛二乙氨醋酸盐；其中，醋酸纤维素酞酸酯的浓度为10-40% w/w，丙烯酸聚合物卡波普的浓度为0. 02-2% w/w，聚乙烯缩醛二乙氨醋酸盐的浓度为1-10% w/w。
8.根据权利要求3所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的渗透压调节剂选自甘露醇、山梨醇、枸橼酸钠和/或氯化钠中的一种或数种，其用量为5-30% w/w。
9.根据权利要求3所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的增稠剂选自甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙基甲基纤维素；其中，甲基纤维素的浓度为0.5-10% w/w，羧甲基纤维素钠的浓度为0.5-10% w/w，羟丙基甲基纤维素的浓度为 0. 1-10% w/w。
10.根据权利要求3所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的PH调节剂选自三乙醇胺、氢氧化钠或氢氧化钾。
11.根据权利要求1所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的离子敏感型或温度敏感型鼻用原位凝胶制剂的PH调节至5. 0-8. 0 ；pH敏感型鼻用原位凝胶制剂的PH用0. lmol/L盐酸调节至4. 0。
12.根据权利要求3所述的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂，其特征在于，所述的防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎氯铵、苯扎溴铵或硫柳汞及季铵化合物类阳离子表面活性剂。
13.权利要求1的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂的制备方法，其特征在于，通过下述步骤制备将三七总皂苷以微粉或分子形式均勻分散于亲水凝胶基质中，制得具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂；所述的亲水凝胶为离子敏感型的鼻用原位凝胶、温度敏感型的鼻用原位凝胶或PH敏感型的鼻用原位凝胶。
14.权利要求1的具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂在制备鼻腔喷雾或滴鼻给药制剂中的用途。
全文摘要
本发明属于药物制剂领域，涉及一种具有相转变性质的三七总皂苷鼻用原位凝胶剂。本发明由三七总皂苷、离子敏感型、温度敏感型或pH敏感型亲水凝胶以及其他药剂学上必要的辅料制成。本发明以液体形式给药，喷入或滴入鼻腔后转变为具有适宜生物黏附性的凝胶黏附于鼻黏膜上，可延长药物在鼻腔内的滞留时间，降低纤毛对药物的清除率，减少药液流失和对咽部的刺激，具有生物利用度高、给药剂量准确、病人依从性良好等优点；本发明具有广阔的市场前景，对皂苷类药物的研究具有重要的学术价值，对中药现代化的发展也具有重要的参考意义。
文档编号A61K36/258GK102462713SQ201010537639
公开日2012年5月23日 申请日期2010年11月9日 优先权日2010年11月9日
发明者方晓玲, 沙先谊, 罗洁琦 申请人:复旦大学