专利名称：淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药提取物，具体涉及淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用。
背景技术：
近年来随着生活水平的提高，心肌缺血严重危害中老年人的健康，冠状动脉粥样硬化呈现年轻化的趋势，一些年轻人也出现心肌缺血的表现。心血管疾病，又称为循环系统疾病，循环系统指人体内运送血液的器官和组织，主要包括心脏和血管，可细分为急性和慢性，一般都与动脉硬化有关。
心肌缺血是指心脏的血液灌注减少，导致心脏的供氧量减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。冠状动脉粥样硬化导致的冠脉狭窄是引起心肌缺血最主要、最常见的病因，进而导致心肌缺血缺氧，因此冠心病是心肌缺血的主要原因。心肌缺血主要分为隐匿性冠心病、心绞痛型、心肌梗死型、缺血性心肌病和猝死性5类。心肌缺血常见的原因是冠状动脉硬化，其次还有炎症(风湿性、梅毒性、川崎病和血管闭塞性脉管炎等)、痉挛、栓塞、结缔组织疾病、创伤和先天性畸形等多种。流行病学研究发现，与动脉粥样硬化相关的重要危险因子为高脂血症、高血压病、糖尿病、吸烟、肥胖、同型半胱氨酸增高、体力活动少、高龄和男性等。缺血心肌的损伤机制包括能量缺乏、钙超载、自由基生成增多、酸中毒引起的心肌损害、细胞膜通透性增加等方面。黄酮类化合物广泛存在自然界的植物和果实中，现代药理研究表明，黄酮类化合物具有多种生物活性，包括心血管系统活性，抗菌及抗病毒活性，抗肿瘤活性，抗氧化自由基活性，抗炎、镇痛活性，保肝活性、降压、降血脂、抗衰老、提高机体免疫力、泻下、镇咳、祛痰、解痉及抗变态等药理活性。淡竹叶为禾本科植物淡竹叶的干燥茎叶，淡竹叶总黄酮提取物是南京中医药大学开发的一种植物类黄酮制剂，其发明专利“一种淡竹叶精制总黄酮的制备方法CN101797344A公开了一种淡竹叶总黄酮的制备精制方法。但迄今为止，尚无淡竹叶总黄酮对心肌缺血疾病的生理和药理活性的研究报道。因此为了充分利用资源，满足市场需求，很有必要研究开发一种具有很好防治心肌缺血疾病的药物。

发明内容
发明目的本发明的目的是为了解决现有技术的不足，经过大量实验筛选，提供淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用。技术方案为了实现以上目的，本发明采用如下技术方案淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，所述的淡竹叶总黄酮由下列方法制备得到
(I)取新鲜淡竹叶、洗净、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加热回流I 3次，过滤、合并提取液，浓缩，得淡竹叶的水提液备用；(2)取步骤(I)得到的淡竹叶水提液加入乙醇使淡竹叶水提液中乙醇的浓度达到65% 75%，静置、沉淀，滤出溶液，浓缩，得淡竹叶水提液的醇沉液待用；(3)取步骤(2)得到的淡竹叶醇沉液上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为50% 55%的乙醇洗脱，薄层色谱检识、收集50% 55%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到淡竹叶总黄酮。作为优选方案，以上所述的淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，所述的淡竹叶总黄酮包括荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、木犀草苷和苜蓿素。本发明提供的淡竹叶总黄酮中黄酮含量高，具有荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、木犀草苷和苜蓿素等黄酮，含量高达50至90%。实验结果表明具有很好的抗心肌缺血的作用。淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、^ -受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹参注射液的组合物在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，所述的淡竹叶总黄酮由下列方法制备得到(I)取新鲜淡竹叶、洗净、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加热回流I 3次，过滤、合并提取液，浓缩，得淡竹叶的水提液备用；(2)取步骤(I)得到的淡竹叶水提液加入乙醇使淡竹叶水提液中乙醇的浓度达到65% 75%，静置、沉淀，滤出溶液，浓缩，得淡竹叶水提液的醇沉液待用；(3)取步骤(2)得到的淡竹叶醇沉液上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为50% 55%的乙醇洗脱，薄层色谱检识、收集50% 55%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到淡竹叶总黄酮。作为优选方案，以上所述的淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、P -受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹参注射液的组合物在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，所述的淡竹叶总黄酮包括荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、木犀草苷和苜蓿素。淡竹叶总黄酮具有很好的抗血栓、抗血小板聚集等功效，本发明在淡竹叶总黄酮的基础之上，通过大量实验筛选组合，实验结果表明，淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、^ -受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹参注射液组合之后，具有更好的抗心血管疾病的作用。作为优选方案，以上所述的抗血小板聚集药物可为阿司匹林、P -受体阻断剂可为普萘洛尔、钙离子拮抗剂可为维拉帕米等、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物可为硝酸地平等。作为优选方案，本发明提供的淡竹叶总黄酮或淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、￠-受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹参注射液的组合物在防治冠心病、隐匿性冠心病、心绞痛、心肌梗死、或缺血性心肌病等心血管疾病中的应用。本发明提供的淡竹叶总黄酮可与药学上可接受的载体制成汤剂、口服液、冲剂、糖浆剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、滴丸剂、膏剂等剂型的药物。在制成片剂时把淡竹叶总黄酮和载体乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，然后压片制成片剂。在制成胶囊剂时把淡竹叶总黄酮和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。在制成颗粒剂时，把淡竹叶总黄酮和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。有益效果本发明与现有技术相比具有以下优点(I)本发明提供的淡竹叶总黄酮经过优选工艺制备得到，含黄酮种类多，纯度高，
实验结果表明淡竹叶总黄酮安全无毒无副作用，对二甲苯所致耳肿胀模型有明显的抑制作用；可抑制血小板聚集，延长血栓形成时间；对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注损伤有较好的保护作用。(2)本发明以优选工艺制备得到的淡竹叶总黄酮为基础，通过大量实验筛选，淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、P -受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断齐U、硝酸脂类药物、溶栓药物或血管紧张素转换酶抑制剂组合后显示出了很好的抗血小板聚集，延长血栓形成时间，并对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注损伤有更好的保护作用，起到了较好的协同增效功效，从而临床可以减少药物用量，降低不良反应，更加科学化用药，具有更好的应用前景。
具体实施例方式根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。实施例I一种淡竹叶总黄酮，它是通过以下方法制备得到(I)取新鲜淡竹叶、洗净、干燥后放入提取罐中，加10倍量的水，加热回流3次，过滤、合并提取液，浓缩，得淡竹叶的水提液备用；(2)取步骤⑴得到的淡竹叶水提液加入乙醇使淡竹叶水提液中乙醇的浓度达到65% 75%，静置、沉淀，滤出溶液，浓缩，得淡竹叶水提液的醇沉液待用；(3)取步骤(2)得到的淡竹叶醇沉液上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为50% 55%的乙醇洗脱，薄层色谱检识、收集50% 55%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到淡竹叶总黄酮。经高效液相和质谱连用技术检测表明，淡竹叶总黄酮中含有荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、木犀草苷和苜蓿素。实施例2急性毒性实验及最大给药量测定实施例I制备得到的淡竹叶总黄酮灌胃给药的最大给药量试验结果表明20只小鼠给药后均无毒性反应，主要组织器官均无明显的改变，7天内无死亡。淡竹叶总黄酮灌胃给药的小鼠最大给药量为14. 14g Ag'该剂量相当于药效学最大给药剂量的176. 8倍。表明本发明提供的淡竹叶总黄酮从天然淡竹叶中分离得到，毒性低，安全性好。实施例3抗炎实验
取雌性小鼠50只，体重(20±3)g，由南京中医药大学动物实验中心提供。随机分成空白对照组、二甲苯组、实施例I制备得到的淡竹叶总黄酮高、中、低共5组，每组10只。给药组动物连续灌胃给药7天，空白对照组给予等容积的生理盐水。末次给药Ih后,在每只小鼠的右耳前后两面各涂25ii I的二甲苯，2h以后,将动物处死,用8mm直径打孔器分别在双耳的同一部位打下圆耳片，分析天平称重。每鼠的右耳片重量减去左耳片重即为肿胀度。与空白对照组和二甲苯模型组比较，具体实验结果如表I所示。表I淡竹叶总黄酮对二甲苯所致小鼠耳肿胀度的影响(x±s, n=10)
权利要求
1.淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，所述的淡竹叶总黄酮由下列方法制备得到 (1)取新鲜淡竹叶、洗浄、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加热回流I 3次，过滤、合并提取液，浓缩，得淡竹叶的水提液备用； (2)取步骤(I)得到的淡竹叶水提液加入こ醇使淡竹叶水提液中こ醇的浓度达到65% 75%，静置、沉淀，滤出溶液，浓缩，得淡竹叶水提液的醇沉液待用； (3)取步骤(2)得到的淡竹叶醇沉液上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%こ醇洗脱，再用浓度为50% 55%的こ醇洗脱，薄层色谱检识、收集50% 55%こ醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到淡竹叶总黄酮。
2.根据权利要求I所述的淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，其特征在于，所述的淡竹叶总黄酮包括荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、木犀草苷和苜蓿素。
3.淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、β_受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹參注射液的组合物在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，所述的淡竹叶总黄酮由下列方法制备得到 (1)取新鲜淡竹叶、洗浄、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加热回流I 3次，过滤、合并提取液，浓缩，得淡竹叶的水提液备用； (2)取步骤(I)得到的淡竹叶水提液加入こ醇使淡竹叶水提液中こ醇的浓度达到65% 75%，静置、沉淀，滤出溶液，浓缩，得淡竹叶水提液的醇沉液待用； (3)取步骤(2)得到的淡竹叶醇沉液上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%こ醇洗脱，再用浓度为50% 55%的こ醇洗脱，薄层色谱检识、收集50% 55%こ醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到淡竹叶总黄酮。
4.根据权利要求3所述的淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、β-受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹參注射液的组合物在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，其特征在于，所述的淡竹叶总黄酮包括荭草苷、异荭草苷、日当药黄素、当药黄素、牡荆苷、异牡荆苷、木犀草苷和苜蓿素。
5.根据权利要求3所述的淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、β-受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物或血管紧张素转换酶抑制剂或丹參注射液的组合物在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，其特征在于，所述的抗血小板聚集药物为阿司匹林、硝酸脂类药物为硝酸地平。
6.根据权利要求I所述的淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，其特征在于，所述的心肌缺血疾病为冠心病、隐匿性冠心病、心绞痛、心肌梗死、或缺血性心肌病。
7.根据权利要求3或4所述的淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、β-受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物、血管紧张素转换酶抑制剂或丹參注射液的组合物在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，其特征在于，所述的心肌缺血疾病为冠心病、隐匿性冠心病、心绞痛、心肌梗死、或缺血性心肌病。
全文摘要
本发明公开了淡竹叶总黄酮在制备防治心肌缺血疾病的药物及功能性食品中的应用，实验结果表明淡竹叶总黄酮安全无毒无副作用，对二甲苯所致耳肿胀模型有明显的抑制作用；可抑制血小板聚集，延长血栓形成时间；对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注损伤有较好的保护作用。并且本发明通过大量实验筛选结果表明，淡竹叶总黄酮与抗血小板聚集药物、β-受体阻断剂、钙离子拮抗剂、他汀类药物、RAS系统阻断剂、硝酸脂类药物、溶栓药物或血管紧张素转换酶抑制剂组合后显示出了更好的抗血小板聚集，延长血栓形成时间，并对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注损伤有更好的保护作用，起到了较好的协同增效功效。
文档编号A61K36/899GK102698116SQ20121022604
公开日2012年10月3日 申请日期2012年7月3日 优先权日2012年7月3日
发明者乐巍, 吴启南, 周婧, 王新胜, 邵莹, 陈广云 申请人:南京中医药大学