专利名称：灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物、保健食品或化妆品中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域。具体涉及一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物、保健食品或化妆品中的应用。
背景技术：
肿瘤是严重威胁人类生命健康的疾病，国家卫生部统计资料表明目前中国恶性肿瘤患者达到115-1. 27%。，由于恶性肿瘤而死亡人数居全部死因的第二位。近半个世纪以来， 恶性肿瘤的治疗虽然取得很大进展，但目前还缺乏理想的治疗药物，无法满足临床需要，恶性肿瘤仍被人们视为难治疾病。寻找安全有效的抗肿瘤药物，仍然是各国医药界关注的热点和难点。肿瘤的生长、转移依靠新生血管提供营养和转移通道。抑制肿瘤血管生成，与阻断肿瘤的发生、发展、浸润和转移密切相关。近年来，人们对肿瘤血管生成机制的研究不断深入，许多抗肿瘤血管生成的药物已在临床上推广应用。这类药物不但可以用于大多数实体肿瘤的治疗，还可以用于肿瘤的预防和血液系统恶性肿瘤的治疗，同时对其他与血管生成有关的疾病如糖尿病视网膜病变、风湿性关节炎、银屑病、血管瘤、动脉粥样硬化等的预防与治疗，都具有一定的理论和现实意义。灯心草(Juncuseffusus L.)为灯心草科(Juncaceae)灯心草属(Juncus L.)植物灯心草(Juncus effusus L.)的干燥茎髓或全草，别名灯心草、灯草，又名虎须草、灯心、 碧玉草、水灯心、铁灯心等。主产于江苏、四川、云南、贵州等地。性微寒，味甘、淡，归心、肺、 小肠经，功能清心火，利小便，可治疗心烦少眠、高热口渴、尿少涩痛、小儿疳积、口舌生疮等症。目前研究表明，灯心草中的菲类成分具有细胞毒、抗菌、抗氧化、抗微生物及抗藻活性。经现有技术调研，灯心草(Juncus effuses L.)提取物，尤其是灯心草醇提物、石油醚部位及乙酸乙酯部位，对肿瘤和肿瘤血管生成的影响及在制备抗肿瘤或抑制肿瘤血管生成药物、保健食品或化妆品中的应用在国内外文献中未见报道。

发明内容
本发明的目的在于提供一种灯心草(Juncus effuses L.)提取物在制备抗肿瘤或抗肿瘤血管生成药物、保健食品或化妆品中的应用。为了解决现有技术中的这些问题，本发明提供的技术方案是本发明提供了一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用。优选的，该提取物通过以下制备方法得到取灯心草生药，加入其重量的3-50倍量溶剂，采用冷浸、超声、渗漉或加温方法提取1-5次，合并提取液，除去溶剂，得到灯心草提取物；所述溶剂选自水、含水低级醇、低级醇、乙酸乙酯、石油醚的一种或混合溶剂。优选的，制备抗肿瘤或抗肿瘤血管生成药物的剂型选自注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服剂，膏剂或乳剂。
优选的，所述的肿瘤包括淋巴瘤、肿瘤干细胞引起的肿瘤、淋巴细胞白血病、T淋巴细胞瘤、乳腺癌、白血病、骨肉瘤、黑色素瘤、脑胶质瘤、肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、SW803细胞癌的化学治疗或肿瘤的辅助治疗。优选的，所述药物用于预防或治疗原发或继发产生的血管瘤、血管纤维瘤、新生血管性青光眼、糖尿病视网膜病变、早熟视网膜病及视网膜静脉闭塞、视网膜变性、晶体后纤维组织增生、颗粒性结膜炎、血管生成引起的角膜疾病、更年期黄斑和黄斑变性、牛皮癣、老年盘状斑变性及风湿性关节炎、银屑病、毛细管扩张、脓性肉芽肿、伤口愈合中抑制斑痕形成、动脉粥样硬化、脂溢性皮炎和痤疮。本发明还提供了一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成的保健食品中的应用。本发明还提供了一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成的化妆品中的应用。本发明的技术方案是一种灯心草(Jimcus effuses L.)提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物、保健食品或化妆品中的应用。本发明涉及的灯心草(Jimcus effuses L.)提取物，该提取物可以通过单一溶剂或混合溶剂提取，溶剂包括水、乙醇水、乙醇、甲醇、正丁醇、石油醚、乙酸乙酯，所选提取溶剂包括并不限于以上种类(例如95%乙醇)。提取方法可采用冷浸、超声、渗漉或加温方法 (例如回流提取)，可单次提取，也可多次提取后，合并提取液，将提取液蒸发挥去得到。优选的，所述的抗肿瘤或抗肿瘤血管生成药物含有药学上有效剂量的灯心草 (Juncus effuses L.)提取物及药学上可接受的载体。优选的，所述抗肿瘤或抗肿瘤血管生成药物的剂型选自注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服剂，膏剂或乳剂。优选的，所述的药物用于预防或治疗淋巴瘤、肿瘤干细胞、T淋巴细胞白血病、T淋巴细胞瘤、乳腺癌、白血病、骨肉瘤、黑色素瘤、脑胶质瘤、肺癌、胃癌、结肠癌细胞均有明显的抑制作用。优选的，所述药物用于肿瘤的化学治疗或肿瘤的辅助治疗。优选的，所述药物用于预防或治疗原发或继发产生的血管瘤、血管纤维瘤、新生血管性青光眼、糖尿病视网膜病变、早熟视网膜病及视网膜静脉闭塞、视网膜变性、晶体后纤维组织增生、颗粒性结膜炎、血管生成引起的角膜疾病、更年期黄斑和黄斑变性、牛皮癣、老年盘状斑变性及风湿性关节炎、银屑病、毛细管扩张、脓性肉芽肿、伤口愈合中抑制斑痕形成、动脉粥样硬化、脂溢性皮炎和痤疮。本发明的另一目的在于提供一种灯心草(Jimcus effuses L.)提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成的保健食品中的应用以及一种灯心草(Jimcus effuses L.)提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成的化妆品中的应用。所述灯心草(Jimcus effuses L.)提取物在制备抑制肿瘤及肿瘤血管生成药物中的应用，是该抑制肿瘤及肿瘤血管生成药物含有有效剂量的灯心草(Juncus effuses L.) 提取物及常规药用载体和或赋形剂。所述提取物被制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊齐U、口服剂、膏剂、霜剂或乳剂。所述提取物是用于防治和或治疗至少一种以上选自下述之一的疾病癌症和或癌症转移，血管瘤，血管纤维瘤，新生血管性青光眼，糖尿病视网膜病变，早熟视网膜病及视网膜静脉闭塞，视网膜变性，晶体后纤维组织增生，颗粒性结膜炎，血管生成引起的角膜疾病，更年期黄斑和黄斑变性，牛皮癣，老年盘状斑变性及风湿性关节炎，银屑病，毛细管扩张，脓性肉芽肿，伤口愈合中抑制斑痕形成，动脉粥样硬化，脂溢性皮炎和痤疫。由于该提取物有抗肿瘤、肿瘤血管生成及其他与血管生成有关疾病治疗、预防的用途。该提取物可用于肿瘤化疗和/或辅助治疗的用途。本发明中灯心草(Juncus effuses L.)提取物可用常规方法制备。在实际需要的时候，在灯心草(Juncus effuses L.)提取物中可以加入一种或多种药学上可接受的载体。 所述载体包括药学领域常规的稀释剂，赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进齐U、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、乳化剂、渗透压调节剂，必要时还可以加入香味剂、甜味剂等。本发明中灯心草(Juncus effuses L.)提取物可以按常规的制剂工艺，单独使用或与其他药物配合制备成在临床上可以使用的各种不同剂型的药物，例如注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服剂、膏剂、霜剂或乳剂等多种形式。本发明中灯心草(Juncus effuses L.)提取物可以应用于抗肿瘤、肿瘤血管生成及其他与血管生成有关疾病治疗、预防，还可以用于肿瘤化疗和/或辅助化疗。更具体地， 本发明提供了一种用于药物、食品、化妆品的抑制肿瘤、血管生成的提取物。相对于现有技术中的方案，本发明的优点是本发明首次发现灯心草(Juncus effuses L.)提取物具有抑制肿瘤及肿瘤血管生成的活性，可用于治疗或预防与肿瘤及肿瘤血管生成相关的疾病，还可用于肿瘤化疗和/ 或辅助化疗方面的治疗。本发明巧妙地以血管生成作为治疗疾病的靶点，研究并阐明灯心草(Juncus effuses L.)提取物的药用疗效和机制，为其新用途开发和发现药物作用新的靶点提供科学依据和重要信息，是中医药理论新的发展方向。这种灯心草(Juncus effuses L.)提取物可用于药物、保健品或化妆品等用途。


下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述图1为本发明实施例灯心草醇提物对多种不同肿瘤细胞增殖的影响结果；图2为本发明实施例灯心草醇提物对多种不同肿瘤细胞增殖的影响结果；图3为本发明实施例灯心草醇提物对肿瘤细胞类型管生成的作用图4为本发明实施例灯心草水提物对肿瘤细胞类型管生成的作用图5为本发明实施例灯心草乙酸乙酯部位对肿瘤细胞类型管生成的作用图6为本发明实施例灯心草石油醚部位对肿瘤细胞类型管生成的作用图7为本发明实施例灯心草醇提物对荷瘤小鼠体重的影响8为本发明实施例灯心草醇提物对荷瘤小鼠肿瘤重量的影响图9为本发明实施例灯心草醇提物对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响其中Control为空白对照组；Fu为阳性对照组五氟尿嘧啶(5-FU) ；lug/mL、IOug/ mL、100ug/mL、250ug/mL、500ug/mL为五种不同浓度的灯心草(Juncus effuses L.)提取物。
具体实施例方式以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体厂家的条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。实施例1 灯心草醇提物及水提物制备干燥的灯心草材料，压碎，5 10倍量的95%乙醇或水冷浸提取两次，每次Mh，合并提取液，过滤，减压浓缩得稠浸膏，置烘箱中65°C烘干，即得。实施例2 灯心草石油醚及乙酸乙酯部位制备干燥的灯心草材料，压碎，5 10倍量的95% 乙醇冷浸提取两次，每次Mh，合并提取液，过滤，减压浓缩得稠浸膏，加水混悬，依次用石油醚(60 90°C )，乙酸乙酯萃取。分别回收石油醚层、乙酸乙酯层萃取液即得石油醚提取物、 乙酸乙酯提取物。得率分别约为1%、5%。实施例3 灯心草醇提物抑制肿瘤细胞增殖的体外实验实验材料1肿瘤细胞株人Burkitt，s 淋巴瘤细胞 Namalva 及 Raji、前肿瘤干细胞 2C4G2、PMK0102-3# 和 P3B11、人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat、人T淋巴细胞系H9、人乳腺癌细胞系MCF-7、人白血病细胞株UC-CUC、NB4和HL-60、人骨肉瘤细胞系U-20S和SW1353、人黑色素瘤细胞系 C8161、人肺癌细胞(淋巴结转移)NCI-ffi92、人胃癌细胞株HGC-27、人肝癌细胞株H印G2和人结肠癌细胞株SW480为本所实验室冻存。细胞培养基RPMI 1640和DMEM(高糖)为Hyclone公司产品。Alamarblue试剂为 INVITR0GEN公司产品。2受试药物灯心草醇提物(按实施例1方法制备)用二甲基亚砜(DMSO)助溶，用RPMI 1640 或DMEM(高糖)培养基稀释成所需浓度。实验方法1.细胞培养细胞用含体积分数10%小牛血清及双抗(抗青霉素和抗链霉素)的RPMI1640或DMEM (高糖)培养液常规培养。每48-7 用0.25%胰酶消化，1 2 1 4扩瓶传代。(1)贴壁细胞用0. 25%胰酶消化贴壁细胞，离心后计数，以合适的浓度接种于96孔板，37°C、 5% C02培养箱中培养Mh，分别加入不同浓度的灯心草醇提物，另外以单纯的培养液和未经药物作用的细胞作为空白对照和阴性对照，每组设3个复孔，培养4 后，加入 AlamarBlue试剂IOul/孔，继续培养池，用微孔检测仪进行测定荧光下0D560/0D590，按以
下公式计算平均抑制率。
权利要求
1.一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用， 其特征在于该提取物通过以下制备方法得到取灯心草生药，加入其重量的3-50倍量溶剂，采用冷浸、超声、渗漉或加温方法提取1-5次，合并提取液，除去溶剂，得到灯心草提取物；所述溶剂选自水、含水低级醇、低级醇、乙酸乙酯、石油醚的一种或混合溶剂。
3.根据权利要求1所述的灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用， 其特征在于制备抗肿瘤或抗肿瘤血管生成药物的剂型选自注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服剂，膏剂或乳剂。
4.根据权利要求3所述的灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用， 其中所述的肿瘤包括淋巴瘤、肿瘤干细胞引起的肿瘤、淋巴细胞白血病、T淋巴细胞瘤、乳腺癌、白血病、骨肉瘤、黑色素瘤、脑胶质瘤、肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、SW803细胞癌的化学治疗或肿瘤的辅助治疗。
5.根据权利要求1所述的灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用， 其特征在于所述药物用于预防或治疗原发或继发产生的血管瘤、血管纤维瘤、新生血管性青光眼、糖尿病视网膜病变、早熟视网膜病及视网膜静脉闭塞、视网膜变性、晶体后纤维组织增生、颗粒性结膜炎、血管生成引起的角膜疾病、更年期黄斑和黄斑变性、牛皮癣、老年盘状斑变性及风湿性关节炎、银屑病、毛细管扩张、脓性肉芽肿、伤口愈合中抑制斑痕形成、动脉粥样硬化、脂溢性皮炎和痤疮。
6.一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成的保健食品中的应用。
7.—种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成的化妆品中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种灯心草提取物在制备抗肿瘤或抑制血管生成药物中的应用。该发明首次揭示灯心草(Juncus effuses L.)提取物具有抑制肿瘤及肿瘤血管生成的活性，可用于治疗或预防与肿瘤及肿瘤血管生成相关的疾病，还可用于肿瘤化疗和/或辅助化疗方面的治疗。本发明巧妙地以血管生成作为治疗疾病的靶点，研究并阐明灯心草提取物的药用疗效和机制，为其新用途开发和发现药物作用新的靶点提供科学依据和重要信息。这种灯心草提取物可用于药物、保健品和/或化妆品等用途。
文档编号A61P17/06GK102188557SQ201110111208
公开日2011年9月21日 申请日期2011年4月29日 优先权日2011年4月29日
发明者周泉生, 曹志飞, 朱峰妍, 蒋小岗, 郭次仪, 顾振纶 申请人:周泉生, 苏州中药研究所