专利名称：5h－吡咯并[2,1－c][1,4]－苯并二氮杂的3－甲酰胺衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的三环非肽血管加压素拮抗剂，它们可以用于治疗需要降低血管加压素作用的疾病，例如充血性心力衰竭、过量肾水再吸收疾病和血管阻力增加以及冠状血管收缩增加的疾病。
本发明的背景血管加压素是由垂体后叶相应于脑渗透压感受器检测的血浆渗透性的增加或低压容量感受器以及动脉压力感受器感觉的血容量和血压的降低而释放的。该激素通过两种明确定义的受体亚型，即血管V1a受体和肾上皮V2受体而起作用。血管加压素诱导的抗利尿作用(由肾上皮V2受体介导)有助于维持正常的血浆渗透性、血容量和血压。
血管加压素与部分充血性心力衰竭有关，在该病中外周阻力增加。V1a受体拮抗剂可以降低系统性血管阻力、增加心输出量并预防血管加压素诱导的冠状血管收缩。因此，对于血管加压素诱导的总外周阻力增加和局部血流改变的疾病，V1a受体拮抗剂可以作为有效的治疗药物。V1a受体拮抗剂可以降低血压、诱导低血压作用，因此可以有效治疗部分类型的高血压。
阻断V2受体可以用于治疗以自由水的过量肾再吸收为特征的疾病。抗利尿作用是由下丘脑释放的血管加压素(抗利尿激素)调节的，该激素可以与肾集合小管细胞上的特异受体结合。此种结合可以刺激腺甘酸环化酶，并促进cAMP-介导的水渗透入这些细胞的腔表面。V2拮抗剂可以校正充血性心力衰竭、肝硬变、肾病综合征、中枢神经系统损伤、肺病和低钠血症中的流体潴流。
血管加压素水平升高发生于充血性心力衰竭的病人中，在具有慢性心力衰竭的老年病人中更普遍。在低钠血的充血性心力衰竭和血管加压素水平升高的病人中，V2拮抗剂通过拮抗抗利尿激素的作用可以有助于促进自由水的排泄。基于该激素的生化和药理作用，预期血管加压素拮抗剂可以有效治疗和/或预防高血压、心机能不全、冠状血管痉挛、心肌缺血、肾血管痉挛、肝硬变、不适当的抗利尿激素分泌综合征(SIADH)、充血性心力衰竭、肾病综合征、脑水肿、脑缺血、脑出血性休克、血栓形成-出血和异常水潴流。
下列先有技术文献描述肽血管加压素拮抗剂M.Manning等的J.Med.Chem.,35,382(1992)；M.Manning等的J.Med.Chem.,35,3895(1992)；H.Gavras和B.Lammek的美国专利5,070,187(1991)；M.Manning和W.H.Sawyer的美国专利5,055,448(1991)；F.E.Ali的美国专利4,766,108(1988)；R.R.Ruffolo等的Drug News and Perspective,4(4),217,(5月)(1991)。P.D.Williams等报道有效的六肽催产素拮抗剂[J.Med.Chem.,35,3905(1992)]，该激素与V1和V2受体结合也显示微弱的血管加压素拮抗剂活性。肽血管加压素拮抗性不具有口服活性和选择性。某些显示部分激动剂活性。
最近已经公开了非肽血管加压素拮抗剂，见Y.Yamamura等的Science,252,579(1991)；Y.Yamamura等的Br.J.Pharmacol,105,787(1992)；J.D.Albright等的美国专利5,536,718A，美国专利5,532,235A，美国专利5,516,774A，美国专利5,512,563A，美国专利5,459,131A；A.Venkatessan等的美国专利5,521,173A；Ogawa等(Otsuka Pharm Co.,LTD)EP0514667-A1、EPO382185-A2、WO9105549和U.S.5,258,510、WO9404525；Yamanouchi Pharm.Co.,Ltd.,WO9420473、WO9412476、WO9414796；Fujisawa Co.Ltd.,EP620216-Al；Ogawa等(Otsuka Pharm.Co.)。EP470514A公开喹诺酮衍生物以及含有它们的药用组合物。已公开了非肽催产素和血管加压素拮抗剂，见Merck and Co.；M.G.Bock和P.D.Williams,EP0533242A；M.G.Bock等的EP 0533244A；J.M.Erb,D.F.Verber,P.D.Williams的EP0533240A；K.Gilbert等的EP0533243A。美国专利5,436,333(Venkatesan等)提出制备三环杂环类化合物的方法，该类化合物可以用作生产心血管药物的中间体。
本发明涉及新的三环衍生物，这些衍生物体外对V2受体显示血管加压素拮抗剂活性，体内显示血管加压素拮抗剂活性。此外，与以前所述的3-酰基吡咯并苯并二氮杂衍生物相比，这些化合物水溶性增加。
本发明的简述本发明涉及选自通式Ⅰ的新化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式
式Ⅰ其中R选自-OH、-NR1R3、-NHOR1、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2独立为氢或低级烷基；R3为
或
X为CH2、NR1、O、S；n为1-4；p为1-4；q为2-4；R4和R5独立选自氢、低级烷基、卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基或低级烷氧基；R6为下式的部分
Ar选自
或
R7和R8独立选自氢、卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基、羟基或三氟甲基；R9为下式的部分
或
R10选自C3-C7环烷基、环戊烯基、环己烯基或下式部分
Ar’选自
或
R11和R12独立选自氢、F、Cl、Br、氰基、低级烷基、低级烷氧基、三氟甲基、苯氧基或如下式的取代的苯氧基
其中R14选自氢、卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基、羟基或三氟甲基；Ar”选自a)苯基；b)具有一个或两个选自N、O、S的杂原子的5元芳(不饱和)杂环；c)具有三个或四个氮原子的5元芳(不饱和)杂环；或d)具有一个、两个或三个氮原子的6元芳(不饱和)杂环；且A”可任选被卤素、低级烷基、羟基、低级烷氧基或三氟甲基取代。
在本说明书中，低级烷基指C1-C6、优选C1-C4的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正丁基、叔丁基，低级烷氧基指C1-C6、优选C1-C4的直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丁氧基或叔丁氧基。卤素为氟、氯、溴或碘。环烷基指C3-C7单环环烷基部分。
还可以理解上述对R3的定义包括下列结构部分
可以理解本发明的为具有一个或两个选自N、O、S杂原子的5元芳(不饱和)杂环的Ar”取代基包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、异噻唑基、异噁唑基和咪唑基。具有三个或四个氮原子的含有5元芳(不饱和)杂环的Ar”基团包括三唑基和四唑基部分。具有一个、两个或三个氮原子的含有6元芳(不饱和)杂环的Ar”基团包括(但不限于)吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、1,2,3-三嗪基、1,2,4-三嗪基和1,3,5-三嗪基。
本发明更优选的化合物为具有下列式Ⅰ的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式
式Ⅰ其中R选自-OH、-NR1R3、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2独立为氢或低级烷基；R3为
X为CH2、NR1、O、S；n为1-4；q为2-4；R4和R5独立选自氢、低级烷基、卤素、氨基、羟基、氰基、三氟甲基或低级烷氧基；R6为下式的部分
Ar选自
或
R7和R8独立选自氢或卤素；R9为下式的部分
或
R10为Ar”式的部分
Ar’选自
或
R11和R12独立选自氢、F、Br、Cl或低级烷基；Ar”选自苯基或具有一个或两个选自N、O、S的杂原子的5元芳(不饱和)杂环。
本发明更优选的化合物为具有下式的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式
其中R选自-OH、-NR1R3或
R9为
或
R10为2-Ar”-环戊烯基；且R1、R2、R3、R6、R7、R9、R10、R11、R12、X、n、p、q、Ar、Ar’和Ar”与上述大类的定义系统，更优选与亚类的定义相同。
本发明的详述本发明包括上述的化合物以及含有这些化合物和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂等的药用组合物。本发明也包括治疗哺乳动物、优选人类的疾病的方法，在所述疾病中需要降低血管加压素的作用，该方法包括给予需要的哺乳动物治疗有效量的一种或多种本发明的化合物。
本发明的化合物可以以药学上或生理上可接受的酸或碱衍生的盐的形式使用。这些盐包括(但不限于)根据具体情况，与无机酸例如盐酸、硫酸、硝酸、磷酸形成的盐，与有机酸如乙酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸和马来酸形成的盐。其它的盐包括碱金属盐或碱土金属盐，例如钠盐、钾盐、钙盐或镁盐或与有机碱形成的盐。这些化合物也可以以酯、氨基甲酸酯以及其它的常规前体药物的形式使用，当以此类形式给药时，在体内可以转化为活性部分。当将这些化合物用于上述用途时，可以将它们与一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体，例如溶剂、稀释剂等混合，可以例如以片剂、胶囊剂、分散粉剂、颗粒剂或含有如约0.05-5％悬浮剂的悬浮液、含有如约10-50％糖的糖浆剂和含有如约20-50％乙醇的酏剂等形式经口给药，或者以无菌注射液或在等渗介质中含有约0.05-5％悬浮剂的悬浮液形式经胃肠外给药。此类药用制剂可以含有如约25-约90％的活性组分以及载体，更常见为约5％-60％(重量)。
使用的活性组分的有效剂量可以根据使用的特定化合物、给药方式、治疗的疾病的严重程度而改变。但是，一般而言，当以约0.5-约500mg/kg哺乳动物体重、优选在一天中分两次至四次的日剂量或以缓释形式给予本发明的化合物时即可获得令人满意的结果。对于大部分大的哺乳动物而言，总日剂量为约1-100mg、优选约2-80mg。适合内服的剂型包含约0.5-500mg与固体或液体药学上可接受的载体紧密混合的活性化合物。可以调整该剂量方案以得到最佳治疗反应。例如，可以每日给予数个分剂量，或者可以根据治疗的紧迫性按比例降低剂量。
这些活性化合物可以经口给予，也可以经静脉、肌内或皮下途径给予。固体载体包括淀粉、乳糖、磷酸二钙、微晶纤维素、蔗糖和高岭土，而液体载体包括无菌水、聚乙二醇、非离子表面活性剂和食用油例如玉米油、花生油和芝麻油，只要它们与活性组分的性质和所需的给药形式相符即可。制备药用组合物中通常使用的辅助剂最好包括如矫味剂、着色剂、防腐剂和抗氧剂如维生素E、抗坏血酸、BHT和BHA。
从易于制备和给药的观点来看，优选的药用组合物为固体组合物，特别是片剂和硬填充的或液体填充的胶囊剂。优选化合物口服给药。
这些活性化合物也可以胃肠外给药或腹膜内给药。可以制备这些活性化合物的以游离碱或药理上可接受的盐在适当与表面活性剂如羟丙基纤维素混合的水中的溶液或悬浮液。也可以制备在甘油、液体聚乙二醇以及它们在油中的混合物中的分散液。在通常的储存和使用条件下，这些制剂含有防腐剂以防止微生物的生长。
适合注射使用的药用形式包括无菌水溶液或分散液以及临时制备无菌注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有这些情况下，该剂型必须是无菌的，并且必须为流体以存在易注射性。在生产和储存条件下，该剂型必须稳定，并且必须可以不受微生物例如细菌和真菌的污染作用。所述载体可以为溶剂或分散介质，包括如水、醇(如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、它们的适当的混合物和植物油。
如上所述，本发明的新的三环非肽血管加压素拮抗剂可以用于治疗需要降低血管加压素作用的疾病，例如充血性心力衰竭，过量肾水再吸收疾病和血管阻力增加以及冠状血管收缩增加的疾病。
具体地讲，本发明的血管加压素拮抗剂可以有效治疗和/或预防高血压、心机能不全、冠状血管痉挛、心肌缺血、肾血管痉挛、肝硬变、不适当的抗利尿激素分泌综合征(SIADH)、充血性心力衰竭、肾病综合征、脑水肿、脑缺血、脑出血性休克、血栓形成-出血和异常水潴流。
本发明也提供制备上述定义的通式Ⅰ化合物的方法。更具体地讲，本发明提供制备式Ⅰ化合物的方法，该方法包括下列步骤之一a)使下式的化合物
(A)或
(B)其中R4、R5和R6与上述定义相同，hal为卤素，例如氯，与式HNZ1Z2的胺反应，其中-NZ1Z2可以为-NR1R3、NHOR1、-NH-(CH2)n-COOH、
或
其中n、X、R1、R2和R3与上述定义相同，得到相应的式Ⅰ化合物，其中R与上述定义相同；或b)用碱水溶液处理下式的化合物
(A)其中R4、R5和R6与上述定义相同，hal为卤素，如氯，得到相应的式Ⅰ化合物，其中R为OH；或c)用下式的酸
或其活性衍生物，如酰卤或酸酐，使下式的化合物酰化
其中R、R4和R5与上述定义相同，但是R不为OH；R14为
或
其中R7和R8与上述定义相同，得到相应的式Ⅰ化合物，其中R9与上述定义相同。
在本发明的化合物中，3-酰化的吡咯并苯并二氮杂衍生物7(流程Ⅰ)可以由相同的3-三卤代甲基酮衍生物(如4)用两种方法制备。该中间体和其前体的合成已有描述(EP636625A2)。使3-三卤代甲基酮衍生物4直接与伯胺或仲胺反应得到所需产物7。或者，用碱水溶液例如氢氧化钠水溶液处理3-三卤代甲基酮衍生物4，在酸化后得到相应的羧酸5。通过转化为酰氯、酰溴或酸酐，或者首先与活化试剂例如N,N-二环己基碳二亚胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺键”形成中使用的相关的活化试剂反应使该羧酸活化以进行偶合。根据与分子中其它取代基团的配伍性选择活化这些酸的方法。一个实例为用草酰氯/二甲基甲酰胺处理酸5得到酰氯6，当用伯胺或仲胺处理时，得到所需产物7，其中-NZ1Z2可以为-NR1R3、NHOR1、-N-(CH2)n-COOH、
或
R1和R2独立为氢或低级烷基；R3为
或
X为CH2、NR1、O、S；n为1-4；p为1-4；q为2-4；流程Ⅰ
用适当的三卤代乙酰卤试剂使吡咯并苯并二氮杂的3-位酰化得到3-三卤代甲基酮衍生物4。3-位未取代的化合物3为完全组合的目标化合物，其中R17选自式Ⅰ或者中间体的R6，其中R17为
或
当R17为
时，可以根据流程Ⅱ所述方法制备该化合物，然后进行流程Ⅰ的适当步骤。
可以根据流程Ⅱ所示制备通式4a和4b的化合物。使三环衍生物1与取代或未取代的4-硝基芳基碳酰氯或6-硝基吡啶-3-碳酰氯反应得到中间体8a或8b。使中间体8a和8b的硝基还原得到相应的氨基衍生物9a和9b。8a和8b的硝基还原可以在催化还原(即氢/Pd/C，肼-乙醇/Pd/C)条件下，或者在化学还原(即氯化亚锡/乙醇，锌/乙酸-三氯化钛)条件下或本领域已知的相关还原条件下进行。根据保持分子中其它官能团的配伍性选择将硝基转化为氨基的条件。
通过转化为酰氯、酰溴或酸酐，或者首先与活化试剂例如N,N-二环己基碳二亚胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺键”形成中使用的相关的活化试剂反应使下式的吡啶和芳基羧酸试剂被活化以进行偶合
。根据与分子中其它取代基的配伍性选择活化这些酸以进行三环衍生物9a和9b偶合的方法。选择的方法是将羧酸转化为相应的酰氯。根据本领域已知的标准方法，例如与亚硫酰氯、草酰氯等反应可以制备所述酰氯
。所述偶合反应在卤化了的溶剂例如氯仿、二氯甲烷，醚溶剂如二氧六环、四氢呋喃或烃类溶剂如甲苯中，在吡啶或叔胺碱如三乙胺等存在下进行。另外，由羧酸制备的酰氯可以在有或无4-(二甲基氨基)吡啶存在的吡啶中与衍生物9a和9b反应得到化合物10a和10b。
式9a和9b化合物与芳酰氯、芳基乙酰氯或环烯基碳酰氯或相应的活化羧酸在卤化了的溶剂例如氯仿、二氯甲烷，醚溶剂如二氧六环、四氢呋喃或烃类溶剂如甲苯中，在叔胺碱例如三乙胺、二异丙基乙胺或吡啶等的存在下反应得到衍生物10a和10b。在惰性溶剂例如氯仿、二氯甲烷或醚溶剂例如四氢呋喃中、于0℃至溶剂的回流温度下，衍生物10a和10b与三卤代甲基酰氯反应得到三卤代甲基酮衍生物4a和4b。
流程Ⅱ
如流程Ⅱb所示可以用另外的步骤顺序制备目标化合物。中间体12a和12b(其中-NZ1Z2可以为-NR1R3、NHOR1、-N-(CH2)n-COOH，R7和R8独立选自氢、卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基、羟基或三氟甲基)中的硝基还原得到相应的氨基衍生物13a和13b。12a和12b中的硝基还原可以在催化还原(即氢/Pd/C，肼-乙醇/Pd/C)条件下，或者在化学还原(即氯化亚锡/乙醇，锌/乙酸-三氯化钛)条件下或本领域已知的相关还原条件下进行。根据保持分子中其它官能团的配伍性选择将硝基转化为氨基的条件。用适当取代和活化的吡啶和芳基羧酸使氨基衍生物13a和13b酰化得到目标化合物14a和14b。
通过转化为酰氯、酰溴或酸酐，或者首先与活化试剂例如N,N-二环己基碳二亚胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺键”形成中使用的相关的活化试剂反应使下式的吡啶和芳基羧酸试剂活化以进行偶合
。根据与分子中其它取代基的配伍性选择活化这些酸以进行三环衍生物13a和13b偶合的方法。选择的方法是将羧酸转化为相应的酰氯。根据本领域已知的标准方法，例如与亚硫酰氯、草酰氯等反应可以制备所述酰氯
。所述偶合反应在溶剂如卤代烃、甲苯、二甲苯、四氢呋喃或二氧六环中，在吡啶或叔胺碱如三乙胺等存在下进行。另外，由羧酸制备的酰氯可以在有或无4-(二甲基氨基)吡啶存在的吡啶中与衍生物13a和13b反应得到化合物14a和14b。
流程Ⅱb
另外，可以将中间体1(流程Ⅲ)转化为更具活性的氟化物衍生物15。15与取代的胺NHR1(R1=低级烷基)反应得到相应的氨基烟碱基(nicotinyl)衍生物16。这些衍生物16的酰化得到目标分子17。可以用三卤代甲基乙酰氯处理该化合物得到流程Ⅱ的式4b的相应产物。流程Ⅲ
合成如式Ⅰ所示的本发明化合物，其中R6如下所示
其中Ar为
or
的另外的方法为使通式18的吡啶基或芳基羧酸与三环衍生物1偶合得到目标化合物20，然后与三卤代甲基乙酰氯反应时得到流程Ⅰ的中间体4。
通过转化为酰氯、酰溴或酸酐，或者首先与活化试剂例如N,N-二环己基碳二亚胺、氰基膦酸二乙酯以及在“肽酰胺键”形成中使用的相关的活化试剂反应使所述的吡啶和芳基羧酸活化以进行偶合。根据与分子中其它取代基的配伍性选择活化这些酸18以进行三环衍生物1(流程Ⅳ)偶合的方法。选择的方法是将羧酸18转化为相应的酰氯19。根据本领域已知的标准方法，例如与亚硫酰氯、草酰氯等反应可以制备酰氯19。偶合反应在卤化了的溶剂例如氯仿、二氯甲烷，醚溶剂例如二氧六环、四氢呋喃或烃溶剂如甲苯中，在吡啶或叔胺碱如三乙胺等存在下进行(流程Ⅳ)。另外，由羧酸制备的酰氯19可以在有或无4-(二甲基氨基)吡啶存在的吡啶中与衍生物1反应。
一般而言，当酸18用“肽型”活化试剂活化时，比用酰氯所需的温度高。流程Ⅳ
如流程Ⅴ所示的方法可以制备下式酸(由23、26、29部分代表)
流程Ⅴ
n=1,2n=1,2n=1,22927 28用零价钯或镍催化剂、在存在或不存在配位配体如三苯膦和有机或无机碱下，使芳基(或杂芳基)硼烷、硼酸酯、镁、三烷基锡或锌试剂与芳基21或吡啶基24化合物偶合，其中Q选自溴、碘、氟代磺酸酯或三氟甲基磺酸酯，R11为氢、氟、氯或溴。然后用试剂例如高锰酸钾氧化产生的甲基双芳基(杂芳基芳基)22或芳基吡啶基(杂芳基吡啶基)25化合物得到相应的羧酸23和26。在零价钯催化剂存在下，用相应的低级烷基硼烷处理23和26的甲酯可以制备23和26的衍生物，其中R11为低级烷基。
若为环烷基，则化合物29可以由适当的酮酯27开始制备。酮酯27与如三卤(溴、碘)化磷或三氟甲磺酸酐反应得到相应的β-卤代或β-三氟甲基磺酸酯化合物28。在零价钯或镍催化剂和有机或无机碱存在下，使化合物28与芳基(杂芳基)硼烷、硼酸酯、镁、三烷基锡或锌试剂反应得到为酯的目标化合物29。用碱金属氢氧化物在醇水溶液或醚溶剂中水解29的酯部分得到羧酸29。
另外，可以根据流程Ⅵ所示对通式Ⅰ的化合物进行加工，其中J选自B(OH)2、Sn(低级烷基)3,R16选自Br、I、OSO2CF3,Ar”如上述定义选择。
流程Ⅵ
分别在Stille或Suzuki条件下，用零价钯催化剂，在存在或不存在配位配体和碱下，使中间体30与芳基锡或硼试剂偶合得到通式31的化合物。
参照下列非限定性实施例可以进一步理解本发明。
实施例1
10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸步骤a)N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺于室温、氮气下，将N-{3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(4.73g,10mmol)的二氯甲烷(300ml)悬浮液与三氯代乙酰氯(1.81g,10mmol)一起搅拌6小时。加入第二份量的三氯代乙酰氯(1.81g,10mmol)，于室温下搅拌该反应物过夜。用二氯甲烷(500ml)稀释后，通过硅胶塞柱(2x)过滤该反应混合物，滤液真空蒸发成残留物。将该残留物再溶于二氯甲烷(300ml)中，用0.5N氢氧化钠和水洗涤，干燥(硫酸镁)。通过硅胶塞柱(2x)过滤，真空蒸发滤液，得到6.2g(10mmol)3-三氟甲基酮，为褐色无定形粉末，将其不经进一步纯化用于实施例1步骤b中。
步骤b)10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸于室温、氮气下，将N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(1.22g,2mmol)在丙酮(5ml)中与2.5N氢氧化钠(1.6ml,4mmol)一起搅拌45分钟。用2N盐酸(2ml,4mmol)将该反应混合物中和至pH7.0。加入水(10ml)后，过滤沉淀，顺序用冷水、乙醇和乙醚洗涤，空气干燥后得到粗品产物，为无色粉末(750mg,72％)。使粗品产物从甲醇-水(3:1,10ml)中重结晶，于25℃真空干燥3小时后得到为均一无色结晶固体的目标化合物600mg(1.2mmol),m.p.218℃(分解)。MS(+FAB),m/z:520/518(M+H)。C28H21ClFN3O4.0.62H2O分析计算值C,63.55；H,4.24；N,7.94。
实测值C,63.53；H,4.21；N,7.82。
实施例210-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸，钾盐(1∶1)用1N氢氧化钾(1ml,1mmol)处理实施例1步骤b产物10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(517mg,1mmol)的甲醇(10ml)中的悬浮液并过滤。真空蒸发溶剂后，将残留物再溶于丙酮(50ml)中，再过滤(2x)，浓缩至小体积(20ml)。加入乙醚并冷却，过滤固体并于70℃真空干燥3小时后得到270mg(0.49mmol)该酸的钾盐，为微带色的无定形粉末，m.p.195-205℃。MS(+FAB),m/z:520/518(M+H)。C28H20ClFKN3O4.3.2H2O分析计算值C,60.48；H,3.63；N,7.56。
实测值C,59.22；H,4.03；N,7.30。
实施例3N-{3-氯代-4-[3-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺于60℃、氮气下，将N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(1.86g,3mmol)与过量的N,N-二甲基肼(5ml)一起搅拌3小时。高真空下去除过量的N,N-二甲基肼。将残留物溶于乙酸乙酯中，通过短硅胶塞柱过滤，真空蒸发滤液，得到1.63g(2.9mmol,97％)粗品产物。经硅胶(150g)快速柱层析纯化，用乙酸乙酯洗脱，于25℃真空干燥过夜后得到1.15g(2.1mmol)目标化合物，为淡黄色无定形粉末，保留0.33mol乙酸乙酯，m.p.133-135℃。MS(-ESI),m/z:560/558(M-H)-。C30H27ClFN5O3.0.33C4H8O2分析计算值C,63.85；H,5.07；N,11.88。
实测值C,63.17；H,5.10；N,11.77。
实施例42-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲酰基)氨基]苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-基]羰基]-1,1,1-三甲基碘化用过量的碘代甲烷(5g,35mmol)在二氯甲烷(100ml)中处理实施例3的产物N-{3-氯代-4-[3-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺(700mg,1.25mmol)，并于室温、氮气下搅拌60小时。过滤沉淀，顺序用冷的二氯甲烷和乙醚洗涤，于25℃、真空干燥过夜后得到700mg(1.0mmol)目标化合物，为无色无定形粉末，m.p.(188)193℃。MS(-ESI),m/z:828(MI+I)-MS(+FAB),m/z:574(M+H)+C31H30ClFIN5O3.H2O.0.6CH2Cl2分析计算值C,49.23；H,4.34；N,9.08；I,16.47。
实测值C,48.83；H,4.00；N,9.11；I,17.02。
实施例52-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲酰基)氨基]苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-基]羟基亚甲基]-1,1,1-三甲基内盐用0.1N氢氧化钠(5.7ml,0.57mmol)在甲醇-水(10ml∶10滴)混合液中处理实施例4的产物2-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲酰基)氨基]苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-基]羰基]-1,1,1-三甲基碘化(400mg,0.57mmol)。真空浓缩后，再加入水。过滤沉淀，顺序用水、冷甲醇和乙醚洗涤，于25℃、真空干燥5小时后得到160mg(0.28mmol)目标化合物，为无色无定形粉末，m.p.255℃。MS(+ESI),m/z:576/574(M+H)+C31H29ClFN5O3分析计算值C,64.86；H,5.09；N,12.20。
实测值C,63.44；H,5.09；N,12.15。
实施例6N-[5-[3-三氯代甲基羰基]-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基]羰基]-2-氯代苯基]-2-苯基-苯甲酰胺于氮气下，向搅拌的2-苯基-N-[4-(5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基-羰基]-2-氯代苯基]-苯甲酰胺(5.00g,9.7mmol)的二氯甲烷(55ml)溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(3.39ml,19.4mmol)，接着用5分钟滴加三氯乙酰氯(3.25ml,29.1mmol)。于室温下将该反应混合物搅拌过夜。用水将该反应混合物洗涤三次。用二氯甲烷回洗合并的水萃取物，干燥有机萃取物，去除溶剂得到粗品产物(8.05g)。从乙酸乙酯-己烷中结晶得到纯品产物(5.12g)。重结晶后得到分析样品m.p.168-170℃。MS(+ESI),m/z:663 M+。C34H27N3O5分析计算值C,61.56；H,3.49；N,6.33。
实测值C,61.28；H,3.22；N,6.32。
实施例710-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸向N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并-[2,1-c]-[1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基]羰基-2-氯代苯基]-2-苯基苯甲酰胺(2.24g,3.4mmol)的丙酮(22ml)溶液中加入氢氧化钠水溶液(2.48ml,2.5N,6.2mmol)，于室温下将该反应物搅拌1.25小时。用盐酸(3.47ml,2N)酸化该反应物，真空去除溶剂。使残留物分配于乙酸乙酯-水之间，干燥并去除溶剂，得到粗品产物(2.41g)。用乙醚-己烷研磨得到固体(1.9g)。使样品从氯仿-甲醇-乙醚中结晶m.p.216-218℃。MS(+FAB),m/z:562/564(M+H)+。C34H27N3O5分析计算值C,70.52；H,4.30；N,7.48。
实测值C,69.25；H,4.39；N,7.14。
实施例810-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼向N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并-[2,1-c]-[1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基]羰基-2-氯代苯基]-2-苯基苯甲酰胺(0.941g,1.5mmol)的二氯甲烷(2ml)悬浮液中加入1,1-二甲基肼(1.1ml,15mmol)，将该反应物搅拌24小时。该固体溶于溶液中，然后变为悬浮液。蒸发溶剂，真空去除过量的肼。残留物经硅胶柱甲醇-乙酸乙酯(1∶20)中层析纯化，用相同的溶剂洗脱，得到0.8g化合物。从甲醇-乙醚中结晶两次得到0.454g纯品，m.p.173-176℃。MS(+FAB),m/z:604(M+H)+。C34H27N3O5分析计算值C,69.59；H,5.01；N,11.59。
实测值C,69.40；H,5.01；N,11.60。
实施例910-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺方法A于氮气下，将所述羧酸(实施例7)(4g,7.12mmol)的二氯甲烷(27ml)和二甲基甲酰胺(0.66ml,8.54mmol)悬浮液冷却至约0-5℃。逐渐加入在二氯甲烷(3ml)中的草酰氯(0.75ml,8.54mmol)。于室温下，将该混合物搅拌1.5小时。于氮气下，用约15分钟向N-甲基哌嗪(3.2ml,28.5mmol)的含有二异丙基乙胺(7.45ml,42.72mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入新制备的酰氯溶液。于室温下，将该反应物搅拌1.5小时。用二氯甲烷(20ml)稀释该混合物，用水、5％碳酸氢钠和25％盐水洗涤该混合物。用二氯甲烷回洗水溶液萃取物，干燥合并的有机溶液，真空去除溶剂，得到粗品产物(5.8g)。残留物经硅胶(140g)柱在甲醇-乙酸乙酯(1∶20)中层析纯化。用甲醇-乙酸乙酯(1∶10)洗脱产物，得到为灰白色泡沫状物的纯品化合物。将样品(0.97g,1.51mmol)溶于甲醇-乙醚(1∶1,6ml)混合液中，加入甲醇制氯化氢(1N,2ml,1.96mM)。搅拌45分钟后，真空去除所有溶剂。用含数毫升甲醇的乙醚将残留物研磨过夜。过滤产生的无定形固体，得到粗品盐酸盐(0.876g)。从乙醇-乙醚中再沉淀得到其盐(0.516g)。MS(EI)m/z:604(M+H)+。C38H34ClN5O3.HCl.1.5H2O分析计算值C,64.44；H,5.22；N,9.89。
实测值C,64.15；H,5.39；N,9.61。
方法B向实施例7产物(2.0g,3.56mmol)的二氯甲烷(150ml)悬浮液中顺序加入N-甲基哌嗪(0.414ml,3.74mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.716g,3.74mmol)和4-二甲基氨基吡啶(催化量)。于室温下，将该反应物搅拌36小时，用二氯甲烷稀释，用水、氢氧化钠(1N)、盐水洗涤，干燥(硫酸镁)。经快速层析(硅胶，洗脱溶剂为氯仿-甲醇50∶1，然后为20∶1)纯化，得到白色泡沫状物(1.55g)。
实施例1010-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺用与实施例9方法A所述相同的方法，制备实施例10的化合物，但是用N,N,N’-三甲基乙二胺代替N-甲基哌嗪。得到为灰白色无定形固体的目标化合物。m.p.100-120℃,MS(+FAB),m/z:646(M+H)+。
实施例11联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-哌啶基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺用与实施例9方法A所述相同的方法，制备实施例11的化合物，但是用4-哌啶基-哌啶代替N-甲基哌嗪。得到为灰白色无定形固体的目标化合物。m.p.209-219℃,MS(+FAB),m/z:712/714(M+H)+。
实施例12联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-二甲基氨基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺用与实施例9方法A所述相同的方法，制备实施例12的化合物，但是用4-二甲基氨基-哌啶代替N-甲基哌嗪。得到为棕色无定形固体的目标化合物。m.p.138-152℃,MS(+FAB),m/z:672(M+H)+。C40H38ClN5O3.HCl,H2O分析计算值C,66.04；H,5.64；N,9.63。
实测值C,65.22；H,5.49；N,9.32。
实施例13联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-氨基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺用与实施例9方法A所述相同的方法，制备实施例13的化合物，但是用4-N-甲基-N-氨基哌嗪代替二甲基肼。得到为淡黄色固体的目标化合物。m.p.172-182℃,MS(+FAB),m/z:660(M+H)+。
实施例1410-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺用与实施例9方法A所述相同的方法，制备实施例14的化合物，但是用N,N-二甲基乙二胺代替N-甲基哌嗪。得到为白色固体的目标化合物。m.p.85-94℃,MS(+FAB)m/z:632(M+H)+。C37H34ClN5O3.2H2O分析计算值C,66.45；H,5.69；N,10.47。
实测值C,64.57；H,5.50；N,9.28。
实施例15联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-吗啉代-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺用与实施例9方法A所述相同的方法，制备实施例15的化合物，但是用4-吗啉代-哌啶代替N-甲基哌嗪。得到为无定形固体的目标化合物。MS(+FAB),m/z:714(M+H)+。
实施例1610-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸哌嗪-N-甲基酰胺步骤a)2-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯通过注射器向4-硝基-2-甲氧基苯甲酸(50g,250mmol)和甲醇于室温下搅拌的溶液中加入亚硫酰氯(13.9ml,190mmol)。于室温下将该反应物搅拌16小时。真空去除挥发物。将残留物溶于二氯甲烷中。用氢氧化钠(1N)洗涤，分离有机层并干燥(硫酸镁)。真空蒸发得到淡黄色固体(50g),mp80-81℃，将其直接用于下一步骤。C9H9NO5分析计算值C,51.19；H,4.30；N,6.63。
实测值C,50.97；H,4.11；N,6.51。
步骤b)4-氨基-2-甲氧基苯甲酸甲酯于室温、50psi氢气下，将2-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯(12g,57mmol)、钯(10％在活性炭上)和乙醇(150ml)的混合物振摇2小时。通过硅藻土过滤该反应物，用氯仿洗涤硅藻土。蒸发氯仿洗涤液得到黄色固体。经结晶纯化得到淡黄色结晶固体(8.76g),mp148-149℃。C9H11NO3分析计算值C,59.66；H,6.12；N,7.73。
实测值C,59.42；H,6.02；N,7.69。
步骤c)4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸甲酯向回流的2-联苯基羧酸(9.2g,46mmol)的二氯甲烷溶液中加入二甲基甲酰胺(0.1ml,1.4mmol)，然后通过注射器加入纯品草酰氯(8.1ml,92mmol)。将该反应物回流10分钟，然后真空去除挥发物。将残留物再溶于二氯甲烷中，浓缩并高真空下干燥15分钟。将该酰氯溶于二氯甲烷(50ml)中，并加至0℃的4-氨基-2-甲氧基-苯甲酸甲酯(8.4g,46mmol)、二异丙基乙胺(10.5ml,60mmol)和二氯甲烷(200ml)溶液中。将该反应物温热至室温并搅拌16小时。用二氯甲烷稀释该反应物，用水、(1N)氢氧化钠、(1N)盐酸和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)。蒸发得到黄色泡沫状物，使其从甲醇中结晶得到淡黄色固体(16.08g),mp 141-142℃。C22H19NO4分析计算值C,73.12；H,5.30；N,3.88。
实测值C,72.93；H,520；N,3.83。
步骤d)4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸将氢氧化钠(1N,38ml,38mmol)加至回流的4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸甲酯(11.6g,32mmol)的甲醇(200ml)溶液中。将该反应物回流2小时。真空去除挥发物，残留物溶于乙酸乙酯/HCl(水溶液)中。用乙酸乙酯再萃取水溶液层，合并有机萃取物并干燥(硫酸镁)。蒸发得到淡橙色泡沫状物，使其从甲醇中结晶得到白色固体(9.33g),mp158-159℃。C21H17NO4分析计算值C,72.61；H,4.93；N,4.03。
实测值C,72.20；H,4.61；N,3.96。
步骤e)[3-甲氧基-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-联苯基-2-甲酰胺(carboxylic acid-amide)向回流的4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酸(3.29g,9.5mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入二甲基甲酰胺(0.02ml,0.28mmol)，然后通过注射器加入纯品草酰氯(0.87ml,10mmol)。将该反应物回流10分钟，然后真空去除挥发物。将残留物再溶于二氯甲烷中，蒸发并高真空下干燥15分钟。将该酰氯溶于二氯甲烷(50ml)中，并加至0℃的10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂(1.57g,8.55mmol)、N,N-二异丙基乙胺(1.93ml,12.35mmol)和二氯甲烷(200ml)溶液中。将该反应物温热至室温并搅拌2小时。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水、(1N)氢氧化钠、(1N)盐酸和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)。蒸发得到黄色泡沫状物，使其从甲醇中结晶得到白色固体(2.05g),mp224-226℃。C33H27N3O3分析计算值C,76.87；H,5.35；N,8.07。
实测值C,76.82；H,5.23；N,8.04。
步骤f)N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基]羰基]-2-甲氧基苯基]-2-苯基苯甲酰胺于0℃，通过注射器向实施例357步骤e产物(2.5g,4.87mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入三氯乙酰氯(1.09ml.9.74mmol)，于室温下将该反应物搅拌4小时。用二氯甲烷稀释该反应物，用碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)有机萃取物。蒸发并通过硅胶垫过滤残留物，用乙酸乙酯/己烷1∶1洗脱，得到为白色泡沫状物的所需产物(1.5g),mp139-143℃。C35H26Cl3N3O4+0.25H2O分析计算值C,63.36；H,4.03；N,6.33。
实测值C,63.05；H,4.03；N,6.21。
步骤g)10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸将氢氧化钠(1N,2.0ml,1.92mmol)加至室温下的N-[5-[3-三氯甲基羰基]-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基]羰基]-2-甲氧基苯基]-2-苯基苯甲酰胺(0.8g,1.2mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液中，将该反应物搅拌1.5小时。加入盐酸(1N)，用冰稀释该反应物。真空去除挥发物，过滤白色固体，干燥得到0.8g目标化合物，mp149-151℃。C34H27N3O5分析计算值C,70.21；H,5.14；N,7.22。
实测值C,70.20；H,4.89；N,7.31。
步骤h)10-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸哌嗪-N-甲基酰胺于室温下，将10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸(0.434g,0.778mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.157g,0.817mmol)、4-二甲基氨基吡啶(催化量)和N-甲基哌嗪(.091ml,0.817mmol)的二氯甲烷溶液搅拌3.5小时。用二氯甲烷稀释该反应物，用水和盐水洗涤。干燥(硫酸镁)有机萃取物，浓缩得到白色泡沫状物。经快速层析(硅胶，洗脱剂为氯仿-甲醇50∶1，然后为20∶1)纯化，并从乙醇中结晶得到白色固体(0.23g),mp139-140℃。C39H37N5O4+1.0H2O分析计算值C,71.21；H,5.98；N,10.65。
实测值C,71.25；H,5.99；N,10.64。
实施例1710-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼于0℃，通过注射器向实施例16步骤h的产物(1.0g,1.947mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三氯乙酰氯(0.434ml,3.89mmol)，于室温下将该反应物搅拌4小时。用二氯甲烷稀释该反应物，用碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)有机萃取物。蒸发并通过硅胶垫过滤残留物，用乙酸乙酯-己烷1∶1洗涤，得到三氯代酮，浓缩时为白色泡沫状物。于室温下，将该泡沫状物溶于纯N,N-二甲基肼中，然后回流下加热25分钟。真空去除挥发物，将残留物吸附于硅胶上，经快速层析纯化(洗脱溶剂为乙酸乙酯-己烷1∶1，然后为乙酸乙酯-甲醇4∶1)。从乙醇中结晶得到褐色固体(0.23g),mp164-165℃。C36H33N5O4+1.0H2O分析计算值C,70.0；H,5.71；N,11.34。
实测值C,70.01；H,5.62；N,11.29。
实施例1810-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(甘氨酰基)-酰胺用与实施例8所述相同的方法，但是用叔丁基甘氨酸代替二甲基肼作为反应物制备实施例18的化合物。于室温下，通过用甲酸(2.3ml)处理，将产生的目标化合物的叔丁酯(0.725g)处理48小时得到目标化合物，为白色无定形固体。mp176-186℃。MS(ESI)m/z617(M-H)+。C36H30N4O6分析计算值C,67.9；H,4.40；N,9.05。
实测值C,66.51；H,4.23；N,8.44。
实施例1910-[2-氯代-4-(2-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂草-10-羰基)-苯基]-2-噻吩-2-基-苯甲酰胺步骤a)2-溴代苯甲酰氯于氮气下，向溴代苯甲酸(1.88g,9.35mmol)的无水四氢呋喃(20ml)溶液中加入1滴二甲基甲酰胺，接着加入草酰氯(1ml,11.4mmol)。于室温下，搅拌该混合物至不再产生气体，然后加热至回流。将该溶液冷却至室温，然后真空浓缩得到金黄色油状物(1.87g)，将其不经进一步纯化使用。
步骤b)2-溴代-N-[3-氯代-4-(10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-苯甲酰胺于氮气下，向搅拌的10,11-二氢-10-(2-氯代-4-氨基苯甲酰基)-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂(2.25g,6.66mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液中加入三乙胺(1.19ml,8.53mmol)。将该混合物冷却至0℃，然后滴加2-溴代苯甲酰氯(1.87g,8.52mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液。去除冷却浴，继续搅拌14小时。将该反应混合物倾至水中。分离有机层，顺序用水、饱和的碳酸氢钠水溶液和水洗涤，然后干燥(硫酸钠)。过滤该物质，真空浓缩得到淡橙色泡沫状物(2.00g)。经硅胶快速层析纯化，用己烷-乙酸乙酯(1∶1)作为流动相，得到白色粉末(1.39g),mp188-189℃。MS(EI)m/z519(M)+。C26H19BrClN3O2+0.5H2O分析计算值C,58.93；H,3.80；N,7.93。
实测值C,59.12；H,3.62；N,7.75。
步骤c)N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-2-噻吩-2-基-苯甲酰胺将2-溴代-N-[3-氯代-4-(10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-苯甲酰胺(1.04g,2.0mmol)、噻吩-2-硼酸(boronic acid)(0.32g,2.4mmol)和氢氧化钡八水合物(0.88g,2.8mmol)悬浮于乙二醇二甲醚(28.8ml)和水(4.8ml)中。于室温下搅拌该不均一的混合物，通入氮气10分钟，然后加入双(三苯膦)氯化钯(Ⅱ)(0.17g,0.24mmol)，将该反应物置于氮气压力下。将该反应物于70℃油浴上加热。20小时后，再向该反应物中加入噻吩-2-硼酸(0.13g,1mmol)。共反应24小时后，再向反应烧瓶中加入双(三苯膦)氯化钯(Ⅱ)(84mg,0.12mmol)。将该反应物冷却至室温,将混合物萃取入苯中。用盐水洗涤合并的有机萃取物，干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到棕色固体(1.42g)。用乙酸乙酯研磨该固体并过滤。滤液经硅胶快速层析纯化，用己烷-乙酸乙酯(1∶1)作为流动相，得到淡黄色固体，于78℃、真空下干燥两天(0.59g),mp132-136℃。MS(EI)m/z523(M)+。C30H22ClN3O2S+0.5H2O分析计算值C,67.53；H,4.36；N,7.88。
实测值C,67.53；H,4.08；N,7.90。
步骤d)N-[3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-2-噻吩-2-基-苯甲酰胺根据实施例1步骤A所示的方法，将步骤C的产物转化为相应的三氯代酮。
步骤e)10-[2-氯代-4-(5-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸根据实施例1步骤B所示的方法，将步骤D制备的三氯代酮水解为目标酸。
步骤f)10-[2-氯代-4-(2-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼根据实施例8的方法，使步骤D制备的三氯代酮与N,N-二甲基肼反应。
实施例2010-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-3-吡啶-2-基-苯甲酰胺步骤a)用与实施例19步骤19a和19b所述相同的方法制备实施例20a化合物。在步骤19a中，用2-(吡啶-3-基)-苯甲酸代替2-溴代苯甲酸。2-(吡啶-3-基)-苯甲酸的制备根据Timari等(Chem.Ber.1992,125,929)所述方法进行，用3-溴代吡啶代替2-溴代吡啶。得到为灰白色粉末的目标化合物(0.21g),mp155-158℃。C31H23ClN4O2+0.85H2O分析计算值C,69.68；H,4.66；N,10.49。
实测值C,69.69；H,4.70；N,10.16。
N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基}-3-吡啶-2-基-苯甲酰胺步骤b)根据实施例1步骤A所示方法，将步骤A的产物转化为相应的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸步骤c)根据实施例1步骤B所示方法，将步骤B制备的三氯代酮水解为目标酸。
10-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺步骤d)用实施例9的方法A将步骤C制备的酸转化为酰胺。
实施例2110-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺N-[3-氯代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-4-基-苯甲酰胺步骤a)用与实施例19步骤19a和19b所述相同的方法制备实施例21a化合物。在步骤19a中，用2-(吡啶-4-基)-苯甲酸代替2-溴代苯甲酸。2-(吡啶-4-基)-苯甲酸的制备根据Timari等(Chem.Ber.1992,125,929)所述方法进行，用4-溴代吡啶盐酸盐和增加量的碱代替2-溴代吡啶。得到为淡黄色固体的目标化合物(1.21g),mp165-168℃。C31H23ClN4O2+0.47H2O分析计算值C,70.59；H,4.57；N,10.62。
实测值C,70.58；H,4.50；N,10.33。
N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基}-2-吡啶-4-基-苯甲酰胺步骤b)根据实施例1步骤A所示方法，将步骤A的产物转化为相应的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸步骤c)根据实施例1步骤B所示方法，将步骤B制备的三氯代酮水解为目标酸。
10-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基乙基)-甲基-酰胺步骤d)用实施例10的方法将步骤C制备的酸转化为其2-二甲基氨基-乙基-甲基酰胺。
实施例2210-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺N-[4-(3-甲氧基-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步骤a)2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基苯甲酰基)氨基]苯甲酰氯于氮气下，向2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基苯甲酰基)氨基]苯甲酸(0.92g,2.64mmol)的无水四氢呋喃(25ml)溶液中加入1滴二甲基甲酰胺，接着加入草酰氯(0.28ml,3.17mmol)。于室温下，搅拌该混合物至气体不再产生。真空浓缩该溶液，得到褐色固体(1.16g)，将其不经纯化使用。
步骤b)N-[4-(3-甲氧基-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺于氮气下，向搅拌的10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂(0.405g,2.20mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入三乙胺(0.37ml,2.64mmol)。将该混合物冷却至0℃，滴加粗品2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基苯甲酰基)氨基]苯甲酰氯(1.16g)的二氯甲烷(30ml)溶液。5小时后，将该反应混合物倾至水中。分离有机层，顺序用水和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用水洗涤一次，干燥(硫酸钠)。过滤该物质并真空浓缩得到栗色(marron)固体(1.1g)。经硅胶快速层析纯化，用己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷-甲醇(3∶6∶2∶0.5)作为流动相，接着真空浓缩，得到淡紫色固体(0.88g),mp138-140℃。MS(FAB)m/z515(M+H)。C32H26N4O3+0.43H2O分析计算值C,73.58；H,5.18；N,10.73。
实测值C,73.59；H,5.05；N,10.47。
N-{3-氯代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基}-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步骤c)根据实施例1步骤A所示方法，将步骤B的产物转化为相应的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸步骤d)根据实施例1步骤B所示方法，将步骤C制备的三氯代酮水解为目标酸。
10-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺步骤d)根据实施例9的方法B，将步骤D制备的酸转化为其N-甲基哌嗪酰胺。
实施例2310-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼N-[3-溴代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步骤a)2-溴代-4-氨基苯甲酸甲酯用1滴二甲基甲酰胺处理2-(吡啶-2-基)苯甲酸(2.85g,14.3mmol)的无水四氢呋喃(20ml)溶液，接着用草酰氯(1.5ml,17.1mmol)的无水四氢呋喃(5ml)溶液处理。当不再产生气体时，将该混合物温热至回流5分钟，冷却至室温，真空浓缩得到亮黄色固体。将该固体用四氢呋喃(20ml)制成淤浆，再次浓缩。将粗品酰氯不经进一步纯化用于下一步骤。
步骤b)2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酸甲酯将2-溴代-4-氨基苯甲酸甲酯(3g,13mmol)和三乙胺(2.5ml,18mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液冷却至0℃，用2-(吡啶-2-基)苯甲酰氯的二氯甲烷(20ml)淤浆处理。于室温下搅拌4小时。用20％乙酸骤冷该反应物，顺序用饱和的碳酸氢钠水溶液、水和饱和的盐水洗涤。干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到5.23g白色泡沫状物。MS(+FAB)m/z411/413(M+H)+。C20H15BrN2O3分析计算值C,58.41；H,3.68；N,6.81。
实测值C,57.73；H,3.66；N,6.54。
步骤c)2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酸用1N氢氧化钠(15ml,1.2eq)处理2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酸甲酯的甲醇(100ml)溶液。将该溶液温热至回流3.5小时，再加入1N氢氧化钠(10.4ml，共2eq)。再回流2小时，于室温下将该反应物搅拌过夜。真空浓缩样品得到淤浆，用水稀释。用乙酸乙酯洗涤水溶液，用乙酸将水层的pH调至4.5-5。产物沉淀，过滤并空气中干燥，得到棕色固体(4.43g)。MS(EI)m/e:397/399(M+)。
步骤d)2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酰氯于氮气下，向2-溴代-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酸(1.4g,3.52mmol)的无水四氢呋喃(25ml)溶液中加入1滴二甲基甲酰胺，接着加入草酰氯(0.37ml,4.23mmol)。于室温下搅拌该混合物至无气体产生，然后加热至回流。将该反应混合物冷却至室温，真空浓缩得到棕色固体(1.385g)，将其不经进一步纯化使用。
步骤e)N-[3-溴代-4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺于氮气下，向搅拌的10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂(0.54g,2.93mmol)的二氯甲烷(35ml)溶液中加入三乙胺(0.49ml,3.52mmol)。将该混合物冷却至0℃，然后滴加粗品2-甲氧基-4-[(2-吡啶-2-基-苯甲酰基)氨基]苯甲酰氯(1.4g)的二氯甲烷(5ml)的悬浮液。加入完毕后，将该反应混合物温热至室温。18小时后，将该反应混合物倾至水中，顺序用水、饱和的碳酸氢钠水溶液、10％乙酸水溶液(两次)、饱和的碳酸氢钠水溶液(一次)和水(一次)洗涤。干燥(硫酸钠)有机溶液，过滤并真空浓缩，得到深紫色泡沫状物(1.73g)。经硅胶快速层析纯化，用己烷-乙酸乙酯(1∶2)作为流动相，然后真空浓缩，得到白色固体(1.23g),mp 227.5-229℃。MS(ESI)m/z563(M)+。C31H23BrN4O2分析计算值C,66.08；H,4.11；N,9.94。
实测值C,65.84；H,3.86；N,9.85。
N-[3-溴代-4-[3-(三氯代羰基)-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基}-2-吡啶-2-基-苯甲酰胺步骤f)根据实施例1步骤A所示方法，将步骤E的产物转化为相应的三氯代酮。
10-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸步骤g)根据实施例1步骤B所示方法，将步骤F制备的三氯代酮水解为目标酸。
10-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼步骤h)根据实施例8所示方法，用1,1-二甲基肼处理步骤F制备的三氯代酮。
实施例2410-[2-氯代-4-(8-喹啉基(quinoloinylyl)氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺喹啉-8-羧酸[4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-3-氯代-苯基]-酰胺步骤a)用与实施例19步骤19a和19b所述相同的方法，制备实施例24的化合物。在步骤19a中，用喹啉-8-羧酸代替2-溴代苯甲酸。得到为白色粉末的目标化合物(0.69g),mp230-231℃。C29H21ClN4O2+0.33H2O分析计算值C,69.81；H,4.38；N,11.23。
实测值C,69.81；H,4.09；N,11.14。
喹啉-8-羧酸-4-[3-(三氯代羰基)(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-3-氯代-苯基]-酰胺步骤b)根据实施例1步骤a所示方法，将步骤A的产物转化为相应的三氯代酮。
10-[2-氯代-4-(8-喹啉甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸步骤c)根据实施例1步骤b所示方法，将步骤B制备的三氯代酮水解为目标酸。
10-[2-氯代-4-(8-喹啉基氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺步骤d)根据实施例9的方法B，将步骤c制备的酸转化为N-甲基哌嗪酰胺。
实施例252-苯基-环戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-酰胺步骤a)[2-苯基-环戊-1-烯羧酸]将氢氧化钠(1N,10.7ml,11.8mmol)加至回流的2-苯基-环戊-1-烯羧酸甲酯(2.32g,10.7mmol)(Lin等，J.Chin.Chem.Soc.,1993,40,273-282)的甲醇(40ml)溶液中。将该反应物回流2小时。真空去除挥发物，式残留物分配于乙酸乙酯和盐酸(1N)之间。用乙酸乙酯再萃取水层，合并有机萃取物，干燥(硫酸镁)。真空蒸发溶液得到淡黄色固体，使其从丙酮/己烷中重结晶得到白色固体(1.27g),mp145-146℃。C12H12O2分析计算值C,76.57；H,6.43；N,
实测值C,76.47；H,6.35；N,步骤b)2-苯基-环戊-1-烯碳酰氯通过注射器向2-苯基-环戊-1-烯羧酸(0.43g,2.28mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入二甲基甲酰胺(1滴)，然后加入纯品草酰氯(0.4ml,4.56mmol)。于室温下，将该反应物搅拌2小时，然后真空去除挥发物。将残留物再溶于二氯甲烷中，真空浓缩，在高真空下干燥15分钟，得到琥珀色油状物，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤c)2-苯基-环戊-1-烯羧酸[4-(5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-3-氯代-苯基]-酰胺将实施例25步骤b的产物2-苯基-环戊-1-烯碳酰氯溶于二氯甲烷(20ml)中，于室温下加至10,11-二氢-10-(2-氯代-4-氨基苯甲酰基)-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂(0.77g,2.28mmol)、4-二甲基氨基吡啶(催化量)的二氯甲烷(20ml)溶液中。然后通过注射器加入三乙胺(0.38ml,2.74mmol)。将该反应物搅拌16小时，用二氯甲烷稀释，用碳酸氢钠、盐酸(1N)和盐水洗涤。干燥(硫酸镁)二氯甲烷溶液，真空浓缩得到黄色固体。经快速层析纯化(洗脱溶剂氯仿/甲醇50/1和己烷/乙酸乙酯2/1)，得到白色固体(0.70g),mp121-122℃。C31H26ClN3O2分析计算值C,73.29；H,5.16；N,8.27。
实测值C,73.18；H,5.02；N,8.11。
2-苯基-环戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-三氯代羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-酰胺步骤d)根据实施例1步骤A所示方法，将步骤C的产物转化为相应的三氯代酮。
2-苯基-环戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-羧酸-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-酰胺步骤e)根据实施例1步骤B所示方法，将步骤D制备的三氯代酮水解为目标酸。
2-苯基-环戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-酰胺步骤f)根据实施例10所示方法，使上述步骤e制备的酸反应制备目标酰胺。
对在实验前(但不是在实验中)可以自由饮水的清醒大鼠中内源性精氨酸血管加压素抗利尿(V2)反应的拮抗作用的影响给雄性或雌性血压正常的Sprague-Dawley大鼠(Charles RiverLaboratories,Inc.,Kingston,NY)(体重400-450g)供应LaboratoryRodent食料5001号(PMI Feeds,Inc.,Richmond,IN)，水随意。在实验当天，将大鼠单独置于配有不锈钢网(以分离粪便和尿)和收集尿的漏斗的代谢笼中。以各种口服剂量给予溶媒或参照药物。在试验过程中，不给大鼠提供水或食物。给予受试化合物后收集尿4小时。4小时后，测定尿体积。用Fiske One-Ten渗透压计(Fiske Associates,Norwood,MA,02062)或Advanced CRYOMATIC渗透压计(3 C2型，AdvancedInstruments,Norwood,MA)测定尿重量摩尔渗透压浓度。Na+、K+和Cl-离子的测定用Beckman SYNCHRON EL-ISE Electrolyte Systemanalyzer离子特异性电极进行。在下列结果中，相对于AVP-对照尿体积增加和重量摩尔渗透压浓度降低表明有活性。本发明代表性化合物的该实验结果列于表5中。
与用表达人V2血管加压素受体的cDNA转染的小鼠成纤维细胞系(LV-2)细胞膜的结合细胞膜的制备吸出含有生长至汇合的贴壁细胞的175ml容量的烧瓶中的培养液。用2×5ml磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤含有贴壁细胞的烧瓶，每次吸出液体。最后，加入5ml不含酶的Hank氏基的溶液(Specialty Media,Inc.,Lafayette,NJ)，使烧瓶静置2分钟。将所有烧瓶中的内容物倾至离心管中，于300×g使细胞沉淀15分钟。吸出Hank氏基溶液，将细胞在含有0.25M蔗糖和1.0mM EDTA、pH为7.4的10.0mMTris.HCl缓冲液中，用polytron匀化10秒钟，设置为6号。将匀浆于1500×g离心10分钟以去除空胞膜。将上清液于100,000×g离心60分钟以沉淀受体蛋白。离心后，将该沉淀再悬浮于少量的pH为7.4的50.0mM Tris.HCl缓冲液中。用Lowry法测定蛋白含量，将受体膜悬浮于含有0.1mM苯基甲基磺酰氟(PMSF)和0.2％牛血清清蛋白(BSA)的50.0mM Tris.HCl缓冲液中，使每毫升悬浮液中含有2.5mg受体蛋白。
受体结合在进行结合实验时，将下列物质以毫升为单位加至微量滴定板的96孔内含有0.2％热灭活的BSA、10.0mM氯化镁和下列蛋白酶抑制剂的100.0ml的100.0mM Tris.HCl缓冲液亮抑蛋白酶肽，1.0mg％；抑酶肽，1.0mg％；1,10-二氮杂菲，2.0mg％；胰蛋白酶抑制剂，10.0mg％和0.1mM PMSF；20.0ml[3H]精氨酸8，血管加压素(S.A.75.0Ci/mmol)0.8nM，并加入80.0ml组织膜(200.0mg组织蛋白)开始反应。将所述滴定板置于桌面上静置120分钟以达到平衡。非特异性结合在1.0mM未标记的配体(以体积20ml加入)存在下测定。对于受试化合物而言，将其溶于50％二甲基亚砜(DMSO)中，以体积20.0ml加入，至最终孵化体积为200ml。结合完成后，用Brandel细胞捕获仪(Gaithersburg,MD)过滤收集每孔的内容物。由配体-受体配合物捕获于滤膜上的放射活性在Packard LS计数仪上液体闪烁计数测定，氚的效能为65％。用LUNDON-2的竞争程序(LUNDON SOFTWARE,OH)分析数据得到IC50值。
本发明的代表性化合物在该实验中的结果示于表5中。
表5大鼠尿体积数据*和与用表达人V2受体的cDNA转染的小鼠成纤维细胞系(LV-2)膜的结合测定实施例号尿体积(ml/4hr)血管加压素V2结合受体10mg/kg大鼠口服nM实施例113.214实施例211.5实施例3 22 15实施例49.2 60实施例59.1 60实施例65.6实施例719.24.3实施例840.98.6实施例923.73.3实施例10 22.25.5实施例11 20.59.3实施例12 21.4实施例13 16.8实施例14 11.3实施例15 19.310.7实施例16 24.3实施例17 9.4实施例18 7.8 7.6*口服给予大鼠10mg/kg剂量后4小时产生的尿体积
权利要求
1．下式的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式
其中R选自-OH、-NR1R3、-NHOR1、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2独立为氢或低级烷基；R3选自
或
X为CH2、NR1、O、S；p为1-4；q为2-4；R4和R5独立选自氢、低级烷基、卤素、氨基、氰基、三氟甲基、羟基或低级烷氧基；R6为下式的部分
Ar选自
或
R7和R8独立选自氢、卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基、羟基或三氟甲基；R9为下式的部分
或
R10选自C3-C7环烷基、环戊烯基、环己烯基或下式部分
Ar’选自
或
R11和R12独立选自氢、F、Cl、Br、氰基、低级烷基、低级烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基或三氟甲基；Ar”选自a)苯基；b)具有一个或两个选自N、O、S的杂原子的5元芳(不饱和)杂环；c)具有三个或四个氮原子的5元芳(不饱和)杂环；或d)具有一个、两个或三个氮原子的6元芳(不饱和)杂环；且A”可任选被卤素、低级烷基、羟基、低级烷氧基或三氟甲基取代。
2．具有下式的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式
其中R选自-OH、-NR1R3、-NH-(CH2)-COOH、
或
R1和R2独立为氢或低级烷基；R3为
X为CH2、NR1、O、S；p为1-4；q为2-4；R4和R5独立选自氢、低级烷基、卤素、氨基、羟基、氰基、三氟甲基或低级烷氧基；R6为下式的部分
Ar选自
或
R7和R8独立选自氢或卤素、低级烷氧基；R9为下式的部分
或
R10为下式部分
Ar’选自
或
R11和R12独立选自氢、F、Cl、Br、氰基、低级烷基、低级烷氧基、三氟甲基、苯氧基或具有下式的取代的苯氧基；
其中R14选自氢、卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基、羟基或三氟甲基；A”选自苯基2-吡啶基或具有一个或两个选自N、O、S的杂原子的5元芳(不饱和)杂环。
3．具有下式的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式
其中R选自-OH、-NR1R3或
R1和R2独立选自氢或低级烷基；R3为
q为2-4；R6为下式的部分
Ar选自
或
R7和R8独立选自氢或卤素；R9为下式的部分
或
R10为下式的部分
Ar”选自苯基或具有一个或两个选自N、O、S的杂原子的5元芳(不饱和)杂环。
4．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
5．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(5-氟代-2-甲基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸，钾盐(1∶1)。
6．权利要求1的化合物为N-{3-氯代-4-[3-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-5-氟代-2-甲基-苯甲酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
7．权利要求1的化合物为2-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲酰基)氨基]苯甲酰基(bnezol)]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-基]羰基]-1,1,1-三甲基碘化或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
8．权利要求1的化合物为2-[[10-[2-氯代-4-[(5-氟代-2-甲基苯甲酰基)氨基]苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-基]羟基亚甲基]-1,1,1-三甲基内盐或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
9．权利要求1的化合物为N-[5-[3-三氯代甲基羰基-[5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10(11H)-基]羰基]-2-氯代苯基]-2-苯基-苯甲酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
10．权利要求1的化合物为10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
11．权利要求1的化合物为10-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
12．权利要求1的化合物为10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
13．权利要求1的化合物为联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-哌啶基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
14．权利要求1的化合物为联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-二甲基氨基-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
15．权利要求1的化合物为联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-氨基羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
16．权利要求1的化合物为10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
17．权利要求1的化合物为联苯基-2-羧酸{3-氯代-4-[3-(4-吗啉代-哌啶-1-羰基)-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基]-苯基}-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
18．权利要求1的化合物为10-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸哌嗪-N-甲基酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
19．权利要求1的化合物为10-(4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-甲氧基-苯甲酰基)-10,11-二氢-5H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
20．权利要求1的化合物为10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(甘氨酰基)-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
21．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(2-噻吩-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
22．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(3-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
23．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(4-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
24．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
25．权利要求1的化合物为10-[2-溴代-4-(2-吡啶-2-基-苯甲酰氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-1,1-二甲基酰肼或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
26．权利要求1的化合物为10-[2-氯代-4-(8-喹啉基(quinoloinylyl)氨基)-苯甲酰基]-10,11-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸-哌嗪-N-甲基酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
27．权利要求1的化合物为2-苯基-环戊-1-烯甲酸[3-氯代-4-(3-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺-5H,11H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-10-羰基)-苯基]-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
28．权利要求1的化合物为10-{4-[(联苯基-2-羰基)-氨基]-2-氯代-苯甲酰基}-10,1 1-二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]苯并二氮杂-3-甲酸(甘氨酰基)-酰胺或其药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。
29．用于治疗哺乳动物以过量肾水再吸收为特征的疾病的药用组合物，该药用组合物包含有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物以及适当的药用载体。
30．权利要求29的药用组合物，其中所述哺乳动物的以过量肾水再吸收为特征的疾病为充血性心力衰竭、肾病综合征、低钠血、冠状血管痉挛、心肌缺血、肾血管痉挛、肝硬变、不适当的抗利尿激素分泌综合征、脑水肿、脑缺血或脑出血性休克。
31．治疗哺乳动物的以过量肾水再吸收为特征的疾病的方法，该方法包括给予需要的哺乳动物有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前体药物以及适当的药用载体。
32．权利要求31的方法，其中所述哺乳动物的以过量肾水再吸收为特征的疾病为充血性心力衰竭、肾病综合征、低钠血、冠状血管痉挛、心肌缺血、肾血管痉挛、肝硬变、不适当的抗利尿激素分泌综合征、脑水肿、脑缺血或脑出血性休克。
33．制备权利要求1所定义的式Ⅰ化合物的方法，该方法包括下列步骤之一a)使下式的化合物
(A)或
(B)其中R4、R5和R6与权利要求1定义相同，hal为卤素，例如氯，与式HNZ1Z2的胺反应，其中-NZ1Z2可以为-NR1R3、NHOR1、-NH-(CH2)n-COOH、
或
其中n、X、R1、R2和R3与权利要求1定义相同，得到相应的式Ⅰ化合物，其中R与上述定义相同；或b)用碱水溶液处理下式的化合物
(A)其中R4、R5和R6与权利要求1定义相同，hal为卤素，如氯，得到相应的式Ⅰ化合物，其中R为OH；或c)用下式的酸
或其活性衍生物，如酰卤或酸酐，使下式的化合物酰化
其中R、R4和R5与权利要求1定义相同，但是R不为OH；R14为
或
其中R7和R8与权利要求1定义相同，得到相应的式Ⅰ化合物，其中R9与权利要求1定义相同。
全文摘要
本发明涉及三环非肽血管加压素拮抗剂,它们可以用于治疗需要降低血管加压素水平的疾病,例如充血性心力衰竭,过量肾水再吸收疾病和血管阻力增加以及冠状血管收缩增加的疾病,所述化合物具有通式(Ⅰ)结构。
文档编号A61P13/12GK1234801SQ97199129
公开日1999年11月10日 申请日期1997年10月22日 优先权日1996年11月1日
发明者E·J·特布斯基, A·J·莫利纳里, J·F·伯格利, M·A·阿什韦尔, T·J·卡吉安努 申请人:美国家用产品公司