专利名称：关白附中总二萜生物碱的制备方法
技术领域：
本发明属于医药领域，具体涉及一种关白附中总二萜生物碱的制备方法。
背景技术：
二萜生物碱是一类结构比较复杂的多环含氮化合物，具有较强的毒性和广泛生物活性，多年以来一直是药物学家寻找新药和先导化合物的一个重要来源，也是植物化学分类学家研究的热点。二萜生物碱绝大部分分布于乌头属和翠雀属中，在我国，乌头 属植物大约有170余种，关白附近120种，它们广泛分布在全国各地，尤以西南地区最为集中，其中许多早已是我国民间常用的中草药。二萜生物碱不仅是这类植物的有效成分和毒性成分，而且也被认为是它们的特征化学成分。关白附为毛茛科乌头属植物黄花乌头iAconi-tum coreanum ( Levi) Rapaics)的块根，味辛，甘，热，有毒，归肝，胃经。关白附为常用中药，具有祛风、燥湿、化痰、止痛等功效，主治中风痰壅，口眼歪斜，癫痫，偏正头痛，风痰眩晕，破伤风，小儿惊风，风湿痹痛，疮疡疥癣，皮肤湿痒等症。现代药理研究表明，关白附具有抗心律失常，抗炎镇痛，对血液系统的一系列作用。其主要活性成分为二萜生物碱。

发明内容
本发明的目的是提供一种关白附中总二萜生物碱的制备方法。本发明是通过以下方式实施的
(1)提取将关白附粉碎成粗粉，置于碱液中浸泡2-5小时，过滤，除去碱液，滤渣用4-10倍量乙醇热回流提取，得到醇提液；
(2)富集将醇提液减压回收试剂，得到总碱浸膏，加水分散，过预处理好的大孔树脂柱，先用稀碱水洗，再用去离子水洗脱至中性，弃去洗脱液，最后用65-85%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；
(3)脱色将洗脱液通过D941大孔树脂柱，收集流出液，再用5-10倍柱体积85-95%乙醇洗脱，将洗脱液和流出液合并，减压浓缩、干燥得到总二萜生物碱。所述步骤(I)中碱液为O. 1-5%氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氨水或氢氧化钙溶液，浸泡温度为40-80°C。所述步骤(2)中选用大孔树脂为AB-8、D101、HPD100或D130型大孔树脂。所述步骤(2)中稀碱水为PH8-10的碱液，碱液可选氨水、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾。本发明的优势在于制备过程中以水、碱液、乙醇为溶剂，成本低、提取工艺简单，生产周期短，适用于产业化大量制备关白附中总二萜生物碱。
具体实施例方式实施例I :取关白附药材1kg，粉碎成粗粉，加入5%氨水溶液，在40°C条件下保温浸泡5小时，过滤，除去碱液，再用10倍量乙醇热回流提取，收集提取液减压回收试剂，得到总碱浸膏，力口水分散，过预处理好的AB-8型大孔树脂柱，先用pH8的氨水洗，再用去离子水洗脱至中性，弃去洗脱液，最后用5倍柱体积85%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，直接进D941脱色树脂柱，收集流出液，再用5倍柱体积95%乙醇洗脱，合并洗脱液和流出液，减压浓缩、干燥得到总二萜生物碱。实施例2:
取关白附药材10kg，粉碎成粗粉，加入O. 1%氢氧化钠溶液溶液，在80°C条件下保温浸泡2小时，过滤，除去碱液，再用4倍量乙醇热回流提取，收集提取液减压回收试剂，得到总碱浸膏，加水分散，过预处理好的DlOl型大孔树脂柱，先用pHIO的碳酸钠洗，再用去离子水洗脱至中性，弃去洗脱液，最后用7倍柱体积65%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，直接进D941脱色树脂柱，收集流出液，再用10倍柱体积85%乙醇洗脱，合并洗脱液和流出液，减压浓缩、干燥得到总二萜生物碱。实施例3:
取关白附药材15kg，粉碎成粗粉，加入3%氢氧化钙溶液，在50°C条件下保温浸泡3小时，过滤，除去碱液，再用8倍量乙醇热回流提取，收集提取液减压回收试剂，得到总碱浸膏，加水分散，过预处理好的HPD100型大孔树脂柱，先用pH9的碳酸氢钾洗，再用去离子水洗脱至中性，弃去洗脱液，最后用8倍柱体积80%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，直接进D941脱色树脂柱，收集流出液，再用8倍柱体积90%乙醇洗脱，合并洗脱液和流出液，减压浓缩、 干燥得到总二萜生物碱。
权利要求
1.1、关白附中总二萜生物碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)提取将关白附粉碎成粗粉，置于碱液中浸泡2-5小时，过滤，除去碱液，滤渣用4-10倍量乙醇热回流提取，得到醇提液； (2)富集将醇提液减压回收试剂，得到总碱浸膏，加水分散，过预处理好的大孔树脂柱，先用稀碱水洗，再用去离子水洗脱至中性，弃去洗脱液，最后用65-85%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液； (3)脱色将洗脱液通过D941大孔树脂柱，收集流出液，再用5-10倍柱体积85-95%乙醇洗脱，将洗脱液和流出液合并，减压浓缩、干燥得到总二萜生物碱。
2.2、如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述步骤(I)中碱液为0. 1-5%氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氨水或氢氧化钙溶液，浸泡温度为40-80°C。
3.3、如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中选用大孔树脂为AB-8、DlOl、HPD100 或 D130 型大孔树脂。
4.4、如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中稀碱水为PH8-10的碱液，碱液可选氨水、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或碳酸氢钾。
全文摘要
本发明公开了一种关白附中总二萜生物碱的制备方法。方法是将关白附药材置于碱水中浸泡，然后用乙醇提取，通过大孔树脂柱，先用碱水洗脱后，再用乙醇溶液洗脱，洗脱液过D942脱色树脂柱脱色，浓缩，干燥得到总二萜生物碱。整个提取分离过程除碱液和乙醇外，没有使用其他有毒有机溶剂，大孔树脂可重复使用，工业化生产安全，成本低，制备的关白附中总二萜生物碱纯度高。
文档编号A61P7/00GK102626450SQ20121012489
公开日2012年8月8日 申请日期2012年4月26日 优先权日2012年4月26日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司